小鼠滑膜成纤维细胞的原代培养

目的利用C57BL／6小鼠探索出一种改良的小鼠滑膜成纤维细胞（SF）的原代培养方法，以方便类风湿关节炎（RA）关于滑膜炎的研究。方法收集小鼠髋关节周围滑膜，去除内含的“蛋黄样”物，将滑膜移入含0．5%Ⅳ型胶原酶的EP管中，剪碎；置入37℃摇箱中振荡消化60min，然后在涡轮振荡仪上振荡1．5min，常规培养。结果细胞培养1周左右。进行第一次传代；大约在培养10d后滑膜巨噬细胞的数量达到最高峰，然后逐渐减少；在第3次传代（15～20d）后，滑膜巨噬细胞基本消失。用Vimentin标记的细胞免疫荧光化学染色显示SF细胞纯度超过95％；用Vimentin和CD90．2标记的流式细胞术显示其纯度达到95％，用CD54标记其纯度大约为80％。结论利用C57BL／6小鼠探索出一种改良的小鼠SF的原代培养方法是一种简便易行的小鼠SF的原代培幕方法。