梧州地区中老年肿瘤患者医院感染革兰阳性球菌分布及耐药性分析

目的掌握梧州地区中老年肿瘤患者医院感染革兰阳性球菌分布及耐药性。方法对2010年4月至2015年5月136例梧州地区三级医院中老年肿瘤患者医院感染革兰阳性球菌的临床资料进行分析,了解病原菌分布和耐药情况。结果革兰阳性球菌中葡萄球菌属64株(47.06%)、链球菌属45株(33.09%)、肠球菌属27株(19.85%);样本类型主要为咽拭子、痰、引流液和血液标本,共占83.83%;科室来源以ICU、介入科、肿瘤内科最常见,共占71.32%,和同组其他项目比较,差异具有统计学意义(P<0.05);耐药性方面,葡萄球菌属对呋喃妥因、替加环素、万古霉素敏感率均为100.00%,对其他抗菌药物的耐药率均在55.00%以上;链球菌属对替考拉宁、万古霉素的敏感性均为100.00%,对其他抗菌药物的耐药率均在57.89%以上;肠球菌属对利奈唑胺的敏感率为100.00%,其中粪肠球菌出现1例(7.69%)对万古霉素耐药,对其他抗菌药物耐药率均在54.55%以上。结论中老年肿瘤患者革兰阳性球菌主要来源于呼吸道,ICU、介入科是感染重灾区,耐药情况严重,存在耐万古霉素粪肠球菌,在临床上要加强抗菌药物管理。

不同年龄段皮罗序列征患儿动脉血气分析的特点、机械通气及住院时间比较

目的探讨不同年龄段皮罗序列征患儿血气分析的特点、手术后机械通气时间和住院时间。方法收集新生儿及非新生儿Ⅲ度皮罗序列征(PRS)患儿各30例,PRS患儿入院后通过桡动脉进行采集血标本进行血气分析,比较2组血标本的pH值、PCO_(2)、PO_(2)、HCO^(-)_(3)、BE、乳酸、AG、A-aDO_(2)的特点、手术后机械通气时间及住院时间。结果新生儿组PCO_(2)、HCO_(3)^(-)、BE、乳酸及A-aDO_(2)高于非新生儿组,非新生儿组PO_(2)及AG高于新生儿组。2组pH值、PO_(2)、AG均在正常范围,机械通气及住院时间与乳酸呈正相关,与年龄呈负相关。结论不同的年龄阶段,PRS患儿的动脉血气分析的结果不同,高乳酸与低年龄PRS患儿手术后机械通气时间及住院时间长。

3-O-C_(12)-HSL通过抑制lncRNA CD48-AS和CD48的表达而阻碍Mo-DCs成熟

目的筛选并阐明长链非编码RNA(lncRNA)CD48-AS与其反义互补分子CD48 m RNA在N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)阻碍人单核细胞诱导的树突状细胞(Mo-DCs)成熟过程中发挥作用的机制。方法从健康人外周血中分离Mo-DCs,将未成熟的Mo-DCs细胞分为阴性对照组(0.1%DMSO)、脂多糖(LPS)阳性对照组(100μg/L的LPS)和实验组(100μg/L LPS+40μmol/L 3-O-C_(12)-HSL)进行lncRNA芯片检测。筛选lncRNA表达谱中差异表达5倍以上的自然反义lncRNA进行聚类分析,从中筛选差异具有统计学意义的自然反义lncRNA CD48-AS。未成熟的Mo-DCs分为阴性对照组、LPS阳性对照组以及LPS+C5、C10、C25实验组(分别加入5、10、25μmol/L的3-O-C_(12)-HSL)。利用荧光定量PCR检测lncRNA CD48-AS和反义分子CD48 mRNA在实验体系中的表达水平;通过生物信息学分析lncRNA CD48-AS与CD48反义互补区及其蛋白编码功能;通过核糖核酸酶保护实验(RPA)验证lncRNA CD48-AS是否与CD48形成二聚体,从而通过影响靶CD48的表达来发挥调控作用。最后检测lncRNA CD48-AS在细胞内的定位。结果 3-O-C_(12)-HSL处理Mo-DCs后lncRNA表达谱出现了特异性改变。3-O-C_(12)-HSL可下调由LPS诱导的Mo-DCs中lncRNA CD48-AS及其反义靶分子CD48的表达。生物信息学分析lncRNA CD48-AS不具备蛋白编码功能,为非编码RNA;lncRNA CD48-AS与CD48形成RNA二聚体从而减少RNA酶对CD48 mRNA的降解,使得CD48 mRNA表达增加;lncRNA CD48-AS在Mo-DCs中主要定位在细胞核中,细胞质中表达量较少。结论 3-O-C_(12)-HSL可通过下调lncRNA CD48-AS,进而影响CD48的表达来阻碍Mo-DCs的成熟。

超敏C反应蛋白检测在儿童细菌和支原体感染中的应用研究

目的探讨超敏C反应蛋白(hsCRP)在儿童细菌性感染和支原体感染中的检测水平,以提高hsCRP检测的应用价值。方法选取2010年3月至2015年3月的101例感染患儿作为研究对象,根据血液学和细菌培养情况分成细菌感染组和支原体感染组,分别为67、34例。另外,选取同期健康的儿童体检者50例作为对照组。对上述幼儿抽取静脉血,分别检测hsCRP、白细胞(WBC)、中性粒细胞百分比(NEUT%)水平。结果细菌感染组hsCRP、WBC水平及异常率均高于支原体感染组和对照组(P<0.05);支原体感染组NEUT%及其异常率高于其他两组(P<0.05)。治疗后细菌感染组hsCRP、WBC水平和异常率均低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05);hsCRP对细菌感染诊断的最大受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积为0.68,灵敏度、特异度分别为89.9%、88.3%。结论 hsCRP水平检测对儿童细菌感染有早期诊断价值,其检测可以动态地反映治疗效果。

广州市番禺区城镇人群α和β地中海贫血的基因型分析

目的:分析本地区人群地中海贫血的分子遗传学特征,为有效诊断和预防中重型患者提供客观依据。方法:对2009年1月1日～2011年12月31日来本院门诊和住院部的就诊者进行地中海贫血(地贫)筛查,以血常规MCV(平均红细胞体积)和/或血红蛋白电泳进行初筛,阳性者进行基因分析。α基因检测缺失型和非缺失型的缺陷、β基因检测17种点突变。结果:α地贫基因型以--SEA/αα为主;α地贫2在轻型携带者(α地贫1+α地贫2)中占26.9%;非缺失型的基因缺陷占α地贫2的26.8%。β地贫中β41-42/β的比例最高,其次为β654/β、β-28/β和β17/β。281名β地贫携带者中有40人检出复合α基因的突变。结论:α地贫2和非缺失型α地贫在本地区的比例较高,应注意HbH的诊断和咨询。初筛为β地贫者应进行α基因检测。

不同免疫比浊系统检测血清淀粉样蛋白A的性能验证分析

目的评价奥普、锦瑞、希莱恒和赛斯鹏芯检测系统的血清淀粉样蛋白A(SSA)分析性能,为临床应用提供依据。方法依据美国临床和实验室标准协会(CLSI)的EP-15A2文件,对上述4种系统进行精密度验证。每天分析1个批次,每批2个浓度水平,分别测定3次,连续测定5 d。依据CLSI的EP-9A2文件进行正确度验证,参比系统为西门子BNPRO配套检测系统。每批不少于8个样本,重复测定2次,连续测定5 d。依据CLSI的EP-6A文件进行分析线性范围验证和临床可报告范围验证,配制5个不同梯度临床样本分别测定。依据CLSI的C28-A2文件进行参考范围验证,收集20个健康体检者检测结果进行统计分析。结果奥普、锦瑞、希莱恒和赛斯鹏芯检测系统在高、低2个水平的不精密度分别为2.39%、3.25%,5.30%、4.97%,5.81%、4.18%和1.94%、0.59%。奥普、锦瑞、希莱恒和赛斯鹏芯检测系统与参比系统相比,奥普检测系统在10 mg/L时相对偏差为22.51%,其他检测系统在医学决定水平处的相对偏差均少于15%。奥普、锦瑞、希莱恒和赛斯鹏芯检测系统SAA验证的线性范围分别为4.58~186.35 mg/L、8.25~298.58 mg/L、6.10~279.10 mg/L和9.8~278.1 mg/L,临床可报告范围分别为2043.0 mg/L、2400.0 mg/L、1127.9 mg/L和1200.0 mg/L。奥普,锦瑞,希莱恒和赛斯鹏芯检测系统SAA参考范围均与厂家声称相符。结论奥普、锦瑞、希莱恒和赛斯鹏芯检测系统的SAA检测性能均满足行业标准要求。

铜绿假单胞菌信号分子3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD的结合特性研究

目的制备纯化的人过氧化物酶体增殖物激活受体-配体结合域(PPARγ-LBD)肽段并观察铜绿假单胞菌信号分子N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)与PPARγ-LBD的结合强度。方法采用分子对接的方式预测3-O-C_(12)-HSL与PPARγ的结合位点。合成PPARγ-LBD基因序列并插入pET28b质粒,鉴定后通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组肽段,进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot分析。表面等离子体共振技术检测3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD的结合动力学参数。结果分子对接结果显示3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD区的Tyr473和Tyr327形成氢键,3-O-C_(12)-HSL末端柔性碳链与PPARγ-LBD区的Met329、Leu330等残基形成疏水结合。制备获得人PPARγ-LBD肽段,经SDS-PAGE及Western blot检测在25~35 ku有一条蛋白的印迹,与PPARγ-LBD分子质量一致。3-O-C_(12)-HSL与PPARγ结合的亲和力常数为1.65×10^(-4) mol/L,结合速率常数为1.06×10^(2)/ms,解离速率常数为1.75×10^(-2)/s。结论3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD功能区结合能力强于PPARγ特异性拮抗剂GW9662,为制备针对3-O-C_(12)-HSL的特异性靶向药物提供了实验依据。

血清LncRNA-ENST00000420480在铜绿假单胞菌感染中诊断价值

目的探讨长链非编码RNAENST00000420480作为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)感染诊断标志物的临床价值。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,免疫磁珠分选人CD14+单核细胞、hIL?4和hGM?CSF诱导分化为单核细胞衍生树突细胞(monocytes derived dendritic cells,Mo?DCs),分PBS组、LPS组和LPS+3?O?C12?HSL组。实时荧光定量PCR检测lncRNA?ENST00000420480表达量。收集临床PA感染患者血清21例,体检表观健康人血清32例,提取血清RNA,逆转录获得cDNA,荧光定量PCR检测lncRNA?ENST00000420480表达量,受试者工作特征曲线评价血清中lncRNA?ENST00000420480对PA感染的诊断效能,计算约登指数(YI)明确PA感染诊断截点(cut?off)。结果与PBS组相比,LPS下调Mo?DCs中lncRNA?ENST00000420480表达水平。与LPS组相比,3?O?C12?HSL上调Mo?DCs中lncRNA?ENST00000420480表达水平。PA感染组血清中lncRNA?ENST00000420480相对表达量为(3.85±4.18),正常人组血清中lncRNA?ENST00000420480相对表达量为(1.30±1.06),差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线中AUC为0.708(P=0.01),YI为0.429,诊断截点值为4.13。结论lncRNA?ENST00000420480可作为PA感染的血清学标志物。