JAK_(2)/STAT_(3)信号通路在局灶节段性肾小球硬化足细胞损伤中的作用及机制

目的建立阿霉素诱导的局灶节段性肾小球硬化(FSGS)小鼠模型,探讨JAK_(2)/STAT_(3)信号通路在FSGS足细胞损伤中的作用及机制。方法选用8周龄雄性C57BL/6小鼠建立阿霉素诱导的FSGS小鼠模型,随机分为FSGS组和对照组,每组各20只。FSGS组予以25 mg/kg单次尾静脉注射阿霉素,对照组予同等剂量的PBS溶液。观察24 h尿蛋白定量、尿素氮、血肌酐等一般指标。HE染色观察肾组织病理;透射电镜观察肾小球基底膜厚度、足细胞形态;双重免疫荧光染色及激光共聚焦观察足细胞nephrin和podocin表达;TUNEL法检测足细胞凋亡。采用实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测2组肾组织Janus激酶2(JAK2)、信号转导和转录活化因子3(STAT3)mRNA水平;Western印迹法检测肾组织JAK_(2)、STAT_(3)蛋白水平;酶联免疫吸附法检测肾组织白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))水平。结果(1)与对照组相比,FSGS组24 h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮均升高,差异均有统计学意义(P均<0.01)。(2)与对照组相比,光镜下,FSGS组小鼠系膜区基质增生,肾小管上皮细胞凋亡、坏死,节段中度加重,毛细血管结构受压狭窄,足细胞增生明显;电镜下FSGS组肾小球基底膜增厚,足细胞融合;激光共聚焦观察显示,FSGS组足细胞nephrin和podocin表达减少;光镜下FSGS组足细胞凋亡增多。(3)与对照组相比,FSGS组肾组织JAK_(2)、STAT_(3) mRNA及蛋白水平增加(P均<0.01),肾组织IL-6、MCP-1、α-SMA、TGF-β_(1)水平升高(P均<0.01),差异有统计学意义。结论阿霉素建立FSGS小鼠模型稳定可靠,JAK_(2)/STAT_(3)信号通路可通过促进下游因子活化、氧化应激、细胞凋亡等途径参与FSGS足细胞损伤的发生发展。