抗CD20单克隆抗体在儿童原发性难治性肾病综合征的应用新进展

原发性难治性肾病综合征(idiopathic refractory nephritic syndrome,IRNS)一直是临床治疗的棘手问题。抗CD20单克隆抗体是一种诱导B细胞溶解和凋亡的新型免疫抑制剂,其出现极大地改善了IRNS患者的预后。近年来,多数病例分析和临床试验对抗CD20单克隆抗体治疗儿童IRNS的有效性进行了报道。本文就抗CD20单克隆抗体的作用机制、在IRNS的临床应用、不良反应及研究中存在的问题进行综述。

利妥昔单抗治疗儿童原发性局灶节段性肾小球硬化症疗效分析

目的利妥昔单抗(RTX)治疗儿童原发性局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)的研究报道罕见。文中旨在分析10例接受单剂量RTX治疗的原发性FSGS患儿的不良作用及安全性,为RTX治疗FSGS提供参考。方法回顾性分析2014年4月至2017年8月南京军区南京总医院儿科住院的10例FSGS患儿临床资料。统计分析患儿给予RTX治疗后的24 h尿蛋白、血清清蛋白、外周血CD20+B细胞水平、RTX不良反应等指标。结果 10例患儿中激素耐药型肾病综合征(SRNS)6例,激素依赖/频复发肾病综合征(FRNS/SDNS)4例。经RTX治疗后10例患儿中5例完全缓解、2例部分缓解、3例未缓解。其中6例SRNS患儿治疗后2例完全缓解、1例部分缓解、3例未缓解;4例FRNS/SDNS患儿治疗后3例完全缓解、1例部分缓解。经RTX治疗后第3个月,10例患儿尿蛋白从治疗前[2.41(0.89~6.82)g/24 h]降低至[0.43(0.05~1.1)g/24 h],血清清蛋白从治疗前[31.60(13.00~38.22)g/L]升高至[38.30(27.18~53.20)g/L]。1例患者出现不良反应,表现为发热、寒战、胸闷,输液速度降低后缓解。随访期间1例在RTX治疗1个月后发生严重肺部感染及蛋白尿,未见其他患儿感染次数增加,无呼吸道、消化道及神经系统的异常表现。结论 RTX治疗原发性FSGS安全性较高,无严重不良反应,是FSGS患儿的有效治疗手段之一。

Alport综合征家系的基因突变及临床表型分析

目的 Alport综合征(Alport syndrome,AS)是常见的遗传性肾小球疾病,且目前认为有3种遗传方式,文中分析AS家系的基因突变特征,总结临床表型特点。方法应用二代测序外显子序列捕获技术对30例确诊或疑似AS患儿的COL4A3、COL4A4、COL4A5基因进行测序,对其家系成员针对突变位点进行Sanger测序验证;并经Provean对基因突变进行蛋白功能预测。收集临床资料,并结合基因突变结果进行分析。结果 30例患儿经基因测序后均可明确诊断为AS。其中常染色体隐性遗传4例,均为男性患儿;X连锁显性遗传26例,男性患儿16例,女性患儿10例。二代测序结果共检测出不同的COL4A3、COL4A4、COL4A5基因突变35个,其中包括错义突变19个、同义突变2个、剪切位点突变4个、无义突变3个、插入突变2个、缺失突变4个、复杂突变1个。通过Sanger测序对家系成员进行验证,结果发现20个突变来源于母亲、8个突变来源于父亲、8个为新生突变、1个先证者纯合基因突变分别来自父母双方、1个突变来源不详。30例患儿均以血尿和(或)蛋白尿起病,17例患儿合并阳性家族史,1例合并高频神经性耳聋,无患儿出现眼部病变及肾功能不全。23例患儿行肾穿刺活检,光镜可见肾小球微小病变为13例,系膜增生性病变10例。电镜下,仅9例表现为肾小球基膜致密层分层撕裂等AS典型改变。结论 AS以X连锁显性遗传多见,致病性突变以错义突变为主。AS患儿病理多表现为肾小球轻微病变,电镜表现常不典型,肾外表现少见。

激素敏感型及依赖型肾病综合征患儿基因甲基化研究及其生物信息学分析

目的目前关于激素敏感型肾病综合征(SSNS)及激素依赖型肾病综合征(SDNS)患儿的基因甲基化研究较少,文中旨在筛选SSNS和SDNS甲基化差异表达的基因,并进行生物信息学分析,探讨可能的发病机制及寻找潜在的治疗靶标。方法选择2015年1月至12月在南京军区南京总医院儿科住院患者7例,SSNS者(n=3):泼尼松足量[2 mg/(kg·d)或60mg/(m2·d)]治疗,4周内尿蛋白转阴者;SDNS者(n=4):对激素治疗敏感,但是连续2次减药或停药2周内复发者。分别提取2组患儿的外周血DNA,利用基因甲基化芯片技术筛选差异表达的甲基化基因,并对其进行生物信息学对检测结果进行分析。结果甲基化芯片结果发现,与SSNS组比较,SDNS组存在318个差异甲基化基因,其中有193个基因表达为高甲基化,125个为低甲基化;这些异常基因主要位于DNA的开放阅读框和Cp G岛区域。甲基化差异基因主要涉及Rho鸟嘌呤核苷酸交换因子活性、核苷三磷酸酶调节活性、GTP酶调节活性等分子功能。生物学过程方面主要涉及调节前体代谢产物和能量、抗原加工提呈、Rho及Ras蛋白信号传导通路、伪足集合、再生等生物过程。在细胞组成方面,主要涉及MHC蛋白复合物、染色质周纤维及MHC 1类分子的蛋白复合物。通过KEGG信号通路分析发现,差异基因主要参与9个信号通路,其中主要涉及I型糖尿病、淀粉与蔗糖的代谢、同种异体移植物的排斥和自身免疫性甲状腺病等信号通路。结论广泛存在的SDNS患儿基因异常甲基化现象,为激素依赖的原因之一,这为寻找潜在的治疗靶标提供了依据。

阿司匹林诱生型脂氧素对急性肾损伤小鼠肾脏保护功能的研究

目的探讨阿司匹林诱生型脂氧素（ATL）对急性肾损伤（AKI）小鼠的肾脏保护作用。方法将88只无特定病原体（SPF）级C57BL/6J雄性小鼠按随机数字表法随机分为脂多糖（LPS）组（再分为2 h组、4 h组、8 h组、12 h组、24 h组5个亚组）、ATL＋LPS组（再分为2 h组、4 h组、8 h组、12 h组、24 h组5个亚组）和正常对照组，每组8只。LPS组小鼠给予LPS腹腔注射进行AKI造模，ATL＋LPS组在造模前30 min先给予ATL腹腔注射干预治疗，然后再给予LPS腹腔注射进行AKI造模。各组小鼠在造模后第2、4、8、12、24小时分别收集血清和尿液标本。酶联免疫吸附试验检测各组小鼠血清肌酐、尿素氮、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和尿液中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白（NGAL）、肾损伤因子1（KIM-1）、富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）和神经生长因子（netrin-1）指标。结果ATL＋LPS组4 h、8 h、12 h、24 h小鼠肾组织病理评分[（22.32±1.04）分、（31.11±1.86）分、（18.22±0.92）分、（20.87±3.18）分]均显著低于LPS组[（35.47±2.27）分、（52.28±2.82）分、（54.99±4.56）分、（53.41±4.76）分]，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。ATL＋LPS组血肌酐[8 h：（143.07±5.02） μmol/L]、血尿素氮[12 h：（33.07±3.52） mmol/L]、血TNF-α[4 h：（196.33±14.18） ng/L、8 h：（221.77±10.11） ng/L]和血IL-1β[4 h：（50.25±2.67） ng/L]水平均低于LPS组对应时间点水平[血肌酐8 h：（227.43±11.17） μmol/L；血尿素氮12 h：（59.68±3.84） mmol/L；血TNF-α 4 h：（267.87±26.48） ng/L、8 h：（334.78±21.08） ng/L；血IL-1β 4 h：（89.45±5.87） ng/L]，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。ATL＋LPS组尿液NGAL[4 h：（56.76±4.01） μg/L，8 h：（65.44±7.81） μg/L]、KIM-1[8 h：（78.19±9.48） μg/L]和netrin-1[8 h：（40.12±2.01） ng/L、12 h：（36.87±2.87） ng/L]水平均低于LPS组对应时间点各指标水平[NGAL 4 h：（168.77±10.77） μg/L、8 h：（155.33±8.26） μg/L；KIM-1 8 h：（124.73±13.47） μg/L；netrin-1 8 h：（89.17±2.74） ng/L、12 h：（81.11±3.88） ng/L]，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。 结论ATL可缓解LPS诱导的小鼠急性肾损伤，发挥其肾脏保护作用。

脂氧素在炎症信号通路中的作用研究进展

脂氧素是一种花生四烯酸的代谢产物，能广泛调节多种炎性细胞的功能和炎症相关基因的表达，称为炎性反应的“停止信号（stop signals）”或“刹车信号（braking signals）”，脂氧素通过调控多种炎症信号通路促进炎症的消退。现对脂氧素调控多种炎症信号通路及其抗炎作用机制的研究进展进行综述。

脂氧素与肾脏病研究进展

脂氧素能广泛调节多种炎症细胞的功能和炎症相关基因的表达，并作用于多种细胞促进炎症的消退。脂氧素在肾脏病的发病机制、临床治疗中起重要作用。