新型磷酸二酯酶4抑制剂氯比普兰改善老年小鼠的认知功能障碍

目的探讨新型磷酸二酯酶4抑制剂氯比普兰(chlorbipram)对老年小鼠学习记忆功能障碍的影响。方法 20月龄和6月龄昆明雄性小鼠,分别随机分为溶剂对照组和氯比普兰给药组(0.5 mg·kg-1),连续给药21 d。旷场实验检测穿越格子数、直立次数和粪便粒数;新物体识别实验(NOR)检测识别指数(RI);水迷宫实验检测逃避潜伏期、穿越平台时间、目标象限停留时间及路程和游泳速度。ELISA法测定海马环磷酸腺苷(c AMP)的含量,Western蛋白印迹法检测磷酸化蛋白激酶A(p-PKA)和磷酸化c AMP反应元件结合蛋白(p-CREB)的水平;逆转录PCR(RT-PCR)检测脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA的表达。结果旷场实验结果显示,20月龄正常组小鼠粪便粒数明显多于6月龄正常组小鼠(P<0.05),给予氯比普兰后粪便粒数明显减少。NOR实验结果表明,20月龄正常组小鼠RI明显低于6月龄正常组小鼠(P<0.01),给予氯比普兰后RI明显升高(P<0.05),达到6月龄正常组小鼠水平。水迷宫实验结果显示,与6月龄正常组小鼠相比,20月龄正常组小鼠穿越平台次数明显减少(P<0.01),第一次到达平台时间明显延长(P<0.05),目标象限的探索时间和路程显著性下降(P<0.01);给予氯比普兰明显增加穿越平台次数(P<0.01),缩短第一次到达平台时间(P<0.05),延长在目标象限探索的时间和路程(P<0.01)。ELISA分析结果显示,20月龄正常组小鼠海马c AMP水平明显低于6月龄正常组小鼠(P<0.01),氯比普兰能显著增加海马c AMP含量(P<0.01)。Western蛋白印迹结果显示,20月龄正常组小鼠海马内p-PKA和p-CREB的蛋白表达明显低于6月龄正常组小鼠(P<0.01),氯比普兰能够增强p-PKA和p-CREB表达(P<0.01)。RTPCR结果表明,20月龄正常组小鼠海马内BDNF mRNA水平明显低于6月龄正常组小鼠(P<0.01),给予氯比普兰能显著提高BDNF mRNA水平(P<0.01)。结论氯比普兰可以通过影响c AMP水平,上调p-PKA和p-CREB蛋白表达,促进BDNF的转录,从而改善老年小鼠的认知功能障碍。