急性呼吸窘迫综合征死亡危险指标临界点的初步研究

目的探讨影响急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者预后的因素,并初步建立临床评估方法。方法选择1999年6月—2008年10月154例于南方医科大学附属南方医院、南方医科大学附属顺德区第一人民医院等6所医院明确诊断为ARDS患者的临床资料,选取确诊ARDS24h内的年龄、性别及血气分析等指标,根据其预后是否院内死亡对各项指标进行单因素检验及Logistic回归分析,筛选与ARDS死亡关系密切的因素,然后用受试者工作曲线确定其最佳临界点。结果单因素分析中,死亡组(102例)患者年龄、氧合指数、肺野数目、pH值、舒张压、血糖水平、二氧化碳分压、肺泡-动脉氧分压差与生存组(52例)比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示年龄、pH值、氧合指数、肺野数目等4个变量与ARDS患者预后有关(P<0.05)。以年龄、pH值、氧合指数、肺野数目推测ARDS死亡的受试者工作曲线下面积分别为0.808、0.736、0.850、0.811(P<0.05)。年龄的最佳临界点为43.5岁,诊断ARDS死亡的敏感度为74.5%,特异度为76.9%;pH值最佳临界点为7.37,敏感度为65.4%,特异度为67.6%;氧合指数的最佳临界点为102mmHg,诊断ARDS死亡的敏感度为63.7%,特异度为92.3%;肺野数目的最佳临界点为3个,诊断ARDS死亡的敏感度为57.8%,特异度为92.3%。结论 ARDS患者年龄>43.5岁、肺野数目>3个、氧合指数<102mmHg及pH值<7.37时提示预后不良。

大环内酯类抗生素在呼吸道疾病中的免疫调节机制

大环内酯类抗生素广泛应用于细菌和非典型病原体等感染的治疗,近年来其免疫调节作用亦备受关注。本文就大环内酯类药物对肺部炎症免疫调节机制及其他促炎因素的影响作一综述。

支气管哮喘患者外周血、痰液中IL-33的含量及其相关性分析

目的检测支气管哮喘患者外周血和痰液中IL-33的含量,探讨其含量与患者症状、肺功能、血液和痰液中嗜酸性粒细胞数的关系。方法 ELISA法检测80例支气管哮喘患者及20例正常对照者外周血中IL-33的含量,对哮喘患者行24 h症状评分和肺功能测试,依据FEV1将支气管哮喘患者分为3组:FEV1≥80%为轻度哮喘组,60%≤FEV1<80%为中度哮喘组,FEV1<60%为重度哮喘组,并记录哮喘患者外周血中嗜酸性粒细胞数。ELISA法检测18例哮喘患者和8例正常对照者痰液中IL-33的含量,显微镜下计数其痰液中的嗜酸性粒细胞数。结果外周血IL-33水平在正常对照组和轻度哮喘组之间无明显差异[(26.62±3.04)pg/ml vs(30.26±5.23)pg/ml,P>0.05],但中、重度哮喘组的IL-33的水平要明显高正常对照组[(41.36±11.82)pg/ml vs(26.62±3.04)pg/ml,(84.10±20.17)pg/ml vs(26.62±3.04)pg/ml,P<0.05],且与患者夜间症状评分呈正相关(r=0.317,P<0.05),而与白天症状评分和外周血嗜酸性粒细胞数无明显相关(r=0.173,P>0.05,r=0.082,P>0.05),与患者FEV1和PEF均呈明显的负相关(r=-0.638,P<0.05;r=-0.552,P<0.05)。支气管哮喘患者诱导痰中IL-33的含量与痰液中嗜酸性粒细胞数目呈正相关(r=0.693,P<0.05)。结论血液中的IL-33可作为一种评价哮喘患者肺功能下降程度的指标,是哮喘患者病情恶化的促进因子。IL-33水平增高可能是诱导哮喘患者气道嗜酸性粒细胞浸润的原因之一。

老年慢性阻塞性肺疾病患者血清基质金属蛋白酶-9与骨转换生化指标及骨密度的关系

目的观察老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清基质金属蛋白酶(MMP)-9及其抑制剂(TIMP)-1与骨转换生化指标、骨密度的关系。方法收集稳定期老年COPD男性患者90例,根据骨密度分为正常骨量组、低骨量组、骨质疏松组各30例。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清MMP-9、TIMP-1和血清骨碱性磷酸酶(sBAP)、血清骨钙素(sOC)、血清I型胶原交联C端肽(sCTX)水平。结果老年COPD稳定期血清MMP-9、MMP-9/TIMP-1比值随骨密度降低呈升高趋势,以骨质疏松组最高(均P<0.01);血清TIMP-1水平在骨质疏松组升高,但3组间差别无统计学意义(P>0.05)。MMP-9/TIMP-1比值与骨形成指标sBAP、sOC呈显著负相关(均P<0.01),与骨吸收指标sCTX呈显著正相关(P<0.01)。结论老年男性稳定期COPD患者升高的MMP-9/TIMP-1与骨转换生化指标有一定相关性,可能与COPD伴骨质疏松患者骨代谢转换增快有关。

哮喘小鼠肺组织中转录因子RORγt的表达与气道炎症的关系

目的:探讨Th17细胞转录因子RORγt在支气管哮喘小鼠肺组织中的表达及其与哮喘气道炎症的关系。方法:采用卵清蛋白(OVA)致敏方法建立支气管哮喘小鼠模型;BALB/c小鼠30只随机分为对照组、哮喘组、地塞米松治疗组各10只。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)、血清中白细胞介素17(IL-17)水平;HE染色评价各组小鼠气道炎症情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织IL-17、RORγt mRNA表达水平;免疫印记(Western blot)方法检测肺组织RORγt蛋白表达水平。结果:哮喘组小鼠肺组织RORγt mRNA、蛋白水平及IL-17水平均明显高于对照组和地塞米松治疗组(P<0.05),RORγt蛋白表达量与嗜酸性粒细胞数、淋巴细胞数、中性粒细胞数、BALF、外周血中IL-17含量、肺组织IL-17 mRNA表达量均呈正相关关系(r=0.789、0.795、0.902、0.669、0.806、0.883,P值均<0.01)。结论:RORγt在支气管哮喘小鼠肺组织呈高表达,其表达水平与气道炎症密切相关,参与了哮喘气道炎症的发生过程。

LPS直接及间接作用致小鼠急性肺损伤模型的建立

目的呼吸系统的急性炎症所致的急性肺损伤(ALI)是临床常见的急症、重症,也是目前实验研究的热点。在对其发病机制和治疗手段的探讨过程中,动物模型的有效建立极其重要。方法本实验比较了气道内直接滴入和腹腔注射给入两种LPS给入方式,通过组织学病理评价、炎症细胞的细胞学反应,炎症反应细胞分泌物蛋白水平的变化等炎症反应指标,评价了LPS两种不同的给入方式对小鼠急性肺损伤(ALI)模型建立的有效性。结果组织学水平显示,气道内直接滴入LPS肺组织炎性细胞浸润的病理改变较腹腔注射LPS组更明显,肺损伤的组织学病理改变也更明显;细胞学水平,气道内直接给入LPS组肺泡灌洗液可见较多中性粒细胞渗出,而腹腔注射LPS组肺泡灌洗液中性粒细胞渗出少,与腹腔注射生理盐水组无差别;细胞因子水平,气道内直接滴入LPS肺组织组肺泡灌洗液蛋白水平明显升高,高于生理盐水对照组和腹腔注射LPS组。结论气道内直接滴入LPS是一种有效的小鼠急性肺损伤模型制备方法,可通过LPS的直接气道内分散和刺激至直接肺损伤。

IL-22在支气管哮喘患者血清中的表达及其受体IL-22R1在人气道细胞中的表达

目的检测IL-22在支气管哮喘患者血清中的表达,检测IL-22R1在人气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、肺成纤维细胞中的表达,寻找IL-22作用的靶细胞。方法应用ELISA法检测36例支气管哮喘患者及20例正常对照者血清IL-22及IL-17的表达,同时检测36例患者肺通气功能,根据1秒率(FEV1/FVC)及FEV1占预计值的百分比将支气管哮喘患者分为支气管激发试验阳性组(17例)和支气管舒张试验阳性组(19例)。应用实时定量PCR检测人气道平滑肌细胞、人肺成纤维细胞、人气道上皮细胞IL-22R1 mRNA的表达,用免疫荧光以及蛋白质印迹法检测IL-22R1蛋白在上述3种细胞中的表达。结果支气管哮喘患者血清IL-22及IL-17水平与正常对照组相比差异无统计学意义,但支气管舒张试验阳性组患者血清IL-22和IL-17水平高于支气管激发试验阳性组(P<0.05)。IL-22R1mRNA及蛋白在上述3种细胞均有表达。结论 IL-22可能涉及支气管哮喘的发生发展过程,气道平滑肌细胞、肺成纤维细胞、人气道上皮细胞可能均是IL-22发挥作用的靶细胞。

IL-22对人气道细胞的作用

目的探讨IL-22对人气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、气道成纤维细胞的生理学作用。方法用实时定量PCR检测气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、气道成纤维细胞哮喘血清刺激前后IL-22R1 mRNA表达的变化。不同浓度的IL-22(10 ng/ml,100 ng/ml,1 000 ng/ml)刺激气道上皮细胞、气道平滑肌细胞和气道成纤维细胞后,用MTT法检测细胞的增殖,用流式细胞技术(FACS)检测细胞的凋亡和坏死。结果哮喘血清刺激后气道上皮细胞IL-22R1 mRNA表达降至正常对照组的9%,气道平滑肌细胞IL-22R1 mRNA表达升高至正常对照组的345倍,而气道成纤维细胞IL-22R1 mRNA表达无明显变化。高剂量(1 000 ng/ml)的IL-22刺激气道上皮细胞和气道成纤维细胞12、24 h可显著降低细胞增殖(P<0.05,P<0.01)。三种不同浓度的IL-22刺激气道上皮细胞24 h后均导致细胞凋亡显著下降(P<0.05),低浓度的IL-22(10 ng/ml)导致细胞坏死增加(P<0.01)。不同浓度的IL-22刺激气道平滑肌细胞后,细胞凋亡和坏死无显著性变化。中、高浓度IL-22(100 ng/ml,1 000 ng/ml)刺激气道成纤维细胞后,细胞坏死率显著下降(P<0.05)。结论 IL-22在支气管哮喘中对气道上皮的作用具有双重性,并与支气管哮喘的病程相关;而对气道平滑肌细胞的作用则可能与浓度及病程相关。支气管哮喘后续阶段,IL-22对气道成纤维细胞作用轻微。

CHIA和CHI3L1基因变异与汉族儿童哮喘发病的关系

目的:探讨CHIA和CHI3L1基因的变异与中山市汉族儿童哮喘发病的相关性。方法:采用病例对照研究,利用MassARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台(MALDI-TOF-MS)对CHIA基因的rs10494132和CHI3L1的rs946263位点进行基因分型。结果:在中山市汉族儿童中rs10494132检出CC、CT和TT基因型,rs946263检出AA、AG和GG三种基因型。与正常对照相比,哮喘组rs10494132的基因型分布(χ2=8.767,P=0.012)和等位基因分布(χ2=9.749,P=0.002)均具有明显差异,而rs946263基因型分布(χ2=0.472,P=0.790)和等位基因分布(χ2=0.013,P=0.910)均无显著性差异。与CC+CT基因型相比,rs10494132的TT基因型能显著增加哮喘发生的危险性,OR值(95%可信区间)分别为2.093(1.252～3.498)。在哮喘组中,与CC+CT基因型亚组相比,rs10494132的TT基因型亚组IgE浓度(Z=-2.013,P=0.044)明显增高,而嗜酸性粒细胞计数(Z=-0.704,P=0.482)和CRP(Z=-0.488,P=0.626)无明显变化。rs10494132位点的基因型分布在哮喘初次确诊规则治疗前不同病情严重程度分级之间未见明显差异(χ2=0.719,P=0.397)。结论:CHIA基因的rs10494132可能与中山市汉族儿童哮喘的发病有关,TT基因型可能增加血清IgE浓度。

PBL教学法在我国基础医学教育中的应用及存在问题

目的探讨PBL教学法在我国的基础医学教育过程中的应用效果。方法收集在实际的实施基础医学教育过程中使用PBL教学法的相关效果,分析在实际的基础医学教育的过程中使用PBL教学法的相关教育教学效果。结果在实际的进行基础医学教育的过程中,通过对于学生使用PBL教学法的教育形式能够显著的提升对于学生的教学效果。结论在实际的对于学生实施医学教育的过程中,通过对于学生使用PBL教学法的形式能够较好的对于学生进行基础医学的教育,并能够显著的提升教学效果,在实际的对于学生实施基础医学教育的过程中值得推广应用。

pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体的构建及细胞定位

目的:构建pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体并观察其在786-O、293T和Chang liver细胞株中的定位情况。方法:采用RT-PCR法从HBE135-E6E7细胞株中克隆得到XAPC7cDNA全长序列,将之与pMD18T载体连接、测序后将该片段亚克隆到真核表达载体pDsRed1-C3中。构建好的pD-sRed1-C3/XAPC7真核表达质粒经酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染786-O、293T和Chang liver细胞株中,观察其在真核细胞中的表达。结果:pDsRed1-C3/XAPC7重组子经酶切鉴定及DNA测序证实,目的基因XAPC7的序列完全正确,真核表达载体构建成功,转染该重组子的细胞株均可见红色荧光蛋白的表达,呈颗粒状分布。XAPC7主要定位于786-O细胞的胞质,胞核罕见,在293T细胞中,胞质和胞核均有分布,且两者间无明显差别,在Changliver细胞中,胞质和胞核亦均有分布,但以胞质为主。结论:成功构建pDsRed1-C3/XAPC7融合基因并进行真核表达,发现XAPC7在不同细胞中的细胞定位具有差异,为下一步研究XAPC7的肿瘤相关功能奠定基础。

临床药师参与脓胸药物治疗病例分析

2011年国家卫生部和中医药管理局联合颁布的《医疗机构药事管理规定》指出，医疗机构应当建立由临床医师、临床药师和护士组成的治疗团队，开展临床合理用药工作。作者作为一名呼吸内科临床药师，结合具体病例来探讨临床药师如何参与药物治疗方案的制定，开展药学服务工作。

ARDS病例中氧合指数与SPO_2/FiO_2的比较观察

目的:探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者的氧合指数与SPO2/FiO2之间的关系。方法:回顾性采集模型组140例患者及验证组92例患者,对应地采集SPO2/FiO2(≤97%,PEEP≤5cmH2O)及PaO2/FiO2。两组患者分别采用相关检验中的spearman检验来了解SPO2/FiO2与PaO2/FiO2的相关性,采用linearregression求出其两者的线性方程,然后用受试者工作特征曲线(ROC)检验SPO2/FiO2对ARDS的诊断效能。结果:在模型组140例病例156对数据中,氧合指数与SPO2/FiO2的关系方程为SPO2/FiO2=73+0.946×OI[P<0.000;r=0.878]。当SPO2/FiO2=262mmHg相当于氧合指数=200mmHg,验证组92例病例118对数据中氧合指数与SPO2/FiO2亦存在相类似的线性关系,以SPO2/FiO2=262mmHg为判定阈值时,敏感性为90.12%,特异性为86.49%。使用ROC曲线对SPO2/FiO2对ARDS的诊断能力进行检验,模型组曲线下面积为0.876,验证组曲线下面积为0.941。结论:在ARDS患者病情监测中,SPO2/FiO2在一定程度可替代氧合指数。

教师胜任力理论在高校教师继续教育中的应用

目的探讨教师胜任力理论的方法在对于高校教师继续教育过程中的应用效果。方法收集高校教师在实际的进行继续教育过程中的各种状况,同时分析在实际的对于高校教师实施继续教育过程中教师胜任力理论的相关作用。结果通过对高校教师在实际的继续教育的过程中使用教师胜任力理论的相关方法能够提升高校教师在实际的继续教育过程中的相关教学效果。结论在高校教师进行继续教育的过程中,通过使用教师胜任力理论的方法能够提升高校教师在实际的进行继续教育的过程中,通过使用教师胜任力理论的方法能够较好的提升高校教师在进行继续教育过程中的教学效果。

哮喘中干细胞因子与嗜酸粒细胞相关研究进展

干细胞因子（SCF）是一种新型多功能细胞因子，以可溶型和膜结合型两种形式存在，通过与其酪氨酸激酶受体c-kit结合发挥其生物学作用。SCF及其受体c-kit在肺组织细胞中表达广泛。不仅是肥大细胞重要的活化与趋化因子，而且对嗜酸粒细胞的分化、增殖、活化、趋化过程起重要作用，参与支气管哮喘的气道慢性炎症和气道高反应性过程。深入研究SCF对嗜酸粒细胞的调控作用及机制对哮喘的防治有重要意义。

人参皂甙Rb1通过促肺泡细胞线粒体自噬以抑制凋亡在大鼠肺气肿模型治疗的机制

目的观察人参皂甙Rb1(GS-Rb1)对大鼠肺气肿的治疗作用是否与自噬的的促进及对凋亡的抑制相关。方法选取40只体重150~200克的SD雄性大鼠随机分为4组,每组10只,以气管内注射猪胰蛋白酶(PPE)建立肺气肿型,腹腔注射给予GS-Rb1及自噬抑制剂氯喹(CLQ)。具体分组为:①阴性对照(Control)组、②治疗(PPE+GS-Rb1)组、③阻断(PPE+GS-Rb1+CLQ)组、④肺气肿组(PPE)组。留取支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluids,BALF)测定其中白细胞数量,采用酶联免疫荧光(ELFA)检测神经元氧化应激因子NAPDH氧化酶活性的变化,同时取肺泡组织,HE染色观察病理学变化、蛋白免疫印记法(WB)测定自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、P62,线粒体功能蛋白PGC-1a、mtTFA及凋亡相关蛋白Cyto C、Bax、Bcl-2的变化。结果实验结果显示,治疗组较肺气肿组的肺泡组织病理学损伤程度明显好转,NAPDH氧化酶活性及BALF中白细胞总数、中性粒细胞百分比明显下降(P<0.05),同时治疗组相对于肺气肿组的自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例升高、P62表达下降,线粒体功能蛋白PGC-1a、mtTFA上调,凋亡促进因子Cyto C及Bax表达明显降低,而凋亡抑制因子Bcl-2表达则明显升高(P<0.05)。采用自噬抑制剂CLQ可明显抑制上述GS-Rb1通过自噬抑制凋亡从而缓解慢阻肺的病理改变、下调BALF中细胞数、中性粒细胞百分比及NAPDH氧化酶活性的功效,(P<0.05)。结论GS-Rb1可能通过促进肺泡细胞线粒体自噬而抑制凋亡途径进而抑制损伤性因子的产生,以达到对肺气肿的治疗作用。

速尿与咪达唑仑注射液存在配伍禁忌

笔者在临床中发现药物不合理配伍现象时有发生．2011年6月，我科在用药过程中观察到，速尿与咪达唑仑注射液（商品名：力月西）发生配伍反应，因及时发现，未对患者造成伤害及损失．现报道如下：

N-乙酰半胱氨酸对肝星状细胞核因子κB的影响

目的 阐明N乙酰半胱氨酸(NAC)对肝星状细胞(HSC)核因子κB(NF-κB)结合活性和环氧合酶 2(COX-2)表达的影响机制。方法 体外培养大鼠 HSC-T6 细胞株,MTT法检测 NAC对HSC增殖的抑制作用。分别予NAC(1 mmol/L)处理 1 h;NAC和肿瘤坏死因子(TNF)α联合干预(先予 NAC处理1 h,再予TNFα干预1 h);TNFα100 ng/ml处理1 h。凝胶电泳移动抑制实验检测NF κB的结合活性。免疫蛋白质印迹检测相应的胞质内NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达。免疫组化观察 HSC-T6NF-κB表达的核转移。激光共聚焦检测NAC对 HSC-T6 中 COX-2 表达的影响。结果 NAC对 HSC具有明显的抑制作用。TNFα可诱导 NF-κB结合活性,而 NAC可显著抑制 TNFα诱导的 NF-κB结合活性。TNFα处理后 IκBα表达减弱,NAC处理后 IκBα表达增强。TNFα刺激 1 h后,NF κB表达从细胞质转移至细胞核内。NAC预处理后再予TNFα刺激,NF κB表达主要位于细胞质,很少发生核转移。HSC T6经TNFα处理后细胞内COX 2表达明显高于NAC和TNFα联合处理组以及正常对照组(P<0.05);NAC和TNFα联合处理组与正常对照组差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 NAC可抑制HSC增殖,抑制HSC-NF κB结合活性和COX-2表达。

多重聚合酶链反应技术快速鉴定鲍曼不动杆菌

目的建立快速鉴定鲍曼不动杆菌菌株的方法。方法本研究建立多重PCR实验技术快速鉴定170株醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体以及对照组的其他菌属14株。结果138株菌的PCR产物扩增出2条条带,为鲍曼不动杆菌,另外32株只扩增出1条条带,为醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体的其他基因型,对照组的菌株没有扩增出条带。结论多重PCR技术的建立为快速鉴定鲍曼不动杆菌提供了一个快速而简便的方式。

不同潮气量联合呼气末正压通气对急性肺损伤犬小肠的影响

目的比较大、小潮气量（VT）机械通气（MV）对急性肺损伤（ALI）犬小肠组织的影响。方法用静脉注射油酸法制备犬ALI模型，制模成功后随机分为两组，分别接受不同VT的MV，通气时间均为6h。小VTMV组（LV组，n=6）：VT 6ml／kg，呼气末正压（PEEP）10cm H2O（1cmH2O=0．098kPa）；大VTMV组（HV组，n=6）：VT20ml／kg，PEEP10cmH2O。通气6h后放血处死动物，开腹取小肠组织，用苏木素-伊红（HE）染色，观察组织病理学改变；用原位末端缺刻标记法（TUNEL）观察小肠组织细胞凋亡情况。结果机械通气6h后HV组ALI犬小肠胀气明显；而LV组无此表现；LV组小肠损伤评分低于HV组[（3．17±0．75）分比（2．00±0．89）分]，差异有统计学意义（P〈0．01）；但各组犬小肠组织细胞凋亡均罕见。结论大VT通气可诱导小肠功能不全；小VT通气在一定程度上可避免出现小肠功能障碍。