慢性肾衰竭营养不良大鼠骨骼肌细胞凋亡及中药的干预实验

目的：观察慢性肾衰竭（chronic renal failure,CRF）营养不良大鼠骨骼肌细胞凋亡情况,及中药肾衰养真胶囊对其的影响。方法：SD雄性大鼠,采用5/6肾切除同时予4%酪蛋白饮食制作CRF营养不良大鼠模型,随机分为正常组,模型组,中药组和西药组。治疗4周后,检测肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、白蛋白（Alb）、血红蛋白（Hb）,TUNEL法检测骨骼肌细胞凋亡率,Western Blot检测骨骼肌细胞凋亡蛋白酶3（Caspase-3）活性片段（Cleaved Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2基因相关蛋白（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白水平。结果：模型组大鼠骨骼肌细胞凋亡率明显增加（P〈0.01）,Cleaved Caspase-3和Bax表达均显著增加（P〈0.01）,Bcl-2表达显著下降（P〈0.01）。中药干预后,CRF营养不良大鼠骨骼肌细胞凋亡率显著减少（P〈0.01）,Cleaved Caspase-3和Bax表达均显著下降（P〈0.01）,Bcl-2表达显著增加（P〈0.01）,同时大鼠Alb、Hb显著升高（P〈0.01）。结论：Caspase-3依赖的细胞凋亡可能参与了CRF营养不良骨骼肌蛋白的降解,并诱导了骨骼肌萎缩。中药肾衰养真胶囊可能通过下调Cleaved Caspase-3和Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,抑制骨骼肌细胞凋亡,从而改善CRF营养不良。

肾衰养真胶囊对5/6肾切除慢性肾衰营养不良大鼠营养状态的影响

目的:观察肾衰养真胶囊对5/6肾切除慢性肾衰竭(CRF)营养不良大鼠营养状态的影响。方法:5/6肾切除同时予4%酪蛋白饮食制作CRF营养不良大鼠模型,观察其营养不良发生时间,将符合条件的大鼠随机分为正常组、模型组、肾衰养真胶囊组和开同组。治疗4周后检测体重、白蛋白、血红蛋白、甘油三脂、总胆固醇、胰岛素样生长因子-1等指标的变化,进行光镜(HE、PAS染色)观察肾组织病理学改变。结果:大鼠在5/6肾切后10周末出现营养不良,与模型组比较,经治疗4周后肾衰养真胶囊组大鼠体重及摄食量显著增加白蛋白、血红蛋白、胰岛素样生长因子-1、甘油三脂、总胆固醇水平显著升高,肾组织病理形态明显改善,肾功能有明显的改善。结论:肾衰养真胶囊能改善5/6肾切慢性肾衰竭营养不良模型大鼠的营养状态。

中成药治疗糖尿病肾病的系统评价及荟萃分析

目的评价中成药治疗糖尿病肾病的临床疗效及安全性。方法检索中国生物医学文献数据库、中国知网数据库、维普全文期刊数据库、万方数据库及PubMed,2003年6月至2013年6月收录的期刊文献资料,纳入符合要求的随机对照临床研究论文,参照Cochrane系统评价的要求,对选择纳入的临床试验进行方法学质量评估、数据提取和数据分析。选取其中评分在3～7分的文献,运用Rev.Man 5.0.23软件进行荟萃分析。研究结果应用危险比(RR)及其95%可信区间(95%CI)表示,文献发表偏倚用漏斗图分析。结果 4篇中成药与西药临床疗效对照实验文献具有同质性(P=0.14>0.10,I2=45%),采用固定效应模型荟萃分析,结果表明中成药治疗早期糖尿病肾病疗效好于西药组,差异有统计学意义(RR=1.28,95%CI 1.17～1.41,Z=5.31;P<0.05)。结论中成药可以缓解早期糖尿病肾病的症状、降低蛋白尿及改善肾功能,无严重的不良反应,为一种安全有效的治疗方法。

肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭营养不良大鼠的肾保护作用

目的观察肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭(CRF)营养不良大鼠的肾保护作用。方法予0.5%腺嘌呤和4%酪蛋白混合饲料喂养制作CRF营养不良大鼠模型,观察其营养不良发生时间,符合条件的随机分为正常组、模型组、肾衰养真胶囊组和开同组。经肾衰养真胶囊灌胃4周,以开同为阳性对照药,观察Scr、BUN、24hUpr(24h尿蛋白)、ALB、Hb、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的变化,进行光镜(HE、PAS染色),透射电镜以及免疫荧光观察肾组织病理学改变。结果与模型组比较,肾衰养真胶囊组大鼠的肾组织病理形态明显改善,肾衰养真胶囊可降低Scr、BUN、24hUpr,升高ALB、Hb、IGF-1。结论肾衰养真胶囊可显著减轻CRF营养不良模型大鼠肾组织病理学改变,改善肾功能及营养状况。

肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭营养不良大鼠Leptin-下丘脑NPY、POMC轴的影响

目的观察肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)营养不良大鼠瘦素(leptin,LP)-下丘脑神经肽Y(neusropeptide Y,NPY)及阿片-促黑素细胞皮质素原(proopiomelanocortin,POMC)轴的影响。方法 42只SD雄性SPF级大鼠,随机选取正常组8只,其余大鼠采用5/6肾切除同时予4%酪蛋白饮食制作CRF营养不良大鼠模型,观察其营养不良发生时间,随机分为肾衰养真胶囊组(SSYZC组)11只、复方α-酮酸组(对照组)11只、模型组12只。治疗4周后,检测肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、24小时尿蛋白(24 hour urine protein,24 h Upr)、白蛋白(albumin,ALB)、血红蛋白(haemoglobin,Hb)、胰岛素样生长因子-1(type-1 insulin like growth factor,IGF-1)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三脂(triglyeride,TG),动态观察摄食量及体重变化,应用放射免疫法检测血浆瘦素(leptin,LP)、下丘脑神经肽Y(neusopeptide Y,NPY)和RT-PCR法检测下丘脑OB-Rb mRNA、NPYmRNA和POMCmRNA表达水平。结果 CRF大鼠在术后10周末出现营养不良,SSYZC组大鼠摄食量、体重显著增高(P<0.05),肾功能及营养状况明显改善(P<0.05),肾衰养真胶囊可降低血浆LP、NPY水平(P<0.05);可上调下丘脑NPY mRNA表达(P<0.01)及下调OB-Rb mRNA、POMC mRNA表达(P<0.01)。结论肾衰养真胶囊可能通过上调下丘脑NPY mRNA表达及下调OB-Rb mRNA、POMC mRNA表达,从而促进大鼠摄食,改善CRF营养不良。

肾衰养真胶囊对CRF营养不良大鼠下丘脑信号转导蛋白STAT3表达的影响

目的:观察肾衰养真胶囊(Shenshuai Yangzhen Capsule,SYC)对慢性肾衰竭(Chronic renal failure,CRF)营养不良大鼠下丘脑信号传导转录活化因子3(Signal transducer and activator of transcription3,STAT3)表达的影响。方法:采用含0.5%腺嘌呤及4%酪蛋白饲料联合喂养的方法制作CRF营养不良大鼠模型,检测BUN、Scr、Hb,Alb等生化指标,观察其营养不良发生时间,符合CRF营养不良模型的,随机分为正常组、模型组、SYC组和开同组。治疗4周后,应用放射免疫法检测血浆瘦素(Leptin,LP)水平;Western免疫印迹法检测下丘脑STAT3蛋白表达水平。结果:治疗后,SYC组大鼠营养状况明显改善Hb、Alb显著升高,血浆LP及下丘脑STAT3蛋白表达显著下调。结论:SYC可改善CRF营养不良大鼠的营养状况,其机制可能是通过下调血浆LP水平及其信号转导蛋白STAT3表达来实现的。

益气养血泻浊法对慢性肾衰竭营养不良大鼠Akt/FoxO1通路的影响

目的:观察益气养血泻浊法中药肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭(CRF)营养不良大鼠蛋白激酶B(Akt)/叉头转化因子1(Fox O1)信号通路的影响。方法:采用5/6肾切除同时予4%酪蛋白饮食制作CRF营养不良大鼠模型。大鼠随机分为正常组、模型组、中药组和西药组。治疗4周后,检测肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、白蛋白(Alb)、血红蛋白(Hb);蛋白质印迹法(Western Blot)检测骨骼肌磷酸化Akt(p-Akt)蛋白水平;逆转录-实时定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测骨骼肌肌肉萎缩基因(MAFbx)和肌环指蛋白-1基因(Mu RF-1)和Fox O1 m RNA水平。结果:与模型组比较,中药组大鼠骨骼肌Fox O1 m RNA、MAFbx m RNA和Mu RF-1 m RNA表达水平均显著下降(P<0.01),而p-Akt蛋白表达水平显著上升(P<0.05),同时,大鼠Scr、Alb、Hb均显著上升(P<0.05,P<0.01)。且与西药组比较,中药组Hb显著升高(P<0.01)。结论:益气养血泻浊法中药肾衰养真胶囊能显著改善CRF营养不良大鼠的营养状况,其机制可能通过下调骨骼肌Fox O1 m RNA、MAFbx m RNA和Mu RF-1m RNA表达,上调p-Akt蛋白表达水平,从而减少蛋白分解,改善CRF营养不良。

肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭营养不良大鼠UPP通路的影响

目的观察肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)营养不良大鼠泛素蛋白酶体通路(ubiquitin proteasome pathway,UPP)的影响。方法采用5/6肾切除同时予4%酪蛋白饮食制备CRF营养不良大鼠模型。40只SD大鼠按体重随机分为假手术组、模型组、肾衰养真胶囊组和开同组,每组10只。术后1周肾衰养真胶囊组给予每天肾衰养真胶囊0.28 g/mL灌胃,开同组给予开同片每天0.21 g/mL灌胃,同时模型组予等体积的生理盐水灌胃,假手术组不施加任何干预,持续干预4周。检测肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白(24 h Upro)、白蛋白(Alb)、血红蛋白(Hb)水平,应用免疫组化检测骨骼肌泛素(Ub)蛋白表达,免疫荧光检测骨骼肌肌肉萎缩蛋白(MAFbx)和肌环指蛋白-1(MuRF-1)蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组SCr、BUN、24 h Upro水平升高,Alb、Hb水平下降,骨骼肌Ub、MAFbx、MuRF-1蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,开同组和肾衰养真胶囊组SCr、BUN水平下降,Alb水平升高,Ub、MAFbx、MuRF-1蛋白表达水平下降(P<0.05,P<0.01);肾衰养真胶囊组24 h Upro水平下降,Hb水平升高(P<0.01)。与开同组比较,肾衰养真胶囊组24 h Upro水平下降,BUN、Hb 7水平升高更明显(P<0.05,P<0.01),开同组MAFbx蛋白表达水平较肾衰养真胶囊组下降更明显(P<0.01)。结论肾衰养真胶囊可能通过减少骨骼肌Ub、MAFbx和MuRF-1蛋白表达,从而抑制UPP信号通路的活性,减少蛋白分解,改善CRF营养不良。