糖原合成酶激酶3β和核因子κB在抗体介导的慢性排斥反应移植肾组织中的表达和意义

目的:探讨糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、核因子κB(NF-κB)和相关炎症性细胞因子在抗体介导的移植肾慢性排斥反应(cABMR)患者肾组织中的表达情况,并分析其与肾间质纤维化/小管萎缩(IF/TA)的关系。方法:用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统半定量检测116例病理诊断符合ABMR的移植肾组织中GSK-3β、NF-κB p65、调节激活正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达,并分析其表达与发生ABMR的移植肾组织IF/TA的关系。以10例肾移植术前零点穿刺肾组织作为对照。结果:在抗体介导的慢性排斥反应肾组织中,GSK-3β、NF-κB p65、RANTES和MCP-1表达水平均较对照组明显增高(P均<0.001),且与IF/TA病理分级呈正相关(r分别为0.884、0.914、0.888和0.868,P<0.001),GSK-3β的表达量同NF-κB p65、RANTES和MCP-1表达亦呈正相关(r分别为0.812、0.804和0.788,P<0.001),随着纤维化程度的加重,患者血清肌酐也逐渐升高(r=0.898,P<0.001)。结论:在ABMR患者移植肾组织中,GSK-3β和NF-κB p65的表达异常增高同移植IF/TA、慢性移植肾失功的发生、发展有关。

一种改进的大鼠胎肝干细胞分离纯化方法

目的改进大鼠胎肝干细胞的分离纯化方法,提高肝脏干细胞分离的纯度和活力。方法采用剪碎酶消化法分离大鼠胎肝干细胞,差速离心结合选择性消化法进行进一步纯化,含10%优等胎牛血清的DMEM/F12培养液培养。利用免疫细胞化学方法分别检测P1和P10代肝干细胞表面标志物。结果分离的大鼠胎肝干细胞接种培养瓶24 h后开始贴壁,5 d后细胞体积增大,呈梭形或多边形。经1～2次差异性消化传代后,细胞呈集落样生长,边缘清晰且折光率强。免疫细胞化学检测示:P1代大鼠胎肝干细胞C-Kit、甲胎蛋白(AFP)抗原、OV6、细胞角蛋白(CK)19呈阳性表达,不表达Alb。P10代肝干细胞C-Kit、CK19、OV-6及CD34呈阳性表达。结论大鼠胎肝干细胞分离纯化、培养扩增及鉴定方法简单易行。

ox-LDL对血小板基质金属蛋白酶诱导剂释放的影响

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对血小板基质金属蛋白酶诱导剂(EMMPRIN,又名CD147)释放的影响。方法分别以终浓度25 mg/L、50 mg/L和100 mg/L ox-LDL,对照组(磷酸盐,PBS)和100 mg/L天然LDL体外刺激洗涤血小板,以流式细胞仪检测血小板上CD147、α颗粒膜糖蛋白(CD62P)的表达,酶联免疫吸附法检测血小板上清液中可溶性CD147(sCD147)含量,共聚焦显微镜、透射电子显微镜观察血小板形态改变及颗粒释放。同时,阻断LOX-1受体后,再以流式细胞仪检测ox-LDL(50 mg/L和100 mg/L)刺激的血小板CD147表达。结果 25 mg/L、50 mg/L和100 mg/L ox-LDL处理组血小板CD147相对平均荧光强度(rMFI)(1.01±0.06、1.18±0.07、1.24±0.08)均高于对照组(0.86±0.10,P<0.01)和天然LDL组(0.89±0.11,P<0.01)。LOX-1阻断后,ox-LDL(50 mg/L和100 mg/L)处理组血小板CD147 rMFI(0.96±0.08、1.05±0.07)均下降(P<0.001)。ox-LDL处理后,血小板形态明显改变,并伴随颗粒释放。结论 ox-LDL通过与LOX-1结合诱导了血小板CD147的释放。

GSK-3β在移植肾肾组织的表达及其意义

目的:探讨糖原合成酶激酶在移植肾组织中的表达及其在慢性移植肾失功发病机制中的意义。方法:收集解放军第181医院2007年01月～2009年12月因蛋白尿或肌酐升高而行肾脏穿刺术的肾移植患者的肾穿标本。其中病理诊断符合慢性移植肾失功的病例有28例,包括男21例,平均年龄(45±10)岁,女7例,平均年龄(42±9)岁,肾穿时间为肾移植术后1年～9年,平均3.5年,血清肌酐(206±122)μmol/L。利用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统(imagepro-plus6.0)半定量检测28例慢性移植肾失功患者移植肾组织中糖原合成酶激酶的表达情况,计算GSK表达的平均面积和平均累计光密度,分析GSK-3β表达水平与移植肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化/小管萎缩程度之间的关系。5例正常肾组织作为对照组。结果:慢性移植肾失功患者肾组织中GSK-3β的表达比正常肾组织明显增加,并随肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化、小管萎缩程度而递增。结论:糖原合成酶激酶的高表达与移植肾肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化/小管萎缩存在正相关关系。

核因子-κB在慢性移植肾失功中作用机制的研究

目的探讨核因子-κB(NF-κB)及其下游信号分子调节激活正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在慢性移植肾失功(CRAD)患者移植肾组织的表达及与肾间质纤维化/小管萎缩(IF/TA)和尿蛋白的关系。方法采用免疫组化技术及计算机真彩色图像分析软件系统半定量检测103例病理诊断符合CRAD的移植肾组织NF-κB p65、RANTES及MCP-1表达量,并分析其表达与CRAD移植肾组织IF/TA、血肌酐及24h尿蛋白的关系。10例移植前零点穿刺正常肾组织作为对照组,入院行血清肌酐及24h尿蛋白定量检测。结果移植肾组织NF-κB p65表达较正常肾组织明显升高[(22.63±6.37)%、(38.59±5.36)%、(53.36±8.77)%比(7.83±0.57)%,P<0.01];其表达水平同炎症细胞趋化因子RANTES、MCP-1及IF/TA病理分级呈正相关(r分别为0.736、0.857和0.904,P均<0.01);NF-κB p65的表达与炎症细胞浸润亦具有正相关性(r=0.851,P<0.01);血肌酐及24h尿蛋白定量的变化随IF/TA病理分级增加而升高(r=0.902和0.870,P均<0.01)。结论在CRAD患者移植肾组织中,NF-κB p65表达明显增强,NF-κB p65及炎症趋化因子的高表达与移植肾间质炎症细胞浸润、肾间质纤维化及慢性移植肾失功等表现密切相关,提示它们可能参与了慢性移植肾功能不全的发生和发展。

运动康复对老年稳定性冠心病患者危险因素的长期随访研究

目的观察运动康复对老年稳定性冠心病患者心血管危险因素的影响。方法本研究为前瞻性研究,将符合入选标准的70例老年稳定性冠心病患者随机分为运动康复组35例和对照组35例。2组常规治疗,运动康复组进行3个月的门诊康复及9个月的家庭康复。分别于干预前、干预3、6、9个月和1年时对患者危险因素进行评估,包括体质量指数(BMI)、收缩压、舒张压、TC、TG、LDL-C、HDL-C、糖化血红蛋白(HbA1c)及吸烟状态。结果与干预前比较,运动康复组在干预3、6、9个月和1年时BMI、收缩压、HbA1c、吸烟率和HDL-C均改善(P<0.05,P<0.01)。其中BMI分别下降(0.90±0.80)kg/m2、(1.01±0.86)kg/m2、(0.73±1.10)kg/m2、(0.85±1.27)kg/m2;收缩压分别下降[(7.06±13.03)mm Hg,1 mm Hg=0.133kPa]、(5.17±6.90)mm Hg、(4.48±7.89)mm Hg、(4.22±10.89)mm Hg,HbA1c分别下降(1.57±0.92)%、(1.59±0.84)%、(1.40±1.00)%、(1.33±0.79)%,吸烟率分别下降20.69%、20.69%、24.14%、20.69%;HDL-C分别升高(0.17±0.23)mmol/L、(0.22±0.28)mmol/L、(0.13±0.23)mmol/L、(0.11±0.20)mmol/L。结论运动康复可使老年稳定性冠心病患者的部分心血管危险因素持续改善,综合的心脏康复方案可能带来更多获益。

D-氨基半乳糖与脂多糖对小鼠肝脏损伤后再生修复的影响

目的观察部分肝切除联合D-氨基半乳糖(D-GaIN)、脂多糖对肝损伤后再生修复的影响。方法 40只BALB/c雄性小鼠随机均分为2组。D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组:腹腔注射D-GaIN(500 mg/kg),1 h后注射脂多糖(50μg/kg);肝脏部分切除组:生理盐水代替D-GaIN和脂多糖,同样方法注射;两组小鼠在第2次腹腔注射24 h后行肝脏1/3切除。观察两组小鼠术后肝脏体质量比值、肝再生率、肝细胞损伤、增殖与肝卵圆干细胞增生。结果肝脏部分切除组术后第9天肝大体结构基本恢复正常,肝再生率为(22.26±105.93)%,而D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组第14天肝质量较术前仍偏小,肝再生率为(9.49±32.55)%,P<0.001。D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组术后肝窦和中央静脉充血,库普弗细胞增多;肝脏部分切除组术后第7天有明显肝细胞增殖,D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组肝细胞增殖甚少。D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组肝脏术后第3天开始出现肝卵圆干细胞增生,从汇管区开始向肝小叶内延伸以修复损伤。结论 D-GaIN联合脂多糖可部分抑制肝部分切除后小鼠成熟肝细胞增殖,D-GaIN/脂多糖/肝部分切除可诱导肝卵圆干细胞增生。

同型半胱氨酸对巨噬细胞CD147表达的影响及瑞舒伐他汀的干预作用

目的探讨同型半胱氨酸对U-937巨噬细胞CD147表达的影响及瑞舒伐他汀的干预作用。方法在佛波酯诱导分化的人U-937巨噬细胞中加入0、50、100及500μmol/L的同型半胱氨酸孵育48 h;半定量RT-PCR检测CD147 mRNA的表达,Western blot检测巨噬细胞CD147蛋白的表达。不同浓度的瑞舒伐他汀和500μmol/L同型半胱氨酸共同干预U-937巨噬细胞,48 h后半定量RT-PCR及Western blot检测CD147受抑制情况,细胞免疫荧光试验检测CD147表达。结果半定量RT-PCR和Western blot结果显示,随同型半胱氨酸浓度增加,U-937巨噬细胞CD147 mRNA及蛋白的表达逐渐升高,具有剂量依赖性。不同浓度瑞舒伐他汀和500μmol/L同型半胱氨酸共同处理U-937巨噬细胞,随瑞舒伐他汀浓度增加,U-937巨噬细胞CD147 mRNA及蛋白的表达逐渐受抑制,呈一定剂量依赖性。细胞免疫荧光证实同型半胱氨酸促进CD147表达增加,而瑞舒伐他汀能抑制其表达。结论同型半胱氨酸能上调U-937巨噬细胞CD147的表达,瑞舒伐他汀呈浓度依赖性抑制同型半胱氨酸诱导CD147表达。

MCP-1、RANTES在慢性移植肾失功肾组织中的表达及意义

目的 探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和RANTES在慢性移植肾失功（CRAD）患者移植肾组织中的表达及意义.方法 用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统半定量检测32例慢性移植肾失功患者移植肾组织中MCP-1和RANTES的表达,分析与移植肾间质纤维化/小管萎缩程度及炎性细胞浸润程度之间的关系.结果 慢性移植肾失功患者的移植肾组织中MCP-1和RANTES的表达较正常肾组织中明显增加,并随着间质纤维化/小管萎缩及炎症细胞浸润程度而递增.结论 移植肾组织中MCP-1和RANTES的表达升高与慢性移植肾失功的进展有关.

广西城市社区居民高尿酸血症流行病学调查及其与慢性肾脏病的关系

目的 通过社区人群筛查了解广西城市原住民中高尿酸血症（HUA）的患病率及其与慢性肾脏病（CKD）的关系,并探讨影响HUA肾损害的风险因素.方法 选择桂林市城区原住居民集中的象山社区,对18～75岁居民（n=6 273）采取横断面进行筛查.收集空腹血及晨尿进行血糖、肾功能、血脂、胰岛素和尿蛋白等检测,同时进行问卷调查和体格检查.结果 社区居民中HUA总患病率为23.5%,其中男性HUA患病率显著高于女性（28.4%对19.7%,P＜0.01）.社区居民中CKD患病率为21.6%,其中男性居民CKD患病率较女性显著增高（24.9%对19.0%,P＜0.01）.在HUA人群中CKD检出率显著高于尿酸正常人群（30.4%对18.9%,P＜0.01）.男性HUA人群CKD检出率显著高于同性别正常血尿酸人群（34.3%对21.2%,P＜0.01）,也显著高于女性HUA人群（25.9%,P＜0.01）.Logistic回归分析发现,CKD仅与收缩压、低密度脂蛋白胆固醇和血糖水平独立相关（P＜0.01）.结论 广西城市社区居民中HUA患病率显著增加,与CKD患病率增高有关,且血尿酸轻度增高即增加CKD患病率.

桂林市象山区居民尿酸流行病学调查

目的探讨社区居民高尿酸血症(HUA)和高血压的发病情况及其相关关系,为有效防治尿酸相关心血管疾病提供依据。方法对6273例18～75岁的桂林市象山区城市社区居民进行横断面调查,收集空腹血及晨尿进行血糖、肾功能、胰岛素和高敏C反应蛋白等检测,同时进行问卷调查和体格检查。结果在社区居民中HUA的平均患病率为23.5%,男性为28.4%,高于女性的19.7%(P<0.01)。平均高血压患病率为27.8%,其中HUA组为37.8%,正常尿酸组为24.7%(P<0.01)。高尿酸者高血压风险约为尿酸正常者的1.8倍,其中在30岁以下组约为3.3倍,在30～60岁组约为2.1倍,60岁以上组差异不明显。在第3和第4四分位尿酸水平组,高血压患病率明显增高,尤其以收缩压增高为主。用血肌酐、年龄和性别校正后,血尿酸水平与收缩压、舒张压和高敏C反应蛋白等因素有关(P<0.01)。结论高尿酸居民高血压的患病率明显增高,尤其是在年轻人群中,主要影响收缩压。尿酸可能通过微炎症反应介导高血压的发生。

Solitaire支架动脉取栓术治疗急性心源性脑栓塞疗效观察

目的探讨Solitaire支架动脉取栓术治疗急性心源性脑栓塞的有效性及安全性。方法收集自2012年10月至2016年3月解放军第一八〇医院神经内科采用Solitaire支架动脉取栓术或联合rt—PA静脉溶栓治疗的急性心源性脑栓塞（CCE）患者共24例，并选取同期收治的单纯进行rt-PA静脉溶栓的CCE患者作为对照组（共21例）。对比2组患者近期疗效、远期临床预后及并发症发生率、死亡率等情况，同时进一步对比2组中后循环梗死患者临床预后。结果研究组患者发病至rt—PA用药中位时间为3．17h，低于对照组的4．00h，差异有统计学意SL（P〈0．05）。研究组使用rt-PA剂量与对照组均为50mg，差异无统计学意义（P〉0．05）。研究组出院时NIHSS评分、GCS评分改善情况及3个月、6个月后mRS评分均显著优于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。而2组患者症状性颅内出血、高灌注脑病、脑疝的发生率、死亡率差异无统计学意义（P〉0．05）。研究组后循环梗死患者3月后mRS评分为2．00分，显著低于对照组的3．00分，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Solitaire支架动脉取栓术治疗与单纯静脉溶栓治疗比较可以显著改善急性CCE患者近期神经功能及远期临床预后，且不增加患者并发症的发生率及死亡率，安全有效：后循环梗死患者亦可以从动脉取栓术中获益。

模式识别受体基因多态性与曲霉易感性研究进展

曲霉在自然界中广泛分布，能感染人类和动物的曲霉有烟曲霉、黄曲霉、土曲霉和黑曲霉等。曲霉孢子直径只有2-3μm，可在空气中传播，并进入终末气道。

慢性摄入尼古丁加重大鼠脑缺血再灌注损伤性脑水肿的初步研究

目的 观察尼古丁慢性摄入加重大鼠脑缺血再灌注损伤性脑水肿的程度,并初步探讨其作用机制.方法 10周龄雄性Sprague Dawley（SD）大鼠90只,按数字表法随机分为对照组（45只）和尼古丁组（45只）,分别给予生理盐水[0.5 ml/（kg·d）]、尼古丁[3 mg/（kg·d）]皮下注射,1次/d.6周后将2组大鼠制作成大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,分5个时间点（每组每个时间点9只）观察脑水肿的发生情况和程度.取对照组和尼古丁组脑微血管内皮细胞株bEnd.3进行培养,分为3组：对照组、尼古丁组（1μmol/L）、尼古丁＋α-金环蛇毒素组（尼古丁1 μmol/L,α-金环蛇毒素0.1μmol/L）,检测3组细胞通透性的变化及细胞中水通道蛋白1（aquaporin 1,AQP1）的表达变化.结果 与对照组比较,尼古丁组再灌注3.0h后脑水肿的程度明显加重,再灌注12.0 h时脑组织含水量最大[2组分别为（86.53±2.26）％和（90.47±1.94）％],差异有统计学意义（P＜0.01）.对脑微血管内皮细胞株bEnd.3的检测发现,尼古丁组细胞通透性[（143±11）％]明显高于对照组[（100±13）％],差异有统计学意义（P＜0.01）;尼古丁＋α-金环蛇毒素组通透性[（114±15）％]较尼古丁组明显改善,差异有统计学意义（P＜0.05）.细胞内AQP1蛋白的表达,尼古丁组（1.49±0.19）明显高于对照组（1.04±0.12）,差异有统计学意义（P＜0.01）;尼古丁＋α-金环蛇毒素组通透性（1.20 ±0.14）较尼古丁组有所减少,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 在尼古丁刺激下,脑微血管内皮细胞通透性的增加是脑水肿加重的原因.内皮细胞中α7尼古丁乙酰胆碱受体（α7nAchR）和AQP1蛋白参与了其中的发生过程.

RANTES和单核细胞趋化蛋白-1在慢性排斥反应移植肾组织中的表达及意义

目的探讨慢性排斥反应时移植肾组织中调节激活正常T淋巴细胞表达和分泌的细胞因子（RANTES）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和Ⅳ型胶原的表达，并分析三者与移植肾慢性排斥反应肾间质纤维化／小管萎缩（IF／TA）的相关性。方法选择40例病理诊断符合慢性排斥反应的受者，采用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统半定量检测移植肾组织中RANTES和MCP-1的表达，并分析其表达与发生慢性排斥反应时移植肾组织IF／TA的关系。以10例正常肾组织作为对照。结果发生慢性排斥反应时，移植肾组织中RANTES、MCP-1和Ⅳ型胶原的表达均较正常肾组织明显增加（P〈0．01），并随着IF／TA病理分级的增加而呈递增的趋势，RANTES和MCP-1的表达与IF／TA病理分级呈正相关（相关系数分别为0．940和0．954，P〈0．01）。结论在发生慢性排斥反应患者的移植肾组织中，RANTES和MCP-1的高表达与移植肾纤维化和慢性移植肾功能丧失的发展密切相关。

脑梗死并发代谢综合征患者社区干预临床效果评价

目的探讨脑梗死并发代谢综合征(MS)患者社区干预临床效果,为脑梗死并发MS患者的治疗提供依据。方法选择本院门诊2010年10月至2012年10月脑梗死并发MS患者116例,根据患者依从性的不同分组为完全依从组60例和部分依从组56例,进行风险评估后给予社区综合干预治疗,并进行比较。结果与干预前比较,规范化路径干预治疗2年后,完全依从组患者健康知识知晓率(86.7%)、干预计划落实率(88.3%)、三低饮食率(91.7%)均明显提高,急症发生率(3.3%)明显下降,空腹血糖[(6.1±1.3)mmol/L]、餐后2 h血糖[(7.1±2.0)mmol/L]、糖化血红蛋白(6.1%±0.9%)、甘油三酯[(1.4±0.02)mmol/L]、纤维蛋白原[(3.0±0.02)g/L]、血小板最大聚集率(47.3%±0.59%)均明显下降,HDL-C水平[(1.80±0.40)mmol/L]升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与部分依从组干预后比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组干预前颈动脉斑块积分值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。完全依从组12、24个月复诊时颈动脉斑块积分低于初诊时,差异有统计学意义(P<0.05),并低于部分依从组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应高度重视脑梗死合并MS患者社区干预,以减少急性脑血管事件的发生率和病死率。

不同血液净化模式对高胆红素血症的治疗效果比较

目的 非生物人工肝主要通过血浆置换和胆红素吸附达到暂时改善肝功能的目的,本研究旨在了解不同血液净化模式对高胆红素血症的治疗效果.方法 对6例高胆红素血症患者进行了选择性血浆置换（SPE）、胆红素吸附（PA）及选择性血浆置换加胆红素吸附（SPE＋PA）治疗,比较治疗前后总胆红素（TB）和直接胆红素（DB）的下降幅度和清除率.结果 三种治疗模式治疗前后比较,TB和DB水平均显著下降（P＜0.05）.TB和DB的清除率以（SPE＋ PA）组最大,分别为（37.8±3.9）％和（38.0±3.4）％,与SPE组比为显著差异（P＜0.001）.PA组与（SPE＋ PA）组比较,TB的清除率均无显著差异（P＞0.05）.结论 单纯使用国产胆红素吸附柱（BS330-Ⅱ）治疗可有效降低患者的胆红素水平,联合SPE＋ PA治疗,疗效增加不显著.