基于Framingham评分的银屑病患者心血管风险评估

目的银屑病患者发生心血管病的危险因素较普通人群更加常见。文中通过对寻常型银屑病患者和正常体检人群进行Framingham心血管风险评估,旨在讨论银屑病患者心血管病发生风险的特征及防治。方法选取2015年10月至2016年10月期间南京军区南京总医院门诊90例寻常型银屑病患者,其中轻度48名(53.33%)、重度42名(46.67%);并纳入137名正常体检者作为对照。所有寻常型银屑病患者均进行临床和组织病理学诊断,使用银屑病面积和严重程度指数(PASI)评分评估其严重性。检测血脂、血压和空腹血糖等指标,计算未来10年发生心血管病的Framingham风险评分(FRS)。结果寻常型银屑病患者的10年FRS[1(0.5,6.0)]显著高于对照者[0.5(0.5,2.0)],差异有统计学意义(P<0.05);10年FRS与性别(r=0.358)、年龄(r=0.678)和病程(r=0.257)呈正相关(P<0.05),与病情严重程度无相关性(r=0.184,P>0.05)。轻度与重度银屑病患者10年FRS差异无统计学意义(P>0.05)。男性患者和50岁以上的老年患者FRS显著增高(P<0.05)。结论寻常型银屑病患者尤其是老年男性患者,与正常体检人群相比具有较高的心血管病发生风险。故应对银屑病患者的心血管疾病进行风险评估,并对其并发症进行积极防治。

血清IgE增高的青年缺血性卒中患者颞动脉组织病理学研究

目的临床上部分青年缺血性卒中患者血清免疫球蛋白E(immunoglobulin E,Ig E)增高,推测为脑血管炎,但缺乏病理学依据。文中旨在通过颞动脉活检组织病理学研究探讨该类患者血管病变的特点。方法对2013年1月至2015年8月间在南京军区南京总医院神经内科住院的32例病因不明的青年缺血性卒中患者颞动脉标本进行组织病理学检查,其中血清Ig E正常者(正常组)与增高者(增高组)各16例。通过HE染色观察炎症细胞浸润灶,甲苯胺蓝染色检测肥大细胞,免疫组化检测基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemotaxis protein-1,MCP-1)和Ig E等表达。结果与血清Ig E正常组相比,增高组患者颞动脉血管壁炎症细胞浸润呈现出更高的发生率(62.5%vs12.5%,P<0.01),1例伴外膜纤维素性渗出及小灶坏死的标本也见于Ig E增高组。Ig E增高组颞动脉MCP-1的平均光密度值[(9.25±5.79)×10^(-5)]高于正常组[(4.41±2.87)×10-5],差异有统计学意义(P<0.01)。MMP-9的平均光密度值和内中膜厚度在血清Ig E增高组中均呈增加的倾向,但组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组间肥大细胞计数差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清Ig E增高组患者颞动脉血管壁炎症细胞浸润、坏死反应和纤维素性渗出可能是血管炎的一种表现,推测MCP-1在病变过程中可能起到一定的作用。

红色毛癣菌感染BalB/C小鼠肉芽肿模型的构建

目的红色毛癣菌不仅引起皮肤浅部感染还可引起深部感染,但相关动物模型研究报道较少。文中拟构建红色毛癣菌感染的癣菌性肉芽肿模型。方法选取临床培养分离出的3株红色毛癣菌肉芽肿菌株、2株体癣株和标准菌株ATCCMYA4438,经糖皮质激素预处理Balb/c鼠,接种红色毛癣菌与黏液素混悬液后追加应用糖皮质激素,构建小鼠红色毛癣菌肉芽肿模型;采用直接镜检、真菌培养和组织病理方法验证感染结果。结果在应用适当剂量糖皮质激素干预下,3株红色毛癣菌肉芽肿株黏液素混悬液动物接种后21 d,直接镜检可见细长条菌丝,真菌培养可见菌落生长,组织病理结果显示小鼠足廓组织表皮角化过度,真皮内肉芽肿形成,内含中性粒细胞、淋巴细胞等大量炎细胞浸润。而体癣株和标准菌株黏液素混悬液动物接种后,未形成肉芽肿模型,直接镜检、真菌培养和组织病理显示感染未成功。结论利用临床分离的红色毛癣菌肉芽肿菌株,经黏液素和糖皮质激素干预后可以构建小鼠红色毛癣菌肉芽肿模型。

新生隐球菌漆酶的原核表达

目的构建含His-tag的新生隐球菌漆酶的原核表达载体并表达鉴定。方法利用PCR技术扩增LAC1基因的编码序列,将其正确插入pET-28a(+)载体中得到重组质粒,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞后进行PCR鉴定及基因测序。将正确重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,通过不同条件进行诱导表达,用SDS-PAGE电泳及MALDITOF质谱检测并鉴定目的蛋白质。通过尿素对包涵体蛋白进行变性,并对变性后的蛋白进行SDS-PAGE电泳及MALDITOF质谱检测。结果成功构建含His-tag的新生隐球菌漆酶的原核表达载体,PCR鉴定呈阳性且基因测序结果与目的序列一致,SDS-PAGE显示在大肠杆菌BL21中成功诱导表达出相对分子质量(Mr)约为68 000的目的蛋白,经MALDITOF质谱鉴定目的蛋白在此表达系统中不可溶,可能以包涵体形式存在。结论成功构建含His-tag的新生隐球菌漆酶的原核表达载体,为进一步纯化并解析新生隐球菌漆酶的晶体结构奠定了基础。