血清神经元特异性烯醇化酶缺血修饰蛋白与新生儿缺氧缺血性脑病严重程度的相关性分析

目的探讨血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、缺血修饰蛋白(IMA)与新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)病情严重程度的关系。方法选择2016年3月至2017年2月潮州市中心医院新生儿科收治的81例HIE患儿作为HIE组,根据病情轻重,将HIE组分为轻度HIE组32例、中度HIE组24例及重度HIE组25例;选择同期30例正常足月新生儿作为对照组。分别检测对照组生后1~2 d及3组患者HIE急性期与恢复期血清NSE、IMA水平,分析两者与HIE病情严重程度的关系。采用Pearson相关分析,分析三组HIE急性期及恢复期NSE、IMA的相关性。结果 3组HIE急性期及恢复期NSE、IMA均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。其中重度HIE组急性期NSE、IMA[(61.14±30.8)μg/L,(97.26±2.46)U/mL]高于中度HIE组[(40.30±10.81)μg/L,(93.08±1.90)U/mL]及轻度HIE组[(18.75±1.40)μg/L,(83.75±0.78)U/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。恢复期重度HIE组NSE,IMA[(20.81±9.57)μg/L,(83.34±2.01)U/mL]及中度HIE组[(21.14±7.04)μg/L,(82.28±2.17)U/mL]均高于轻度HIE组[(10.89±5.14)μg/L,(73.17±1.91)U/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性显示,三组患者HIE急性期,恢复期NSE与IMA均呈正相关(P<0.05)。结论血清NSE与IMA水平的变化与HIE病情严重程度正相关。

人microRNA-21真核过表达载体的构建及其在HepG2.2.15细胞中上调c-myc基因的表达

目的构建人微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)真核过表达载体pmR-21,探讨其在HepG2.2.15细胞中对c-myc基因表达的调控作用。方法 PCR扩增miRNA-21的前体基因片段(pre-miRNA-21),双酶切后连接到pmR-mCherry载体上,通过双酶切和测序验证重组载体的准确性;将重组载体转染到HepG2.2.15细胞中为实验组,另设空载体组(转染pmRmCherry空质粒组),空白组(未转染组),阳性对照组(HepG2细胞),24h后观察载体荧光蛋白表达情况,流式细胞术检测转染效率,实时荧光定量PCR评估miRNA-21的表达情况;转染72h后,RT-PCR和Western blot检测c-myc mRNA及蛋白表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖情况。结果经双酶切和测序验证,目的基因片段插入载体中;实验组及空载体组转染24h后细胞内可见强荧光,转染效率大于50%;实验组细胞miRNA-21表达较空载体组、空白组水平升高;转染72h后实验组细胞c-myc mRNA表达较空载体组、空白组升高;实验组细胞增殖快于空载体组及空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建miRNA-21真核过表达载体pmR-21,该重组载体可稳定表达miRNA-21;miRNA-21可上调c-myc基因的表达,c-myc基因是miRNA-21发挥促癌作用的靶点之一。