建立快速检测淋巴细胞内磷酸化信号传导及转录激活子的方法

目的建立淋巴细胞内磷酸化信号传导及转录激活子(STAT)的快速检测方法。方法人单个核细胞或外周静脉血淋巴细胞用IL-6、IL-4和IFN-α1体外刺激15min,运用流式细胞术检测胞内STAT3(pY705)、STAT6(pY641)和STAT1(pY701)磷酸化水平,并比较不同破膜剂对它的影响。结果与0.2%皂素、90%甲醇比较,PurmbufferⅢ破膜剂破膜后,能够显著地提高淋巴细胞内STAT3的磷酸化水平(P<0.01)。结论经PermbufferⅢ破膜后,运用流式细胞术可快速检测磷酸化STAT3、STAT6和STAT1。