乙型病毒性肝炎患者检测HBV基因分型、耐药变异的价值和意义

目的通过一体化鉴定探讨乙肝病毒肝炎患者HBV基因分型和耐药变异的临床价值与意义。方法选取本院收治的73例乙肝病毒肝炎患者,以拉米夫定为首选治疗药物,以阿德福韦酯和恩替卡韦为耐药患者替代治疗药物;所有患者均取清晨空腹静脉血,利用MassARRAY Assay和实时定量PCR技术进行基因分型和耐药变异测定,对其用药情况进行为期3年的追踪分析。结果基因分型:本组病例包括B型40例(54.79%)、C型32例(43.84%)、及D型1例(1.37%),未见其他基因分型患者。耐药变异:在为期3年的追踪治疗中,共发生耐药变异33例(45.21%),其中B型变异率27.5%(11/40),C型变异率68.75%(22/32),D型无变异,各基因型之间差异显著(P<0.05);治疗1、2、3年的耐药变异率分别为3例(4.11%)、9例(27.27%)、21例(63.64%),随着治疗时间的延长显著升高(P<0.05);B型基因以YVDD变异为主,占81.82%(9/11),其余2例为YIDD变异(18.18%),C型基因均为YIDD变异,其变异类型差异显著(P<0.05)。结论乙肝病毒肝炎患者HBV基因分型和耐药变异具有一定的相关性,对乙型病毒性肝炎的抗病毒治疗效果有一定影响,利用MassARR.AY Assay高通量技术建立HBV基因分型、耐药变异、前C区/BCP区突变检测技术,可为乙型病毒性肝炎的临床诊治提供指导性策略。

氯化汞对斑马鱼发育的毒性作用及对轴突蛋白2a基因表达的影响

目的观察氯化汞(Hg Cl_2)暴露对斑马鱼胚胎发育时期的毒性作用,以及对神经行为和轴突蛋白(nrxn)2a基因表达的影响。方法将斑马鱼胚胎在受精后6 h内(6 hpf)暴露在Hg Cl_20.2,0.4和0.8μmol·L^(-1)中,在24~120 hpf时观察Hg Cl_2对斑马鱼死亡率、孵化率和畸形率的影响;用电感耦合等离子体质谱测定体内Hg含量;用Video-Track系统记录斑马鱼幼鱼的行为改变;用吖啶橙染色检测细胞凋亡;用原位杂交和实时定量PCR检测其对nrxn2a基因表达的影响。结果与正常对照组相比,Hg Cl_20.8μmol·L^(-1)处理组72 hpf时,斑马鱼的死亡率开始显著升高,在120 hpf时死亡率达到94%(P<0.01);Hg Cl_20.4μmol·L^(-1)处理组48 hpf时,斑马鱼的孵化率显著上升(P<0.01);Hg Cl_20.2,0.4和0.8μmol·L^(-1)组斑马鱼的胚胎发育畸形,主要表现为脊柱弯曲和卵黄囊肿,各个时间点和浓度组的畸形率显著高于正常对照组(P<0.05,P<0.01)。各处理组斑马鱼体内Hg与正常对照组相比蓄积明显(P<0.01),Hg Cl_20.8μmol·L^(-1)处理组达到77μg·g^(-1)。与正常对照组相比,Hg Cl_20.4μmol·L^(-1)暴露组斑马鱼自发活动的速度减缓(P<0.01),活动程度降低(P<0.05);凋亡点的数量也出现显著性增加(P<0.01)。斑马鱼胚胎中nrxn2aa m RNA表达在受精后24 hpf(P<0.01)和72 hpf(P<0.05)两个时间点呈显著性增加,而nrxn2ab m RNA表达在24和48 hpf两个时间点呈显著性下降(P<0.05)。结论 Hg Cl_2对斑马鱼发育有明显影响,主要表现为脊柱弯曲和卵黄囊肿,其行为变化可能与nrxn2a的表达变化有关。