乳腺癌腔镜保乳改良根治术的临床研究

目的:探讨乳腺癌腔镜保乳改良根治手术的临床方法及疗效。方法:对2010年3月至2012年3月20例行腔镜保乳改良根治术的乳腺癌患者的临床资料进行回顾性分析。结果:20例腔镜乳癌手术顺利,无明显并发症,前哨淋巴结检出率90.0%(18/20),准确率94.4%(17/18),平均检出淋巴结数15.75枚,术后随访全组无明显伤口瘢痕,美体效果满意,无复发和转移。结论:借助腔镜行乳癌根治术,可提高手术效能及生存质量,有积极意义,值得推广。

高脂饮食联合小剂量STZ诱导2型糖尿病大鼠及小鼠模型眼表角膜病变的形态学观察

目的:探讨高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠及小鼠模型眼角膜形态学改变,阐明糖尿病并发眼部疾病时眼表角膜病变特征。方法:将动物随机分为模型组和正常对照组,高脂饮食联合STZ腹腔注射建立大鼠及小鼠糖尿病模型。造模16/12周后,氧化酶法检测空腹血糖水平,酶法检测血游离脂肪酸及总胆固醇水平;动物处死后分离眼球,角膜HE染色并在光镜下观察其组织病理学改变。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠及小鼠体质量无明显改变(P>0.05),但摄食量、空腹血糖、血脂水平均显著升高(P<0.01)。与正常对照组比较,模型组大鼠及小鼠角膜形态学观察均表现为厚度明显增加,上皮层及基质层水肿明显。结论:高脂饮食联合小剂量STZ注射建立的实验性大鼠及小鼠糖尿病模型成模后16/12周,均具有明显的眼表角膜受损特征。

IL-1ra对大鼠高危角膜植片IL-1β影响的实验研究

目的探讨炎性细胞因子白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)β在高危角膜移植免疫排斥反应中的作用及IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist,IL-1 ra)抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的作用机制。方法诱导新生血管后的大鼠行穿透性角膜移植术,受体鼠随机分为3组:生理盐水对照组、10g·L-1环孢霉素A(cyclosporin A,CsA)滴眼液治疗组、50mg·L-1的IL-1ra滴眼液治疗组,每组15只。分别采用原位杂交和免疫组织化学方法检测术后不同时间点各组大鼠角膜移植物IL-1β mRNA及蛋白表达情况。结果正常大鼠角膜IL-1β mRNA在上皮细胞基底层微量表达,IL-1β蛋白无表达;术后不同时间点各移植组角膜植片上皮层、基质层均可检测到IL-1β mRNA及蛋白的阳性表达。术后同一时间点不同移植组相比:IL-1β mRNA及蛋白的表达依次减低顺序为生理盐水对照组、10g.L-1CsA组、50mg·L-1IL-1ra组,差异有显著统计学意义(P<0.01);在急性排斥期,与10g·L-1CsA滴眼液组相比,IL-1ra组降低更明显,两治疗组间比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论IL-1ra可通过影响IL-1β的表达抑制高危角膜移植免疫排斥反应,减少新生血管生成,减轻免疫性炎性反应,延长角膜植片的存活时间。

姜黄素抑制兔碱烧伤角膜新生血管形成及房水VEGF的表达

目的:探讨姜黄素对碱烧伤角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)和房水VEGF表达的影响。方法:新西兰大耳白兔23只分为正常组A组3只,实验对照组B组20只左眼,实验干预组C组20只右眼。建立兔角膜碱烧伤CNV模型,运用裂隙灯观察CNV生长及用病理组织切片、酶联免疫吸附试验分别检测应用姜黄素前后角膜微血管计数和VEGF在兔房水中的表达情况。结果:正常组没有CNV生成,C组和B组相比CNV的生长受到明显抑制,二者微血管计数差异具有显著性(B组vsC组,P<0.05)。房水VEGF在3组中均有表达,但是B组和C组明显高于A组(B组vsA组、C组vsA组,两者均P<0.05),C组的VEGF表达低于B组,差异均有显著性(B组vsC组,P<0.05)。结论:姜黄素可有效降低角膜碱烧伤后房水VEGF的表达并使CNV数目减少。

TLRs在大鼠穿透角膜移植术后排斥反应中的作用

目的动态检测大鼠角膜组织TLR2、TLR3、TLR4mRNA的表达,研究TLR2、TLR3、TLR4在穿透角膜移植术后免疫排斥反应中的作用。方法采用SPF级雌性SD大鼠108只为受体,SPF级Wistar大鼠36只为供体,另取SPF级雌性SD大鼠6只12只眼为正常对照组。受体大鼠分为3组:自体角膜移植组(A)、同种异体角膜移植组(B)和同种异体角膜移植后糖皮质激素应用组(C),A、B、C组各36只大鼠接受穿透角膜移植术,术后裂隙灯下观察角膜透明度、新生血管情况并采用排斥反应指数(RI)进行评分。分别于术后第5、7、9天获取角膜标本行组织病理学检查和荧光实时定量PCR(real-timePCR)检测,动态观察角膜组织中TLR2、TLR3、TLR4mRNA的表达。结果术后随时间变化,A、B、C组大鼠角膜植片均出现不同程度的水肿、混浊、新生血管生长。B组大鼠角膜RI平均在术后7d符合排斥反应的诊断标准并经病理学检查证实。A组和C组大鼠角膜的RI计分未达到排斥反应诊断标准。正常大鼠角膜可见TLR2、TLR3、TLR4mRNA表达;术后9dB组大鼠角膜TLR2mRNA的表达较A组显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);TLR3mRNA和TLR4mRNA在B组各时间点间表达的差异倍数比较均无统计学意义(P=0.30;P=0.32),但组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TLR2可能作为天然免疫识别受体识别移植抗原,参与角膜移植术后的免疫排斥反应。

盐酸吡格列酮抑制大鼠角膜新生血管的研究

目的探讨眼局部应用过氧化物酶增生体激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR-γ)配体盐酸吡格列酮对大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的抑制作用及其对CNV化大鼠角膜组织中PPAR-γ、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法角膜缝线法制作大鼠CNV模型,24只诱发新生血管的SD大鼠随机分为吡格列酮治疗组和生理盐水处理组,每组各12只,并以6只正常大鼠做对照。裂隙灯显微镜下观察各组CNV的生长情况,计算CNV面积;免疫组织化学法检测角膜组织中PPAR-γ和VEGF的表达。结果(1)盐酸吡咯列酮治疗组在第5天、第12天、第20天、第28天的新生血管面积分别为(3.96±3.07)mm2、(13·06±4·97)mm2、(24.42±5.92)mm2、(10.49±3.12)mm2,而生理盐水对照组的新生血管的面积分别为(9.00±2.22)mm2、(17.25±2.11)mm2、(31.89±2.54)mm2、(19.12±3.15)mm2,2组相比差异有显著统计学意义(P<0.01);(2)PPAR-γ在正常组角膜上表达量为2.70±2.16,在新生血管化大鼠角膜上的表达为13.30±4.71,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);(3)盐酸吡格列酮治疗组PPAR-γ和VEGF的表达量分别为27.40±14·34、14.90±3.67,而生理盐水处理组分别为13.30±4.71、33.70±11.06。与生理盐水处理组比较,治疗组PPAR-γ的表达大幅上升(P<0.05),VEGF的表达则明显降低(P<0·05)。结论盐酸吡格列酮能够抑制大鼠CNV,其机制可能与活化PPAR-γ,降低CNV化角膜上VEGF的表达有关。

婴幼儿眼性斜颈的临床特征与早期手术效果

目的:探讨婴幼儿眼性斜颈的临床特征,评估眼性斜颈早期手术效果。方法:对70例患儿进行回顾性分析。通过获取歪头试验、九方位眼球运动检查及眼底照相的结果,分析眼球肌肉异常的类型,对眼性斜颈做出定性诊断。采用计算机辅助斜视诊断技术,精确测量出水平斜视度数。对眼性斜颈患者中,上斜肌麻痹、下斜肌功能亢进者,行下斜肌部分切除术。其它原因引起的眼性斜颈,根据眼球肌肉异常类型的不同,设计不同的手术方法。对合并水平斜视者以计算机辅助下斜视测量软件测量出的水平斜视角度为根据,定量设计手术。随访时间6～12mo。结果:本组病例中,均找到眼部病因,以单纯性单眼上斜肌麻痹最常见,54例(77%)。全部患儿均接受手术治疗。一次手术后,单纯性单眼上斜肌麻痹患儿,6mo内治愈或改善者53例(占所有单纯性单眼上斜肌麻痹患儿的98%)。所有患儿6mo内治愈或改善者64例(91%),手术失败者6例。其中3例接受第二次手术,术后3例均治愈或改善。合并水平斜视者11例(16%),一次手术后水平斜视全部矫正。结论:婴幼儿眼性斜颈是一组包含不同类型病因的斜视。明确病因后尽早手术可获得满意头位矫正效果。

CD80与CD86在角膜移植排斥反应中作用的实验研究

目的:探讨角膜移植术后C D80、C D86的表达,了解协同刺激分子在角膜移植排斥反应中的作用,为进一步研究角膜移植排斥反应发病机制及治疗提供新的思路。方法:随机将F344大鼠5只及Lou大鼠25只分为同种异体移植组和同基因移植对照组,同种异体组采用F344大鼠5只为供体,Lou大鼠10只为受体,对照组采用Lou大鼠5只作为供体和Lou大鼠10只作为受体。连续观察12d,进行临床及病理学观察。采用流式细胞技术检测角膜细胞在移植术后C D80、C D86的表达。结果:同种异型移植组术后角膜细胞C D80、C D86的表达较对照组高,差异有显著性(P<0.01),并且与临床及病理学观察结果相一致。结论:协同刺激分子C D80、C D86参与了角膜移植排斥反应,角膜移植术后植片协同刺激分子表达增加从而活化局部T细胞的功能,使免疫排斥反应发生。

FTY720抑制S1P诱导的角膜新生血管的研究

目的:探讨芬戈莫德(fingolimod,FTY720)对大鼠角膜新生血管(CNV)的抑制作用。方法:分别采用MTT法和划痕法观察不同浓度FTY720对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的增生和S1P诱导下的细胞迁移的影响。应用大鼠角膜微囊袋模型,检测FTY720对S1P诱导的CNV的作用。将30只SD大鼠按随机数字表法分成A、B和C组,每组10只,在各组角膜基质层内植入S1P的同时依次植入0,5,20μg FTY720缓释颗粒。术后对CNV生长情况观察,并在12d行组织病理学检查。实验结果采用单因素方差分析。结果:10,102,103,104nmol/L FTY720与HUVECs共孵育72h可抑制细胞增生(P<0.01),10,100nmol/L FTY720作用24h后,可抑制由S1P诱导的细胞迁移,随FTY720浓度增加其抑制细胞增生和迁移的作用均增强,A、B、C组大鼠角膜微囊袋缓释微粒体植入后12d,CNV面积分别为10.05±1.19,6.59±0.95,2.70±0.68mm2(F=145.155,P<0.01),A与B组、B与C组间均有统计学差异(P<0.01)。结论:FTY720能抑制S1P诱导的角膜新生血管生成。

角膜血管新生机制与调控新进展

正常角膜在多种因素的共同作用下处于稳定的"血管赦免"状态,这也是角膜发挥正常生理功能的基础。但在某些特定情况,如缺氧、炎症和角膜干细胞缺乏时,角膜血管生成因子和抑制因子的平衡被打破,角膜血管化开关开启,角膜缘毛细血管网通过血管新生和血管生成产生新生血管,使角膜无血管状态被破坏。我们从正常角膜的无血管状态、角膜血管新生启动机制、血管的生长过程和几种主要调控因子等方面对角膜血管新生机制与调控机制进行综述。

正常大鼠角膜NF-κB及其下游因子ICAM-1、VEGF的表达与意义

目的:研究核因子-κB(NF-κB)及其下游因子细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)在正常角膜中的表达规律,为进一步研究角膜移植排斥反应的发病机制及治疗提供新的思路。方法:健康清洁级Wistar大鼠5只,体重200～250g。10%水合氯醛溶液腹腔注射麻醉后立即摘除眼球共10个,剪下完整角膜(带角膜缘),置于4%多聚甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,切片。每份标本连续制作4张4μm切片,1张行HE染色,其余3张分别用于NF-κB、ICAM-1、VEGF的免疫组织化学染色(SABC法)检测。结果:正常的大鼠角膜中,NF-κB及其下游因子ICAM-1、VEGF在角膜上皮层细胞内有较弱的基础表达,主要表达在基底层细胞;而在角膜基质层及内皮细胞未见阳性表达;NF-κB、ICAM-1、VEGF在正常大鼠角膜的表达部位及表达强度具有良好的一致性。结论:NF-κB可能通过调控ICAM-1、VEGF等基因的表达,参与角膜移植排斥反应及角膜新生血管形成,起着中心调控者的作用。

姜黄素对翼状胬肉成纤维细胞抑制作用的研究

目的研究姜黄素对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞（human pterygium fibroblasts HPF）增殖的影响,探索翼状胬肉防治新方法。方法用0~80μg/mL姜黄素作用体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞,观察24~96h后不同浓度姜黄素对人翼状胬肉成纤维细胞的影响。CCK-8法检测细胞生长活性,流式细胞仪检测细胞周期时相变化。结果在0~80μg/mL浓度作用24~96h范围内,姜黄素可以抑制HPF细胞的增长,且呈剂量和时间依赖性。0、10、20、40、80μg/mL姜黄素作用24h后,姜黄素作用组均出现G0-G1期细胞百分比上升,S期细胞百分比下降,且姜黄素对成纤维细胞的抑制作用呈剂量依赖性。结论姜黄素可抑制体外培养人翼状胬肉成纤维细胞增殖。

色素上皮衍生因子对角膜碱烧伤后新生血管形成的抑制

背景:角膜新生血管导致角膜透明性降低,造成严重的视觉障碍。色素上皮衍生因子是一种内源性血管生成抑制剂,其对于角膜新生血管是否具有抑制作用尚不清楚。目的:探索局部运用色素上皮衍生因子对大鼠角膜碱烧伤后角膜新生血管的抑制作用。方法:将20只大鼠随机分为生理盐水组与色素上皮衍生因子组,每组10只。用NaOH溶液将大鼠右眼角膜烧伤诱导产生新生血管。碱烧伤后2组每日分别给予生理盐水和色素上皮衍生因子点眼,并采用裂隙灯显微镜观察和测量各组角膜新生血管生长情况。碱烧伤后12d处死大鼠,将角膜组织固定切片,行苏木精-伊红染色观察,并进行免疫组织化学染色检测各组大鼠角膜血管内皮生长因子和CD31的表达。结果与结论:大鼠角膜碱烧伤后3,7,12d,色素上皮衍生因子组大鼠角膜新生血管面积均小于生理盐水组(P<0.05)。角膜碱烧伤后12d,苏木精-伊红染色显示生理盐水组大鼠角膜产生大量新生血管,角膜组织结构紊乱;色素上皮衍生因子组新生血管较少,角膜组织结构趋于整齐。角膜碱烧伤后12d,免疫组织化学染色示生理盐水组大鼠角膜上皮和基质层可见血管内皮生长因子大量表达,角膜基质层可见血管内皮生长因子和CD31大量表达;色素上皮衍生因子组新生血管稀少,CD31表达较弱。证实局部应用色素上皮衍生因子可有效抑制大鼠角膜化学伤后的血管新生。

大鼠角膜移植后新生血管的演变

目的观察大鼠同种异体穿透性角膜移植后无干预下角膜新生血管的生长演变。方法SPF级雌性SD大鼠34只(34眼)行同种异体穿透性角膜移植,术后不进行任何治疗,分别于术后第4天、第7天、第15天和第30天在裂隙灯显微镜下观察角膜新生血管的生长情况,利用公式C/12×3.14×[r2-(r-I)2]计算角膜新生血管的面积,并比较不同时间点角膜新生血管面积占全角膜面积的百分比。结果移植后的32眼(剔除1只死亡鼠及1只丢失鼠)中出现新生血管29眼,占90.6%。新生血管最初环角膜缘呈毛刷状生长,后向角膜中央蔓延。高峰时期交叉密布成网状,以后逐渐萎缩。角膜移植后第4天、第7天、第15天和第30天角膜新生血管平均面积分别为(11.83±3.35)mm2、(18.52±3.96)mm2、(14.38±4.28)mm2和(6.00±1.84)mm2,总体平均面积为(12.68mm±1.87)mm2;新生血管面积占角膜面积百分比值均数分别为(30.76±8.72)%、(65.25±12.78)%、(59.35±14.48)%和(36.15±10.90)%,总体为(48.67±6.38)%。结论大鼠同种异体穿透性角膜移植后无干预下角膜新生血管发生率极高,且新生血管来源于结膜角膜缘的毛细血管丛。术后血管新生立即开始,因此应尽早开始抗炎治疗,防止新生血管出现。

三种不同材料注射构建高眼压模型兔的比较

背景:目前对青光眼的发病机制、过程、损害的研究很多,但缺乏理想的青光眼模型。目的:利用不同材料制作3种兔高眼压动物模型,并验证各种兔高眼压动物模型在青光眼研究以及临床中实用价值。方法:选普通级健康新西兰白兔30只,随机数字表法把30只兔子随机分为3组,每组10只。将每只兔子的一眼作为实验眼,另一只眼作为对照眼。3组实验眼前房内分别注射自体血、甲基纤维素、长效气体C3F8材料;对照眼用同样的方法注射生理盐水,建立青光眼动物模型。记录注射前、注射后当时、24,36,48,72,96,120,168h眼压变化。结果与结论:三种材料均可诱发实验兔成为高眼压模型,3组兔子眼压均有明显升高(P<0.05),其升高的幅度及维持的时间不同。3种材料诱发高眼压3持续时间分别为1,3,7d,重复上述注射眼压可再次升高,维持高眼压时间更久。3组动物眼压波动在1.86～6.65kPa之间。眼前节出现轻度炎症反应。证实利用自血、甲基纤维素、C3F83种材料建立的3种兔眼模型均是理想的高眼压模型,具有方法简单,易于操作和控制等特点。依据研究的需要,可以选择不同的实验动物模型,可用于急、慢性青光眼的相关研究。

螺内酯对大鼠角膜新生血管生长的影响

目的研究醛固酮受体拮抗剂螺内酯对角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)生长的影响,探讨其抑制新生血管的机制。方法经缝线诱导CNV模型SD雌性大鼠20只,随机分为CNV对照组、螺内酯灌胃组(灌胃螺内酯150mg·kg-1·d-1),每组10只10眼;另取大鼠10只不作任何处理作为正常对照组,比较建模后第3天、第7天、第12天各组新生血管的生长情况并计算CNV生长面积,各组大鼠均于术后第12天取角膜行病理组织学检查,并采用免疫组织化学染色法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。结果缝线后各时间点上,新生血管对照组CNV的面积分别为(2.549±1.315)mm2、(13.998±2.999)mm2、(23.266±2.833)mm2,螺内酯灌胃组分别为0mm2、(8.454±2.830)mm2、(15.189±3.676)mm2,2组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。新生血管对照组角膜组织中VEGF的表达量为22.660±4.158,而螺内酯灌胃组为12.460±1.754,与新生血管对照组相比显著减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论螺内酯全身应用有效地抑制了大鼠CNV的生长,其对VEGF的抑制作用可能是螺内酯抑制CNV的机制之一。

^(99)Tc-MDP对碱烧伤性大鼠角膜新生血管生成的抑制作用

目的: 探讨99Tc-MDP对碱烧伤性大鼠角膜新生血管生成的抑制作用。方法: 采用碱烧伤法制备角膜新生血管模型,24只健康SD大鼠随机分成两组,实验组予以腹腔注射99Tc-MDP,每天1次,至模型建立后14d。对照组以等体积的生理盐水腹腔注射。观察新生血管形成时间、第21d时角膜新生血管长度和新生血管面积。结果: 实验组新生血管长入的时间为6.25±1.93d,对照组长入时间为5.83±1.86d,差异无统计学意义(P=0.30)。新生血管长度实验组为1.74±0.33mm,对照组为2.82±0.25mm;新生血管的面积实验组为17.3±3.26mm2,对照组为24.8±5.10mm2,两者之间差异均有统计学意义(P<0.01)。结论: 使用99Tc-MDP可以有效抑制碱烧伤引起的角膜新生血管的生成。

散光陡峭轴切口在白内障超声乳化多焦点人工晶状体植入术中的应用

目的探讨散光陡峭轴切口在白内障超声乳化多焦点人工晶状体植入术中的应用效果。方法将28例(35眼)白内障患者随机分成两组,A组14例16眼,采用11点钟位透明角膜3.0 mm切口;B组14例19眼,在散光陡峭轴方位行透明角膜3.0 mm切口。所有患者均行超声乳化+人工晶状体植入术,术中植入多焦点人工晶状体。于术后1周、1个月、3个月观察患者角膜散光及裸眼远、近视力情况。结果 A组患者术后1周、1个月、3个月裸眼远视力分别为0.62±0.20、0.71±0.62、0.75±0.20,近视力分别为0.49±0.18、0.51±0.20、0.62±0.20;B组各时间点裸眼远视力分别为0.84±0.52、0.86±0.22、0.91±0.42,近视力分别为0.57±0.26、0.61±0.22、0.69±0.18,B组各时间点均好于A组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。A组患者术后1个月、3个月时散光分别为(1.13±0.64)D和(1.03±0.34)D,B组分别为(0.89±0.40)D、(0.56±0.38)D,B组角膜散光小于A组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论于散光陡峭轴行角膜切口可以降低白内障术后的角膜散光,提高多焦点人工晶状体植入术后的远、近视力。

角膜移植免疫排斥反应相关泪液低分子量蛋白质分析

目的:利用蛋白芯片技术检测发生与未发生角膜移植排斥反应的大鼠泪液标志蛋白表达,筛选角膜移植排斥反应相关蛋白并分析其与角膜免疫排斥反应相关的可能机制。方法:行大鼠右眼同种异体穿透性角膜移植,I组从角膜旁中心取植片,缝线保留长度约1mm,术后给予抗生素滴眼液;Ⅱ组取角膜中心植片,缝线尽量剪短,术后给予环孢霉素A滴眼液;术后计算排斥反应系数。术后第7d采集泪液。弱阳离子交换芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术筛选穿透性角膜移植大鼠血清中表达的免疫排斥反应相关的低相对分子质量差异蛋白,结合生物信息学方法初步分析可能的标志蛋白。结果:术后第7d时Ⅰ组发生角膜移植排斥反应,Ⅱ组没有发生;两组中共有108个蛋白质被标记,其中有分类价值的标志蛋白质有11种,相对分类价值较高的有6种,蛋白质搜库结果提示相关蛋白可能是下调蛋白:Prohistogranin、胰高血糖素样肽1;上调蛋白:β-防御素2、细胞凋亡蛋白酶-3亚基、神经激肽A。结论:应用SELDI-TOF-MS技术获得大鼠角膜移植后泪液标志蛋白表达图谱的实验方法稳定可行,提示我们在角膜的免疫排斥反应的后续研究中考虑能量代谢、神经递质在角膜移植免疫排斥反应中的地位和作用。

转化生长因子β_1在大鼠房水中的药物浓度

背景:研究证实,转化生长因子β1滴眼液具有促进角膜损伤愈合的作用。目的:观察转化生长因子β1滴眼液表面应用后在房水中的药物浓度,验证其在预防和治疗角膜移植排斥反应中的作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验。