同种异体小肠黏膜下层支架复合骨髓间充质干细胞修复兔耳郭软骨缺损:体内新生软骨的可行性

背景:小肠黏膜下层作为一种组织材料有很好的支撑作用,其降解性、生物相容性良好,但存在降解速度快等弊端。将其与软骨细胞进行复合培养后,由于具有良好的生物相容性和细胞相容性,从而更利于提高再生组织的速度和质量。目的:以转化生长因子β1诱导骨髓间充质干细胞生成的软骨细胞作为种子细胞,小肠黏膜下层作为支架材料,观察细胞-小肠黏膜下层复合物在体内形成新生软骨组织的可能性。设计、时间及地点:完全随机对照动物实验,于2007-07/2008-07在南方医科大学珠江医院儿科中心实验室完成。材料:6只4月龄雄性新西兰大白兔,随机分成软骨细胞/小肠黏膜下层复合物实验组3只,单纯小肠黏膜下层对照组3只。方法:取生长状态良好的第3代的兔骨髓间质干细胞制成细胞悬液,培养基中加入软骨起源诱导因子(转化生长因子β110μg/L、地塞米松10-7mmol/L和维生素C50mg/L)培养3周。将细胞悬液种于小肠黏膜下层支架上形成软骨细胞-小肠黏膜下层复合物。实验组用诱导后的软骨细胞、小肠黏膜下层复合物移植到成年新西兰大白兔的耳郭软骨缺损部位,对照组以单纯小肠黏膜下层植入。主要观察指标:分别于种植后4,10,16周取缺损区行大体观察和组织学检查。结果:诱导软骨细胞-小肠黏膜下层复合物在植入体内16周时材料明显被吸收完全,且有软骨生成,与正常组织未见明显区别,但修复层软骨较薄。经苏木精-伊红染色,Massan染色,甲苯胺蓝染色检查证实为软骨组织。结论:经诱导的软骨细胞-小肠黏膜下层复合物在动物体内能够形成新生软骨组织,比单纯小肠黏膜下层修复效果好。