医院科研公共平台的信息智能化全流程管理探讨与实践

医院科研公共平台,以往人们通常称之为“中心实验室”,属于医院科研基础设施,其主要作用是提供基础医学和临床医学研究的场地与设备、发展医学科学技术,同时也是学术交流、培养高层次医学人才的重要基地[1]。新形势下,科研水平已成为评价医院综合实力的重要指标,因此各医院普遍加大了科研实验室硬件建设的投入力度,科研公共平台的建设有了飞跃式的发展[2-4]。然而,多年来国内医院的科研实验室在建设、运行和管理上仍沿袭过去传统体制下的模式,与当前快速上升的医学科研发展水平不相适应,不能有效满足现代医学科研的发展需求。主要表现为国内大多数医院科研实验室无法成为公用、共享、全天24小时开放的实验平台;或设备利用率低下,仪器闲置,重复购置;或实验室安全问题频出,如危险化学品管理、水电安全、生物安全、实验室废弃物管理等问题;科研数据的真实与可靠问题,无实验室使用记录却有实验数据产生、实验数据保存不规范、科研数据作假、图片误用等。

速咳宁抑菌、抗感染的实验研究

对以章亮厚主任医师治疗慢性支气管炎的经验方制作而成的颗粒剂速咳宁进行抑菌、抗感染实验研究，实验结果表明：速咳宁可抑制金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌、甲型链球菌的生长及对抗炎性鼠耳的肿胀。与对照组庆大霉素比较，Ｐ＜０．０５；可减少患者痰液上皮脱落细胞与炎症细胞的数量及降低痰液ＤＮＡ含量、提高ＳＩｇＡ水平，与对照组蛇胆川贝液比较，Ｐ＜０．０１。为临床应用及作用机理的探讨提供了客观依据。

中药敷料组方创伤生物学评价的实验研究

目的:评价研制野战密闭性功能敷料所筛选中药组方的生物学功效。方法:30只SD大鼠创伤后分别涂中药敷料、云南白药和生理盐水,观察其痛行为反应、伤口的感染率、组织修复和体重变化。结果:在痛行为反应、组织修复伤口感染率、体重变化方面,中药组明显优于云南白药组及生理盐水组。结论:中药敷料组方具有促进伤口愈合、创伤康复的效果。

Notch信号通路抑制剂DAPT改善酒精诱导的斑马鱼神经元分化障碍

目的探讨Notch信号通路在胎儿酒精谱系障碍(FASD)斑马鱼模型的神经元分化及及感觉-运动能力中的作用。方法首先,将斑马鱼胚胎分为二甲基亚砜(DMSO)组和50μmol/L氮-[氮-(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰]-S-苯基甘氨酸丁酯(DAPT,Notch信号通路抑制剂)处理组,检测比较两组斑马鱼的死亡率、孵化率以及畸形率;比较两组斑马鱼的身体长度;利用原位杂交和qRT-PCR技术检测两组神经干/前体细胞标志物sox2、神经前体细胞分化因子neurogenin1、神经元标志物huc的表达;检测两组在无刺激、强光、震动刺激情况下的行为学表现。其次,将斑马鱼胚胎分为DMSO组、1.5%酒精处理组、DAPT处理组、酒精和DAPT联合处理组,利用原位杂交和qRT-PCR技术检测各组sox2、neurogenin1、huc的表达,检测Notch信号通路相关基因(Notch)信号受体notch1a,促进神经发育的靶基因her8a及Notch胞内活性片段(NICD)的mRNA表达水平;检测各组在无刺激、强光、震动刺激情况下的行为学表现。结果50μmol/L DAPT处理斑马鱼胚胎后,受精后1 d(1 dpf)胚胎死亡率(P<0.01)显著增加,2 dpf孵化率显著降低(P<0.01),3 dpf畸形率(P<0.001)显著增加,15 dpf斑马鱼体长显著缩短(P<0.05);斑马鱼胚胎sox2表达水平显著降低(P<0.01),neurogenin1(P<0.05)和huc mRNA(P<0.01)表达水平显著增加;在无刺激、强光、震动刺激情况下,DAPT处理组的斑马鱼运动距离均显著缩短(P<0.001),运动速度均显著降低(P<0.05)。单独使用1.5%酒精处理斑马鱼胚胎后,notch1a、her8a及NICD的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);1.5%酒精联合DAPT处理斑马鱼胚胎后,较酒精单独处理组,neurogenin1和huc mRNA表达水平显著增加,sox2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01),在强光刺激下的运动距离显著变长,运动速度显著变快(P<0.05)。结论酒精上调斑马鱼胚胎Notch信号、抑制神经元分化并降低感觉-运动能力,而抑制Notch信号通路可改善斑马鱼胚胎神经元分化及感觉-运动能力。

湿热环境下密闭性功能敷料对伤口细菌学定量的影响

目的 研究湿热环境下密闭性功能敷料对创伤伤口的抗菌作用。方法 模拟湿热环境 ,以猪创伤为实验模型 ,常规处理为对照组 ,密闭性功能敷料为实验组 ,观察伤口细菌数量的变化和伤口大体情况。结果 实验组的细菌数量增长显著低于对照组 (P <0 .0 1) ,且热暴露后 (损伤后 2 4h)仍未达到感染阈值。伤口外观显示对照组损伤后 2 4h出现感染征象。

大鼠心脏移植急性排斥反应动物模型的建立

目的为探索器官移植后急性排斥反应的一种快速可靠的诊断方法。方法先暴露和游离受体的吻合段血管,再获取供心以缩短移植心脏冷缺血时间;保留供者的心脏及右上肺,将其胸主动脉与受者的腹主动脉间断端侧吻合;开放血流时,先开放远心端再间断开放近心端,同时按摩心脏至心脏搏动规律、有力,其色泽恢复红润,右上肺亦充盈良好。结果A组(n=20)成功16只,动脉吻合口出血2只、心脏复跳失败1只、吻合口狭窄1只;B组(n=20)成功17只,2只死于吻合口出血,1只死于吻合口狭窄。A组手术成功率为80%,B组为85%(P>0.05)。结论(1)先暴露并游离好受体血管吻合段,再获取供心,可以缩短移植心冷缺血时间。(2)边灌注边获取的方法利于快速而又完整的获取供心。(3)在切取和植入的过程中一定要注意低温保护。(4)利用腹主动脉段进行移植,使手术方便易行。左心做功的大鼠腹部心脏移植模型简单、安全、实用,因其左心参与循环而使血流动力学更接近生理状态,是进行心脏移植及血流动力学研究的较理想模型。

HLA配型在心脏移植中的意义

目的 :探讨人类白细胞抗 (HLA)配型在心脏移植中的临床意义。方法 :采用聚合酶链反应 -序列特异性引物 (PCR -SSP)技术进行供受者外周血HLA基因分型 ,采用单克隆抗体法进行HLA -Ⅰ类抗原分型。结果 :供受体之间HLA有 6个抗原相合 :A2 4 (9) ,Bw6 ,DR1 5(2 ) ,DRw51 ,DRw52和DQ6(1 ) ,有 5个抗原相合 :A30 (2 9) ,B54(2 2 ) ,Bw4 ,DR1 7(3)和DQ2 ,术后患者心功能正常 ,术后 1 60d无排斥反应。结论 :良好的HLA配型对减少心脏移植排斥反应 ,提高移植物存活率具有重要意义。

显微外科技术建立兔异体原位肾脏移植模型

目的建立并发症少、成活率高的兔原位肾脏移植模型。方法健康成年新西兰白兔24只,随机分为两组,每组12只,Ⅰ组为对照组,术中行右肾动、静脉暂时夹闭做为对照;Ⅱ组为异体原位肾移植组,采取配对方式将甲兔左肾切取并经过4 ℃H-CA 液灌洗后利用显微外科技术将甲、乙两兔动、静脉及输尿管端端吻合。结果吻合口无血栓形成及狭窄,12只接受异体原位肾移植的兔子存活率为91.7%(11/12)。结论此模型具有并发症少、存活率高的特点,并且稳定、可靠、实用。

疣体组织移植制作尖锐湿疣动物模型初探

目的应用皮片移植法将人体组织尖锐湿疣皮片直接移植于裸鼠体表,以期形成相应动物模型。方法修剪从人体获得的尖锐湿疣组织,切成直径5mm左右的皮片,在裸鼠体表打洞,然后植入。基底部隔日注射人及小鼠血管内皮生长因子。连续观察移植组织的生长情况。结果部分裸鼠体表尖锐湿疣组织存活,周围新生血管形成,植入成功。平均生存期限(41±9.3)d。结论疣体组织移植可作为制备尖锐湿疣动物模型的一条可能途径。

大鼠心脏移植急性排斥反应过程中穿孔素及颗粒蛋白酶B mRNA的表达

目的通过动态监测大鼠异体异位心脏移植外周血（PB）中穿孔素（pedorin，P）和颗粒酶B（granryme B，OB）的表达水平，判断其与急性排斥反应的相关性。方法实验组（n=16），供受体分别为Wistar和SD大鼠；对照组（n=17），供受体均为SD大鼠，两组术后均未接受抗排斥治疗。于术前及术后不同的时间采血，同时进行活组织病理检查，应用荧光定量RT-PCR（FQ-PCR）的方法，测定P及GBmRNA的表达水平，并与同期的病理检查结果相对照。结果实验组于移植后24hP及GBmRNA的表达上调，术后72h的表达明显增加（P〈0．001），术后3—5d达峰值，7—11d维持高水平，其变化早于病理改变；而对照组P及GBmRNA的表达及病理改变，在同期的观察过程中均没有明显的变化（P〉0．05）。结论同种异体大鼠心脏移植的急性排斥反应过程中，外周血淋巴细胞的穿孔素与颗粒酶BmRNA的表达水平术后呈现递增性，早于病理改变，可以作为急性排斥反应的监测指标。

小鼠滑膜成纤维细胞的原代培养

目的利用C57BL／6小鼠探索出一种改良的小鼠滑膜成纤维细胞（SF）的原代培养方法，以方便类风湿关节炎（RA）关于滑膜炎的研究。方法收集小鼠髋关节周围滑膜，去除内含的“蛋黄样”物，将滑膜移入含0．5%Ⅳ型胶原酶的EP管中，剪碎；置入37℃摇箱中振荡消化60min，然后在涡轮振荡仪上振荡1．5min，常规培养。结果细胞培养1周左右。进行第一次传代；大约在培养10d后滑膜巨噬细胞的数量达到最高峰，然后逐渐减少；在第3次传代（15～20d）后，滑膜巨噬细胞基本消失。用Vimentin标记的细胞免疫荧光化学染色显示SF细胞纯度超过95％；用Vimentin和CD90．2标记的流式细胞术显示其纯度达到95％，用CD54标记其纯度大约为80％。结论利用C57BL／6小鼠探索出一种改良的小鼠SF的原代培养方法是一种简便易行的小鼠SF的原代培幕方法。

脐血来源NK细胞对肝肿瘤生长抑制作用

目的 培养脐血来源NK细胞,通过细胞和动物水平验证其用于肝癌治疗的安全性和有效性。方法 NK细胞体外诱导培养,观察培养过程细胞形态、细胞总数、增殖倍数,流式检测其中CD3~-CD56~+细胞的比例,细胞毒性检测验证NK细胞对癌细胞的杀伤活性;建立肝癌裸鼠皮下荷瘤模型,采用瘤内与静脉方式注射NK细胞,密切观察不同时间段实验组和对照组裸鼠移植瘤大小、体积、质量以及裸鼠存活状态。荷瘤40天后取肿瘤组织进行分析。通过流式分析、HE染色和免疫荧光检测NK细胞移植在裸鼠体内第37天含量,分析NK细胞在裸鼠体内残留情况。结果 脐血分离单个核细胞经体外诱导培养的NK细胞能保持典型的NK细胞表型特征,细胞活性好、增殖能力强、纯度高,对多种癌细胞系均具有良好的杀伤作用。与对照组相比,NK细胞注射组均能抑制肝肿瘤生长。NK细胞移植35天后,尾静脉组肿瘤大小显著下降(P<0.05)。同时NK细胞在体内无明显残留,表明NK细胞小鼠体内移植无致瘤性。结论 本研究制备的脐血NK细胞符合临床研究需求,可作为肝癌患者临床治疗的替代方案,为下一步开展临床研究提供前期基础。

速咳宁治疗慢性支气管炎的临床研究

本文报道以服速咳宁为治疗组、蛇胆川贝液为对照组治疗７２例慢支发作期患者，结果治疗组临床控制９例（２５％），显效１８例（５０％），好转６例（１６．６６％），总有效率９１．６６％，显著优于对照组（总有效率７５％），Ｐ＜０．０１。观察研究中发现速咳宁能显著降低痰液ＤＮＡ含量和提高ＳＩｇＡ的含量，对以细菌、病毒等感染和局部免疫功能低下为主要病变的慢支发作期的治疗具有较强的针对性。

Aβ_(1-42)和thiorphan联合颅内给药建立恒河猴AD模型工作记忆无改变

目的观察Aβ_(1-42)和thiorphan联合颅内给药后恒河猴工作记忆是否发生改变。方法Wisconsin训练猴笼内用延迟反应的方法测试恒河猴的工作记忆,比较猴子在给药前后的10 s、30 s、60 s的正确应答率。结果给药前后恒河猴10 s、30 s、60 s的正确应答率无改变。结论Aβ_(1-42)和thiorphan联合颅内给药建立恒河猴AD模型,50 d内尚未观察到恒河猴工作记忆发生改变。

自体骨屑颏部填充动物模型的动态观察

目的设计及建立自体骨屑颏部填充的动物模型，寻求一种创伤小、简便易行的隆颏手术方法，为临床应用提供实验资料和理论依据。方法同窝10个月龄杂种犬4只，自下颌角区切口，分离咬肌，暴露下颌角，切取部分下颌角区下颌骨，用电动打磨机磨碎成骨屑，移植至下颏部下颌骨处，建立动物模型。术后观察动物进食活动，并于术后2、4、8、12周取材，行电镜检查，观察骨屑与颏部下颌骨融合的情况。结果手术后动物进食活动仍正常，术后2、4、8、12周，电镜检查显示，自体骨屑通过吸收、血管及其周围组织长入，新生骨从颏部下颌骨逐渐向内生长替代移植骨屑，骨屑完成支架作用。结论自体骨脂颏部填充，损伤小，与颏部下颌骨融合良好，术后塑形好，成骨愈合期加快，塑形稳定，无排斥，不影响实验动物的进食活动。