肺内型与肺外型急性呼吸窘迫综合征患者血管内皮细胞损伤的比较研究

目的:比较肺内型与肺外型急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血管内皮细胞损伤的差异性。方法:检测11例肺内型ARDS患者(ARDSp组)及8例肺外型ARDS患者(ARDSexp组)治疗前、治疗3d及7d的中心静脉血中循环内皮细胞数(CEC)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,同时进行APACHEⅡ评分,比较两组患者CEC及TNF-α浓度差异,对APACHEⅡ评分、TNF-α及CEC进行相关性分析。结果:两组患者APACHEⅡ、TNF-α及CEC在治疗前较对照组显著增高,且ARDSexp组治疗前均较ARDSp组高。治疗后ARDSp组APACHEⅡ降至治疗前水平,而ARDSexp组则显著增高;ARDSp组TNF-α变化不大,而ARDSexp组则逐渐升高,组间差异有显著性(P<0.05);各组在治疗后CEC均略增高,但ARDSexp组均较ARDSp组显著增高。APACHEⅡ与TNF-α呈正相关,而APACHEⅡ与CEC、TNF-α与CEC相关性更高。结论:不同原因导致的ARDS,由于所致炎症反应、病情严重程度不同其血管内皮细胞损伤程度也存在差异。

BIPAP呼吸机辅助呼衰机械通气撤机的研究

目的探讨BiPAP呼吸机辅助慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并衰竭机械通气患者撤机的价值。方法把85例有创机械通气的COPD合并呼吸呼吸衰竭患者中,首次撤机失败的28例患者随机分为两组:BiPAP呼吸机治疗组(A组)和对照组(B组),比较两者机械通气时间、住ICU时间、医疗费用及病死率等。结果机械通气时间:A组(7±3)天,B组(14±3)天;住ICU时间:A组(9±3),B组(27±6天。医疗费:A组(13980±2000)元,B组(25000±3213)元;病死率:A组14.3%,B组64.3%.两者有显著差异(P<0.01)。结论对于符合撤除有创机械通气的COPD合并呼吸衰竭而不能成功撤机的患者,应用BiPAP呼吸机,可以避免再插管,减少医疗费用,提高抢救成功率。

巨噬细胞移动抑制因子促进肺成纤维细胞增殖和胶原合成

目的:观察重组巨噬细胞移动抑制因子(rMIF)对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的作用,探讨哮喘气道重塑的发生机制。方法:不同浓度的rMIF(25-100μg/L)分别作用于MRC-5细胞12 h、24 h或48 h,用CCK-8法测细胞增殖率,羟脯氨酸法检测细胞上清胶原水平,RT-PCR法检测Ⅰ型胶原mRNA表达,Western blot-ting检测成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原。结果:与对照组比,50μg/L和100μg/L的rMIF刺激24 h和48 h,显著促进MRC-5增殖(P<0.05或P<0.01)。刺激48 h后,细胞培养上清中,对照组及实验组均可检测到羟脯氨酸,100μg/L rMIF显著促进羟脯氨酸分泌(P<0.01);rMIF能够剂量依赖地刺激Ⅰ型胶原mRNA和蛋白合成(P<0.05或P<0.01)。结论:rMIF通过刺激成纤维细胞增殖及胶原合成,可能在哮喘气道重塑的发病机制中发挥关键作用。

伏立康唑治疗变态反应性支气管肺曲菌病效果分析

变态反应性支气管肺曲菌病（ABPA）是人体对曲霉菌发生的超敏反应。人体吸入环境中的曲菌孢子后，孢子在支气管树的黏液中长出菌丝，刺激CD4^＋T细胞向辅助T细胞（Th）2分化及免疫球蛋白（Ig）E、IgG抗体生成，从而引起一系列的病理生理改变。既往主要以口服糖皮质激素治疗为主。本研究旨在观察伏立康唑治疗ABPA的临床疗效。

无创双水平气道正压通气治疗重症支气管哮喘的研究

目的探讨无创双水平正压通气(NIPPV)对重症支气管哮喘患者的治疗价值。方法将40例重症支气管哮喘患者按随机数字表法分成2组。对照组(n=20)予以氧疗、常规药物治疗;试验组(n=20)在氧疗、常规药物治疗的基础上予以NIPPV支持,应用美国STAR330型无创呼吸机,经面罩或鼻罩无创通气,采用S/T(自主呼吸/时间切换),压力支持(PSV)+呼吸末正压(PEEP)。比较2组治疗前和治疗后1、3h,第4天的血气分析指标(pH、PaCO2、PaO2、SaO2)的变化,治疗前后的最高峰流速(PEF)的改变及2组住院时间。结果治疗后,试验组血气分析指标以及PEF值的改善均较对照组明显(P<0.05);试验组住院时间较对照组明显缩短(P<0.05)。结论对重症支气管哮喘患者早期应用NIPPV是有效的,但还需要大样本及更多的观察指标来监测患者的病情变化;对无创通气1～3h后病情无好转并呈进行性加重的患者应尽早改用有创机械通气,以免耽误治疗时机。

Anti-miR-145促进人气道平滑肌细胞增殖及骨桥蛋白合成

目的：观察miR-145抑制剂（Anti-miR-145）对人支气管平滑肌细胞（HASMCs）的影响，探讨其在哮喘气道重塑中的作用。方法分为对照组和实验组，实验组加入不同浓度的Anti-miR-145（10-100 nmol/L）。CCK-8法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blotting检测骨桥蛋白合成。结果与对照组比较，10 nmol/L和50 nmol/L Anti-miR-145显著促进HASMCs增殖及骨桥蛋白合成（P〈0.05或P〈0.01），50 nmol/L Anti-miR-145显著抑制HASMCs凋亡（P〈0.01）。结论 Anti-miR-145通过刺激HASMCs增殖和骨桥蛋白合成，抑制其凋亡，可能在哮喘气道重塑中发挥重要作用。

改良Epworfh嗜睡量表的可行性分析

目的研究Epworth嗜睡量表(Epworth sleepiness score,ESS)评分及改良ESS评分对于重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)患者评估的意义及区别,探讨改良ESS评分的可行性。方法对232例初诊OSAHS患者同时进行多道睡眠图(polysomnography,PSG)监测、ESS评分及改良ESS评分,将其分值分别与PSG监测各项参数之间进行统计学分析。结果ESS评分和改良ESS评分均可以初步反映患者的嗜睡和缺氧程度。改良ESS评分的有效性更好,使用后正常组的嗜睡评分分值下降,重度OSAHS组与正常组的评分差距进一步加大,可以更好的对重度OSAHS患者进行初筛。结论改良ESS评分充分考虑了国人的生活习惯,可部分反映患者病情严重程度,可作为重度OSAHS患者病情筛查的临床线索之一。

临床药师培训药历书写模式的探讨

目的:探讨用于临床药师培训的药历书写模式。方法:介绍临床药师培训药历的基本模式和内容并进行实例解析。结果和结论:书写培训药历对于培养临床药师的临床思维,提高药物治疗水平具有重要作用。

巨噬细胞移动抑制因子经Rho激酶途径促进人胚肺成纤维细胞表型转化

目的:观察重组巨噬细胞移动抑制因子(rMIF)对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)表型转换的作用,探讨哮喘气道重塑的发生机制。方法:不同浓度的rMIF(25～100μg/L)分别作用于MRC-5细胞24 h或48 h,RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达,Western blotting检测α-SMA蛋白合成;100μg/LrMIF刺激MRC-5细胞48 h,刺激前0.5 h加入Rho拮抗剂Y27632,RT-PCR法检测α-SMA mRNA表达,West-ern blotting法检测α-SMA表达;100μg/L rMIF分别刺激MRC-5 6 h、12 h、24 h或48 h,Western blotting检测磷酸化肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1(p-MYP1)蛋白合成。结果:刺激MRC-5 24 h,不同浓度的rMIF对α-SMAmRNA转录未见显著影响(P>0.05)。刺激MRC-5细胞48 h,rMIF可呈剂量依赖地促进α-SMA mRNA(r=0.697,P<0.01)和蛋白(r=0.957,P<0.01)表达。Y27632预刺激后,显著抑制rMIF100μg/L促进α-SMA mR-NA和蛋白表达的作用(均P<0.01)。rMIF刺激6 h后,p-MYPT1表达显著增加(P<0.01),12 h达到高峰(P<0.01),24 h开始下降,但24 h和48 h其水平仍高于对照组(均P<0.01)。结论:rMIF通过Rho信号通路刺激成纤维细胞表型转化,可能在哮喘气道重塑的发病机制中发挥关键作用。

巨噬细胞移动抑制因子经Rho途径促进人肺成纤维细胞Ⅲ型胶原合成

目的:观察重组巨噬细胞移动抑制因子(rMIF)对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的作用,探讨哮喘气道重塑的发生机制。方法:不同浓度的rMIF(25-100μg/L)分别作用于MRC-5细胞48 h,RT-PCR法检测III型胶原mRNA表达,Western blotting检测III型胶原蛋白合成;100μg/L rMIF刺激MRC-5细胞48 h,刺激前0.5 h加入Rho激酶特异性抑制剂Y27632,RT-PCR法检测III型胶原mRNA表达,Western blotting法检测III型胶原蛋白表达。结果:刺激MRC-5细胞48 h,rMIF可呈剂量依赖地诱导III型胶原mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.01)表达。Y27632预刺激后,显著抑制rMIF100μg/L诱导的III型胶原mRNA和蛋白表达(均P<0.01)。结论:MIF可能通过Rho途径刺激人肺成纤维细胞III型胶原合成,从而在哮喘气道重塑的发病机制中发挥重要作用。

阿托伐他汀对哮喘大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ的作用及气道重塑的影响

目的观察羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂阿托伐他汀对大鼠哮喘模型气道重建的影响。方法将80只SD雄性大鼠随机分为4组:空白对照组、哮喘组、地塞米松组、阿托伐他汀组。以10g/L卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏并长期吸入,激发制备慢性哮喘模型。用免疫组织化学方法检测各组大鼠肺组织中过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)、NF-κβ、Ⅲ型胶原的表达,同时图像分析方法测量气道壁内周长、平滑肌面积。结果 1.阿托伐他汀组的大鼠肺内嗜酸性粒细胞、淋巴细胞降低,肺组织中PPAR-γ表达增加,NF-κβ阳性细胞数降低与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),与地塞米松组相比差异无统计学意义(P>0.05);PPAR-γ在肺内表达量与NF-κβ的活化细胞数呈负相关(rs=-0.530,P<0.05)。2.阿托伐他汀组支气管管壁面积(WAm)/Pi、平滑肌面积/Pi、N/Pi、Ⅲ型胶原的表达降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);与地塞米松组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论阿托伐他汀具有促进哮喘大鼠PPAR-γ的产生,抑制NF-κβ的活化,可延缓哮喘气道重建的进程,其抑制增生的作用与地塞米松类似。

巨噬细胞移动抑制因子经Rho途径促进人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原合成

目的:观察重组巨噬细胞移动抑制因子(rMIF)对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的作用,探讨哮喘气道重塑的发生机制。方法:100μg/L的rMIF刺激MRC-5细胞6h、12h、24h、48h后,ELISA法测定细胞培养上清中TGF-β1蛋白含量;100μg/L的rMIF作用于MRC-5细胞48h,RT-PCR法检测Ⅰ型胶原mRNA表达,Western blotting检测Ⅰ型胶原蛋白合成;100μg/L的rMIF刺激MRC-5细胞48h,刺激前0.5h加入Rho激酶特异性抑制剂Y27632,RT-PCR法检测Ⅰ型胶原mRNA表达,western blotting法检测Ⅰ型胶原蛋白表达。结果:与对照组比较,100μg/L的rMIF对细胞培养上清TGF-β1蛋白含量无显著影响(P>0.05);100μg/L的rMIF可显著促进Ⅰ型胶原mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.01)合成。Y27632预刺激后,100μg/L的rMIF促进Ⅰ型胶原mRNA和蛋白合成能力显著减弱(P均<0.01)。结论:MIF可能通过Rho途径刺激人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原合成从而在哮喘气道重塑的发病机制中发挥重要作用。

留学生诊断学教学的体会与思考

医学诊断学是临床医学专业的一门重要的基本课程，为了提高留学生诊断学课程的教学质量，更好地达到培养目标的要求，根据以往的教学经验，就留学生诊断学教学中教师思想认识的提高、语言交流能力的培养、教材的选择、教学计划的制定、多种教学方式的灵活运用等方面进行了总结和分析，为今后进一步提高留学生诊断学教学质量打下基础。

营养支持治疗对慢性危重病患者预后的影响

目的:探讨慢性危重病患者的营养状况和营养支持治疗情况。方法:回顾性分析83例慢性危重病患者的营养支持治疗情况及其与疾病预后的关系。结果:存活组病人的体质量指数高于死亡组(P<0.05);入住ICU时存活组病人血红蛋白和白蛋白高于死亡组(P<0.05);在入住ICU第7d存活组病人胃肠外非氮热卡供给量和非氮热/氮均小于死亡组(P<0.05),而血清白蛋白则高于死亡组(P<0.01)。结论:合理的营养支持治疗是慢性危重病患者抢救成功的关键。

沉默Toll样受体4基因表达的RNAi慢病毒载体的构建

背景:Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)是介导内毒素/脂多糖应答的主要受体,在由内毒素诱导的炎性反应的信号通路中发挥着重要作用。目的:构建人TLR4基因的RNA干扰慢病毒载体,并观察其对人脐静脉内皮细胞TLR4在蛋白水平的沉默效应。方法:利用Invitrogen在线软件设计人TLR4基因shRNA序列,合成、退火形成双链寡核苷酸后克隆到线性载体pENTRTM/H1/TO的黏性末端,并进行DNA测序。得到的阳性重组子再与慢病毒载体进行重组反应,从而获得干扰TLR4基因真核表达的慢病毒载体。在脂质体的介导下将慢病毒包装辅助复合体和TLR4基因的真核表达慢病毒载体导入293FT细胞包装病毒,测定病毒滴度,感染人脐静脉内皮细胞,检验其干扰TLR4基因表达的有效性。结果与结论:实验成功构建TLR4基因真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒滴度为8.7×106U/mL。免疫印迹杂交结果表明,所获得的慢病毒感染人脐静脉内皮细胞TLR4基因在蛋白水平的表达显著降低。实验成功构建了人TLR4基因慢病毒RNA干扰表达载体,并验证了其在人脐静脉内皮细胞上的有效性。

纳洛酮对慢性阻塞性肺疾病并发肺性脑病的疗效研究

目的:评价纳洛酮对慢性阻塞性肺疾病(COPD)并发肺性脑病的疗效。方法:将60例COPD并发肺性脑病患者分为常规组及治疗组,两组均给予常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用纳洛酮0.4～0.8mg静脉注射,2～3次/d,观察其疗效并做血气分析。结果:治疗组总有效率为85.7%,对照组总有效率为59.4%,两组疗效比较差异有显著性(P<0.05),治疗组治疗前后对照,PaCO2明显下降、PaO2明显上升(P<0.01),两组治疗后比较,治疗组pH值、PaCO2、PaO2、SaO2均优于对照组,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:纳洛酮对COPD并发肺性脑病的疗效显著。

呼吸机相关肺炎危险因素临床研究

目的探讨影响呼吸机相关肺炎（VAP）的危险因素。方法对2004年5月至2009年11月入住重症监护病房采用机械通气治疗的160例患者进行回顾性队列研究，将患者按相关危险因素自然分组，比较VAP发病率，并进行多因素非条件Logistic回归分析。结果160例行机械通气治疗的患者中有77例发生VAP，发病率为48．1％。机械通气≥5d、仰卧位、应用抑制胃酸分泌药、进行侵入性操作、应用糖皮质激素、白蛋白〈30g／L、多器官功能障碍综合征（MODS）与各自对照组比较，其机会比（OR）及OR值95％可信区间比较差异有统计学意义，是影响VAP发生的危险因素。结论机械通气较长时间、仰卧位、应用抑制胃酸分泌药（制酸剂）、侵入性操作、应用糖皮质激素、白蛋白〈30s／L、发生MODS是影响VAP发生的主要危险因素。

双水平无创正压通气联合支气管肺泡灌洗治疗COPD呼吸衰竭合并意识障碍应用研究

目的探讨双水平无创正压通气（BiPAP）联合支气管肺泡灌洗术治疗COPD呼吸衰竭合并轻中度意识障碍患者的治疗价值。方法选择COPD急性加重期（AECOPD）呼吸衰竭合并轻中度意识障碍的患者45例，给予BiPAP通气治疗，联合床旁气管镜下支气管肺泡灌洗术。结果经联合治疗后，42例血气指标明显改善，3例需有创通气治疗，总有效率95．6％。无严重并发症发生。结论Bi—PAP通气联合支气管肺泡灌洗术治疗AECOPD呼吸衰竭合并轻中度意识障碍患者，疗效确切，安全性高。

腺相关病毒载体介导乳腺癌BA46基因转移的实验研究

目的 评价腺相关病毒 (AAV)为载体介导乳腺癌BA4 6基因转导树突状细胞 (DC)的可行性。方法 构建重组质粒d16 95 /BA4 6 p5/NeoSV40 (简称rAAV/BA4 6 /Neo) ,并制备该病毒。分离外周血单核细胞 (DC前体细胞 ) ,采用GM CSF、IL 4、TNF α诱导 ,以rAAV/BA4 6 /Neo病毒感染DC前体细胞 ,感染后 72h ,流式细胞仪检测rAAV/BA4 6 /Neo病毒感染效率及BA4 6表达情况 ,6d后 ,RT PCR分析BA4 6mRNA转录情况 ,PCR/Southernblot分析BA4 6基因染色体整合情况。结果 AAV成功介导BA4 6基因转导DC ,BA4 6在DC内良好表达 ,病毒基因整合入DC基因组内。结论 AAV载体成功介导BA4 6基因转导DC ,为以DC为基础的乳腺癌的基因治疗打下基础。

ADAM33基因Met764Thr位点多态性与支气管哮喘发病及患者肺功能的相关性

目的探讨中国华南地区汉族人群 ADAM33基因 Met764Thr 位点多态性与支气管哮喘(简称哮喘)及其患者肺功能的相关性。方法对164例中国华南汉族哮喘患者(哮喘组)及112名汉族健康者(健康对照组),应用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)、DNA 测序及肺功能测定的方法。结果 (1)不同种族人群 ADAM33基因 Met764Thr 位点等位基因频率的比较差异无统计学意义(X^2=6.77,P>0.05);(2)ADAM33基因 Met764Thr 位点3种基因型(Met764/Met764、Met764/Thr764、Thr764/Thr764)在哮喘组分布频率分别为78.7%(129/164)、18.3%(30/164)、3.0%(5/164);健康对照组分布频率分别为91.1%(102/112)、6.3%(7/112)、2.7%(3/112);各基因型分布频率哮喘组与健康对照组比较差异有统计学意义(X^2=8.46,P<0.05)。ADAM33基因 Met764Thr 位点 Thr764等位基因在哮喘组与健康对照组分布频率分别为0.122、0.058,哮喘组与健康对照组 Met764及 Thr764等位基因频率比较差异有统计学意义(X^2=6.27,P<0.05);(3)单变量Logistic 回归分析 Met764Thr 位点基因多态性与哮喘的关系表明,相对 Met764/Met764基因型而言,Met764/Thr764杂合型与 Met764/Tbr764+Thr764/Thr764基因型均能显著增加哮喘发生的危险性[OR 值及95%可信区间(CI)分别为3.389(1.430～8.030)、2.767(1.308～5.854),P 均<0.05];(4)在哮喘组中3种基因型的用力肺活量(FVC)实测值/预测值%、第一秒用力呼气容积(FEV_1)实测值/预测值%水平比较差异有统计学意义(F 值分别为0.49、5.17,P 均<0.05)。结论 ADAM33基因 Met764Thr 位点基因多态性与中国华南汉族人群哮喘发病及患者的肺功能相关。