潮州市哨点医院2009年～2014年流感监测分析

目的监测潮州市2009年~2014年间流感流行情况,掌握季节性流感病毒优势毒株的变化及流行特征,为流感防控提供科学依据。方法对潮州市2009年~2014年流感样病例（influenzalike illness,ILI）报告数据,病原学监测数据及流感/ILI暴发疫情报告情况进行分析。结果在受理的3619份流感样病例标本中,流感病毒核酸阳性标本约占19.45%。流感病毒的优势毒株每年都发生型别变化,优势型别交替出现。病毒感染率以5岁~14岁组和15岁~24岁组较高,与其它组比较存在统计学差异（P〈0.05）。结论 2009年后潮州市虽然没有发生流感大流行,但流感监测工作仍不能放松,特别是需要警惕新型流感毒株的出现,同时加强学校等聚集性场所疫情监测。

2013年广东省潮州市流行性感冒流行特征分析

目的：了解广东省潮州市2013年度流行性感冒流行特征及病毒流行株构成。方法采集监测哨点医院疑似流感样患者咽拭子标本，采用实时荧光 PCR（real-time RT-PCR）检测病毒核酸。结果全市流感检测哨点医院共采集标本830份，流感病毒核酸阳性为53份，阳性率为6.39％；其中新甲型 H1N1流感占49.06％（26／53）、乙型流感病毒占28.30％（15／53）、季节性流感病毒 H3亚型占22.64％（12／53），未分离到季节性流感病毒H1。4月和12月为年度病毒检测高峰。病毒感染率以5-14岁组（14.12％）最高，与其它组比较存在统计学差异（P 〈0.05）。结论2013年度潮州市流感病毒优势株为新型甲型H1N1，全年有2个流行高峰，在4月和12月，主要发病人群为学龄前儿童和小学生。

潮州地区糖尿病与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的相关性研究

目的研究潮州地区糖尿病与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的相关性。方法在全自动生化分析仪上应用速率法定量检测潮州地区1166例糖尿病患者的G6PD活性,应用膜反向斑点杂交法检测常见的6个G6PD基因突变位点,应用DNA测序技术分析未知突变样本。另取潮州地区4221例健康体检者作为研究对象,记录G6PD缺乏症发生情况。结果在1166例糖尿病患者中检出G6PD缺乏症41例,男15例,女26例。G6PD缺乏症在潮州地区糖尿病人群的发生率为3.52%,其中男性发生率为2.53%,女性发生率为4.53%。在41例G6PD缺乏症患者中检出9种基因突变的类型,分别是c.1376G>T、c.1388G>A、c.1024C>T、c.392G>T、c.95A>G、c.871G>A、c.517T>C、c.1376G>T/ⅣSX1193T>C/c.1311C>T和c.1311C>T/ⅣSX1193T>C。潮州地区健康体检人群G6PD缺乏症的发生率(3.36%)与糖尿病人群(3.52%)比较,差异无统计学意义(P>0.05),而且女性的发生率都高于男性。结论潮州地区糖尿病患者G6PD缺乏症的发生率与本地区健康体检人群G6PD缺乏症的发生率很接近,显示两者之间无明显的相关性。

红细胞参数区分小红细胞人群中珠蛋白生成障碍性贫血基因携带者与铁缺乏症的诊断价值

目的评价在MCV〈82fl的小红细胞人群中，红细胞（RBC）数和其它五种参数或公式区分珠蛋白生成障碍性贫血（珠蛋白生成障碍性贫血）基因携带者和铁缺乏症患者（ID）的诊断价值。方法1673名“健康”人参加了该次研究。笔者检测了所有参加体检者的七项红细胞参数、血清铁，并对血样进行了血红蛋白电泳。以血清铁作为铁缺乏症（SI）的诊断指标（男性：SI〈10μmol／L，女性：SI〈9．0μmol／L），同时对所有的MCV〈82fl的参检者全部检测了6种α珠蛋白生成障碍性贫血和17种8珠蛋白生成障碍性贫血基因。绘制RBC数和其它参数或数学公式用于诊断珠蛋白生成障碍性贫血的受试者工作特征曲线（ROC曲线）。通过ROC曲线确定它们的诊断临界值（Cut—off值），并比较它们的敏感度、特异度和Youden指数。结果1673自然人群中共检出小红细胞164例，47．6％为α珠蛋白生成障碍性贫血、15．2％为α珠蛋白生成障碍性贫血、35．4％为铁缺乏症。基于ROC曲线，推算出RBC数目对于珠蛋白生成障碍性贫血的诊断能力优于其它参数或公式。在男性群体中RBC的最佳诊断界值为5．41×10^12／L，敏感度为82．5％，特异度为92．3％，Youden指数为74．8；在女性群体中RBC的最佳诊断界值为4．93×10^12／L，敏感度为81．8％，特异度为94．4％，Youden指数为76．1。结论RBC数目能准确、简捷地在小红细胞人群（MCV〈82fl）中区分珠蛋白生成障碍性贫血基因携带者和铁缺乏症患者，值得在珠蛋白生成障碍性贫血高发地区，特别是经济比较落后的农村地区推广。

G6PD缺陷症对恶性疟疾感染风险的影响

目的:观察葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺陷症不同表型对恶性疟原虫感染的影响。方法:采用横断面研究的方式,将2012年雨季到马拉博地区医院就诊的2 690名比奥克岛当地居民纳入研究。用显微镜镜检、荧光定量PCR结合熔解曲线法检测疟原虫。用荧光斑点法及PCR-DNA测序鉴定G6PD缺陷症。采用Logistic回归进行关联性分析。结果:该人群的G6PD缺陷症的总发生率为9.22%,基因型均为G6PD*A-(c.202 G>A/c.376 A>G)。G6PD缺陷症体现出强烈的疟疾保护作用(P<0.05);不同性别和表型的G6PD缺陷者中,只有男性半合子对疟疾有保护作用(P<0.05),而女性杂合子组与女性纯合子组均无统计学差异(P>0.05)。结论:G6PD缺陷症的男性半合子表型能够减低恶性疟疾感染的风险,但是其机制尚未明确,有待更深入的研究。

SYBR GreenⅠ染料法定量PCR检测疟原虫感染及

目的评价一种可以快速定量检测疟原虫及虫种鉴别的荧光定量PCR法。方法将SYBR Green Ⅰ法与TaqMan探针法检测疟原虫进行比对,评价定量的准确性及方法的敏感度。以PCR-DNA测序法为金标准,评价SYBR Green Ⅰ法分型的准确性。结果两个方法的定量拷贝检测数无显著性差异(P>0.05)。SYBR Green Ⅰ法检测疟原虫的最低检测下限为1×102copy/mL至5×102copy/mL之间。与PCR-DNA测序法比较,SYBR Green Ⅰ法能准确的对感染的疟原虫虫种做准确的鉴定。结论 SYBR Green I染料法定量可同时进行人体疟原虫的定量检测和虫种鉴别,且成本低廉,操作简便快速,可以在疟疾的高发地区推广使用。

云南省西双版纳州傣族G6PD缺陷症发生率及突变谱研究

目的了解云南省西双版纳州傣族人群的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的发生率及基因型。方法在2012年8月至2013年9月期间,用荧光斑点定性法对812例傣族居民进行G6PD缺乏筛查。用反向斑点杂交芯片和PCR-DNA测序法分析G6PD缺乏症的标本的基因型。结果云南西双版纳州傣族人群的G6PD缺乏症总发生率为9.73%(79/812),其中男性32例(9.07%,32/353),女性47例(10.24%,47/459)。79例初筛G6PD缺乏标本65例检测出有突变,共检出8种基因突变类型,含16例1376 G>T(24.24%)、10例1311C>T(15.15%)、9例1388 G>A(13.63%)、7例392 G>T(10.60%)、6例95 A>G(9.09%)、5例1360C>T(7.57%)、2例871 G>A(3.03%)、1例1024C>T(1.52%),和6种复合突变包括2例G871A/C1311T(3.03%)、2例G392T/G1376T(3.03%)、2例G392T/G1388A(3.03%)、1例C1024T/C1311T(1.52%)、1例C1311T/G1376T(1.52%)、1例C1311T/G1388(1.52%)。结论云南西双版纳州傣族G6PD缺乏症检出率高,最常见的三种基因型是G6PD1376 G>T、1311C>T和G6PD1388 G>A。在西双版纳地区当地开展G6PD缺乏症的新生儿筛查、产前筛查和遗传咨询是非常有必要的。

异常血红蛋白家系的分子诊断

目的对2个罕见的异常血红蛋白家系进行分子诊断。方法采集家系成员的外周血标本,进行血红蛋白的醋酸纤维薄膜电泳(pH8.5)与红细胞参数的分析。常规提取基因组DNA,采用gap-PCR和反向斑点杂交(RDB)鉴定地中海贫血基因。以聚合酶链反应联合限制片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和DNA测序方法进行珠蛋白基因突变的鉴定。结果两个家系分别为HbQ-Thailand家系和HbKoln家系。结论 PCR-RFLP法能快速鉴定此两种异常血红蛋白,其中HbKoln家系在中国大陆地区为首次发现。

红细胞参数对小儿轻型地贫及轻度缺铁性贫血的诊断价值

目的总结小儿轻型地中海贫血(地贫)及轻度缺铁性贫血(IDA)血液学特征,评价红细胞参数对小儿轻型地贫及轻度IDA的诊断价值。方法选取2013年2月至2019年3月潮州市中心医院158例轻型地贫患儿为轻型地贫组,100例轻度IDA患儿为轻度IDA组,215例健康体检儿童为对照组。采用血球分析仪分析各组间红细胞参数:红细胞计数(RBC)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)及红细胞体积分布宽度(RDW-CV);采用PCR+导流杂交法行α和β地贫基因检测,通过受试者工作特征(ROC)曲线法确定各参数最佳筛查指标和截断值。结果RBC:轻型地贫组>对照组>轻度IDA组,差异有统计学意义(P<0.05);RDW-CV:轻型地贫组>轻度IDA组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MCV、MCH:对照组>轻度IDA组>轻型地贫组,差异有统计学意义(P<0.05)。RBC曲线下面积(AUC)为84.7%,截断值为4.70×1012/L,RDW-CV AUC为74.6%,截断值为14.25%。结论小儿地贫和IDA红细胞参数分布特征及变化趋势各异,红细胞参数RBC及RDW-CV对小儿轻型地贫和轻度IDA具一定鉴别诊断价值。

高分辨熔解曲线检测潮汕汉族人群的载脂蛋白E基因多态性

目的研究载脂蛋白E(apo E)基因单核苷酸多态性各等位基因及基因型在潮汕汉族人群中的分布频率,比较其在不同种族间分布的差异。方法采用高分辨熔解曲线分型技术检测100例潮汕地区汉族人群的Apo E基因rs429358和rs7412多态性。PCR-测序法作为金标准进行比对。结果在潮汕地区汉族人群中存在Apo E基因rs429358和rs7412多态性。潮汕人的Apo E基因型分布以E3/E3最常见,其次为E4/E3。与非洲及欧洲人群比较,Apo E基因多态性的分布频率均存在显著性差异(P<0.05);而与中国汉人比较差异无显著性(P>0.05)。结论采用高分辨熔解曲线法进行Apo E基因多态性检测,其操作简便省时,不易交叉污染;获得的各种基因类型特征性强,适用于临床陕速诊断分型和遗传学人群研究。Apo E的3种常见等位基因频率分布存在地域差异。

PLCE1蛋白在食管鳞状细胞癌及正常食管鳞状上皮中的表达情况及意义

目的研究磷脂酶Cε1(PLCE1)蛋白在食管鳞状细胞癌(ESCC)及非肿瘤食管组织中的表达情况,探讨其与ESCC发病机制的关系。方法收集潮州市中心医院病理科存档的ESCC患者手术切除标本及非肿瘤患者内镜活检食管组织的蜡块。采用免疫组织化学染色PV-9000二步法(非生物素)检测非肿瘤患者食管正常鳞状上皮标本49例(A组)、肿瘤患者癌旁正常鳞状上皮标本73例(B组)和ESCC标本113例(C组)。结果 PLCE1蛋白在A组的表达水平明显高于C组和B组(P<0.05),且呈递减趋势。B组与C组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PLCE1蛋白在A、B、C组中的表达差异,提示它可能参与ESCC发生,且其在正常食管鳞状上皮中的表达高于ESCC组织,提示其低表达在ESCC的发生过程中可能起到促进作用。

非梗阻性无精子症患者X染色体连锁的TEX11基因多态性研究

目的明确潮州地区男性非梗阻性无精子症患者X染色体连锁的TEX11基因多态性类型及其频率。方法从2012年6月至2018年5月来本院泌尿外科和生殖医学科就诊的患者中收集到217例无精子症患者血液样本,列为实验组的35例患者符合非梗阻性无精子症的诊断标准,以生精(生育能力)正常男性为对照组,应用多重聚合酶链反应(PCR)技术对实验组和对照组的TEX11基因进行扩增,并通过基因测序检测TEX11基因多态性情况,采用Chromas软件、Nucleotide BLAST数据库分析比对基因测序结果,对TEX11基因多态性的位点和类型进行统计。结果实验组TEX11外显子错义突变点有2处,分别是Exon 7:c.389 A>G,突变率37.1%;Exon 17:c.1351 G>A,突变率8.6%。对照组中发现Exon7、Exon 17也有相同位点突变,突变率分别为:37.5%、8.3%。2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在非梗阻性无精子症患者和生精正常男性都发现了TEX11外显子2个相同单核苷酸多态性(SNP)(Exon 7:c.389 A>G;Exon 17:c.1351 G>A),本研究推论这2种突变不影响TEX11的功能。

血清钙离子对小儿脓毒症及相关性弥散性血管内凝血的评估价值

目的探讨血清钙离子对小儿脓毒症及所致弥散性血管内凝血(DIC)评估的临床价值。方法选择2013年2月—2020年3月入住本院PICU的43例脓毒症非DIC(脓毒症非DIC组)及36例脓毒症并DIC(脓毒症并DIC组)患儿为实验组,另选择46例感染非脓毒症(感染非全身炎症反应综合征SIRS组)及47例非感染(非感染组)患儿为对照组。分析比较各组血清钙离子水平,对实验组钙离子与活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)、血小板计数(PLT)、C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)等行相关性分析。结果除感染非SIRS组及非感染组外,余各组间血清钙离子有显著差异(P<0.01);脓毒症并DIC组及脓毒症非DIC组Ca、PT、APTT、FIB、PLT有显著差异(P<0.01);脓毒症并DIC组Ca与FIB呈正相关,脓毒症非DIC组Ca与PT呈负相关。结论血清钙离子对小儿脓毒症及脓毒性DIC的评估有重要临床价值,与PT、FIB存在相关性。

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)c.1311C>T/IVS-1193T>C与3′-UTR的多态性探讨

目的对中国人群葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenas,G6PD)c.1311C>T/IVS-11 93T>C基因多态性与3′-非翻译区(3′-untranslated regions,3′-UTR)的多态连锁相关性进行研究。同时了解粤东、华北地区健康人群中该突变基因的携带情况。方法应用全自动生化仪速率法测定G6PD活性,基因测序检测G6PD c.1311C>T/IVS-11 93T>C基因多态性。根据G6PD基因UTR区设计特异性引物,测序确证携带c.1311C>T/IVS-11 93T>C基因多态性的G6PD缺乏标本是否连锁有UTR单个碱基上的变异(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点的变异。结果华南地区有39例G6PD缺乏样本检测到携带c.1311C>T/IVS-11 93T>C基因突变,其3′-UTR和5′-UTR端没有检测到SNP位点的变异。同时,我们研究发现G6PD酶活性正常的人群中也携带有c.1311C>T/IVS-11 93T>C变异,其在潮州、梅州各100名正常人群中发生率分别为15.7%和12%,在郑州和石家庄各50名正常人群中发生率分别为2%和8%。该变异在中国南方与北方的正常人群之间相比较有统计学差异。粤东地区G6PD缺乏者中携带c.1311C>T/IVS-11 93T>C基因突变的样本并未发现连锁有UTR SNP位点突变。结论关于G6PD c.1311C>T/IVS-11 93T>C基因突变与G6PD缺乏之间的相关性值得进一步探讨。

血清神经元特异性烯醇化酶缺血修饰蛋白与新生儿缺氧缺血性脑病严重程度的相关性分析

目的探讨血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、缺血修饰蛋白(IMA)与新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)病情严重程度的关系。方法选择2016年3月至2017年2月潮州市中心医院新生儿科收治的81例HIE患儿作为HIE组,根据病情轻重,将HIE组分为轻度HIE组32例、中度HIE组24例及重度HIE组25例;选择同期30例正常足月新生儿作为对照组。分别检测对照组生后1~2 d及3组患者HIE急性期与恢复期血清NSE、IMA水平,分析两者与HIE病情严重程度的关系。采用Pearson相关分析,分析三组HIE急性期及恢复期NSE、IMA的相关性。结果 3组HIE急性期及恢复期NSE、IMA均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。其中重度HIE组急性期NSE、IMA[(61.14±30.8)μg/L,(97.26±2.46)U/mL]高于中度HIE组[(40.30±10.81)μg/L,(93.08±1.90)U/mL]及轻度HIE组[(18.75±1.40)μg/L,(83.75±0.78)U/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。恢复期重度HIE组NSE,IMA[(20.81±9.57)μg/L,(83.34±2.01)U/mL]及中度HIE组[(21.14±7.04)μg/L,(82.28±2.17)U/mL]均高于轻度HIE组[(10.89±5.14)μg/L,(73.17±1.91)U/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性显示,三组患者HIE急性期,恢复期NSE与IMA均呈正相关(P<0.05)。结论血清NSE与IMA水平的变化与HIE病情严重程度正相关。

XRCC1基因多态性与食管鳞癌放疗敏感相关性分析

目的了解食管鳞癌患者的X射线交错互补修复基因1(X-ray repair cross complementing group1,XRCC1)的4个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点的分布情况及其与放疗敏感性的关系。方法提取175例食管鳞癌患者外周血DNA,通过特异性引物PCR扩增XR CC1的4个SNP所在基因片段,测序及BLAST多态性分析,并与放疗结果相结合,分析SNP与放疗疗效的相关性。结果175例食管鳞癌患者中有112例能成功扩增并测序XR CC1中4个SNP位点。112例患者全组放疗近期有效率为84.8%,其中,4个SNP位点均未变异的基因型组有效率为74.3%,有1个以上SNP变异的基因型组有效率为89.6%(χ^(2)=4.389,P=0.036);单独第4个SNP位点(G28152 A,Arg399Gln)变异的基因型组和所有含第4个SNP位点变异组有效率分别为91.2%和91.5%,与未变异的基因型组比较差异有统计学意义(χ^(2)=4.014,P=0.045和X2=4.451,P=0.035)。结论XRCC1中SNP变异基因型组与食管鳞癌患者放疗敏感性相关。其中,第4个SNP位点变异的基因型可能是放疗敏感的预测指标。

A族β溶血性链球菌感染与儿童抽动障碍相关性研究及苄星青霉素疗效临床分析

目的研究A族β溶血性链球菌(group Aβ-streptococcal,GAS)感染与儿童抽动障碍(tic disorder,TD)相关性及分析苄星青霉素临床疗效。方法纳入2017年6月至2020年10月广州妇女儿童医疗中心就诊TD患儿为研究对象,抗链球菌溶血素(anti-streptolysin,ASO)升高者为302例(TD1组,疑似感染GAS),ASO正常为189例(TD2组)。TD1组包括短暂性TD(transient tic disorder,TTD)183例,慢性TD(chronic tic disorder,CTD)72例及Tourette综合征(Tourette syndrome,TS)47例。对比TD1组及TD2组性别、年龄、TTD、CTD、TS、注意力缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)、睡眠障碍(sleep disorder,SD)、强迫症(obsessive-compulsive disorder,OCD)、情绪障碍(emotional handicap,ED)、遗尿、啃指甲、拔毛、近期呼吸道感染、腺体肥大等特征差异。治疗Ⅰ:对照组予硫必利治疗,治疗组予硫必利+苄星青霉素治疗,以耶鲁综合抽动严重程度量表(Yale comprehensive tic severity scale,YGTSS)评估治疗前后分值,对比疗效。治疗Ⅱ:对ASO>800 IU/L、接受硫必利+可乐定透皮贴和(或)托吡酯治疗无效TD1组患儿,加用苄星青霉素1年,对比疗效。结果TD1组CTD、TS、ADHD、ED、SD、遗尿、啃指甲或拔毛、近期呼吸道感染、腺体肥大发生率均高于TD2组,差异均具统计学意义(P<0.05)。治疗Ⅰ:YGTSS减分[治疗组(10.083±4.862)分>对照组(4.358±3.806)分]和有效率[治疗组(89.17%)>对照组(43.92%)]差异均具统计学意义(P<0.01)。治疗Ⅱ:YGTSS分值[治疗前(19.182±5.229)分>半年(8.030±4.753)分>1年(4.483±3.101)分]和ASO[1年后(315.625±175.665)U/L<治疗前(1209.579±498.232)U/L]差异均具统计学意义(P<0.01)。结论GAS感染可能参与TD发生发展,使神经精神异常行为多样化,考虑应用苄星青霉素治疗链球菌相关TD效果较佳。

宁夏银川回族G6PD缺乏症发生率及突变谱研究

目的了解宁夏银川地区回族葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症(G6PD deficiency)的发生率及基因突变类型。方法在2012年10月至2013年5月,用荧光斑点法对1041例成年回族进行G6PD酶学筛查;用PCR-反向斑点杂交芯片(PCRRDB)和PCR-DNA测序法鉴定酶学筛查缺陷样本的突变型。结果回族人群的G6PD缺乏症的发病率为0.58%(6/1041),其中女性4例(0.39%,4/650),男性2例(0.19%,2/391)。G6PD缺乏症是世界上最为普遍的单基因遗传病之一,男女检出比率为1:2(2/4)。在6例G6PD缺乏症者中5例为单一突变,1例为复合突变。有6种突变被检出,分别为c.392 G>T、c.1024 C>T、c.1311 C>T、c.1360 C>T、c.1376 G>T、c.1388 G>A。结论宁夏地区回族人群G6PD缺乏症发生率较低。c.392 G>T和c.1311 C>T为回族G6PD缺乏症主要的基因型。