生殖细胞胞膜脂质对精子生成的影响

精子生成是一个复杂的细胞分化过程,其由精原干细胞经过一系列变化形成精子。在这个过程中细胞膜结构发生重构,细胞膜通透性和流动性发生阶段特异性改变,这其中离不开生殖细胞胞膜脂质的改变。脂质是生殖细胞胞膜的重要组成成分,它的含量和成分在精子生成过程中动态变化,若胞膜脂质代谢异常,可引起精子生成障碍,导致男性不育。生殖细胞胞膜脂质主要由胆固醇、磷脂和糖脂组成,它们分别在精子生成的不同阶段发挥细胞黏附、信号转导等作用,研究生殖细胞胞膜脂质对精子生成的影响有助于加深对精子生成机制的理解,为男性不育症的诊治开拓新的思路。

精子染色体异常与男性不育及辅助生殖技术妊娠结局的关系

精子染色体异常包括精子染色体数目异常、结构异常和DNA损伤。精子染色体异常与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局密切相关,精子染色体异常影响辅助生殖技术(ART)的受精率、胚胎质量、妊娠率及子代的健康。精子染色体检查是评价精子质量的重要指标。本文就精子染色体非整倍体、Y染色体微缺失和精子DNA损伤与男性不育及ART相关性的研究做一综述,为临床男性因素性不育患者的诊断及遗传咨询提供理论依据。

雄激素在辅助生殖技术超促排卵时的应用

在辅助生殖技术超促排卵治疗时,如何提高低反应者的卵巢反应性一直是困扰临床医生的难题。动物研究证实,雄激素可提高卵泡颗粒细胞对卵泡刺激素的敏感性,增加胰岛素样生长因子-1的分泌,从而促进卵泡生长发育。近年对于接受辅助生殖技术治疗的卵巢低反应者,通过短期经皮给睾酮或长期口服给脱氢表雄酮,可增加获卵数,改善胚胎质量,提高妊娠率,但也有研究认为此类患者应用雄激素无效。现对雄激素在辅助生殖技术超促排卵时卵巢低反应者的应用进展进行综述。

卵母细胞纺锤体观察及在辅助生殖领域应用与展望

在细胞分裂过程中,纺锤体对卵母细胞染色体的运动、分配和极体的排出非常关键。以往研究动物卵母细胞纺锤体的方法都是侵袭性的,对于人卵母细胞不能广泛应用。近来,活卵母细胞纺锤体的观察方法已基本成熟,通过这些观察方法可以非侵袭性地观测研究卵母细胞中纺锤体的形态和动力学特征。在人类辅助生殖领域有广阔的应用前景。

SGO与ASRM关于遗传性妇科癌症风险增高女性生殖与激素建议的解读

对与妇科癌症相关的遗传性癌症综合征进行干预时具有一定的独特性,因为可能会破坏女性正常的激素分泌和生育力。对于这类患者,需要综合考虑癌症防治、生育力保存和激素管理等,以进行个性化的治疗。为给此类女性提供更好的咨询和治疗,美国妇科肿瘤学会(SGO)和生殖医学会(ASRM)通过对相关循证医学证据的总结分析,制定了《遗传性妇科癌症风险增高女性生殖与激素建议的循证医学评论》。为更好地了解和规范对遗传性妇科癌症风险增高女性的管理,现就该《评论》进行解读。

辅助生殖技术中的几个热点问题

近年来辅助生殖技术(assisted reproductive technologies,ART)领域的学术交流日趋活跃,技术水平不断提高,其主要标志是:①临床妊娠率大幅攀升,一些好的生殖医学中心妊娠率已稳定在50%以上;②一些新技术不断完善,如囊胚培养,辅助孵化,玻璃化冷冻,未成熟卵培养,某些疾病的移植前诊断等;③培养系统的改进等.本文拟就当前人们关心的几个热点问题作一简单回顾.

人卵子玻璃化冷冻原因及其技术在辅助生殖中的应用

目的探讨人卵子玻璃化冷冻的原因及其技术在辅助生殖中的可行性和临床应用价值。方法回顾性研究2008年1月~2018年10月在南方医科大学南方医院生殖医学中心行卵子玻璃化冷冻的26例患者共27个取卵周期,分析卵子玻璃化冷冻原因、卵子解冻后受精情况及临床妊娠结局。结果26例患者27个取卵周期共冷冻卵子274枚,卵子冷冻原因主要包括取卵日男方精子数量及质量差无可用精子、男方处于各种疾病急性期不适宜取精及男方因各种原因未能到场取精等。共19个周期行卵子解冻,该19个周期共冻存卵子217枚,解冻后存活176枚,卵子解冻存活率81.11%,其中131枚卵子解冻后行卵胞浆内单精子注射,正常受精98枚,正常受精率74.81%;卵裂88枚,卵裂率89.80%(88/98);共形成可移植胚胎53枚,其中优质胚胎36枚,优质胚胎率36.73%(36/98)。15个移植周期共移植胚胎27枚,临床妊娠率为53.33%(8/15),活产率为33.33%(5/15)。随患者年龄增加,与<35岁组相比,≥35岁组患者卵子复苏率(82.76%vs74.42%,P=0.211)、临床妊娠率(77.78%vs16.67%,P=0.041)及活产率(55.56%vs0,P=0.044)均呈下降的趋势。结论卵子玻璃化冷冻可作为不孕夫妻取卵当日因男方因素不能提供精子患者的临床补救措施;卵子玻璃化冻融后的受精率、临床妊娠率结局良好,卵子复苏率与年龄存在相关性,女性≤35岁者冻卵能够获得满意的临床妊娠结局。

遗传性线粒体疾病的生殖细胞基因治疗方法

线粒体是真核细胞内的重要细胞器，是能量产生与转换的场所，并参与脂肪酸的合成及少量蛋白质的合成。每个细胞有成千上万个线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）拷贝，任何mtDNA缺失或发生点突变，均会造成编码线粒体氧化代谢过程必需的酶或载体发生障碍，最终导致能量代谢障碍和产生复杂的临床症状。其临床表现主要取决于线粒体对供能的依赖程度，主要累及的器官为：脑、心脏、骨骼肌、胰脏和肾脏[1]。

两种不同剂量来曲唑对多囊卵巢综合征不孕患者促排卵的对照研究

目的探讨两种不同剂量的来曲唑(LE)对多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症妇女的促排卵效果。方法76例拟行宫腔内人工授精(IUI),或指导性生活的无排卵的PCOS不孕症妇女,分为2组,于月经周期第3～7天,每日口服来曲唑2.5mg(1组,36例),或来曲唑5.0mg(2组,40例),停药3d(周期第10天)监测卵泡发育。当优势卵泡最大径线≥14mm时,用尿LH板监测,当出现LH峰时,静脉抽血查卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和睾酮(T),肌注HCG10000U诱发排卵。比较两组患者的多种临床指标。结果2组的排卵率、刺激卵泡的天数、优势卵泡的最大径线及子宫内膜厚度与1组无差异(P>0.05),但其优势卵泡的个数及妊娠率显著高于1组(P<0.05),两组第3天及LH峰日的生殖激素水平无差异(P>0.05)。结论2组优势卵泡的个数及妊娠率显著高于1组(P<0.05)。

ICSI中不同来源精子对卵母细胞受精、胚胎质量及发育潜能的影响

目的研究卵胞浆内单精子注射技术(ICSI)中不同来源精子对卵母细胞受精、胚胎质量及发育潜能的影响。方法回顾性分析我中心因单纯男性因素行ICSI助孕治疗的197例患者的临床资料,按不同精子来源分为射精组(n=102)、PESA组(n=68)、TESA组(n=27)3组,其中将射精组又分为严重少弱畸精子症组(n=67)和隐匿精子症组(n=35)。比较4组间受精率、优质胚胎率、新鲜胚胎移植周期的着床率及妊娠率,以及低质胚胎继续培养的优质囊胚形成率。结果少弱畸精子射精组、隐匿精子射精组、PESA组、TESA组的正常受精率分别为64.8%、62.1%、75.6%、61.6%,其中PESA组明显高于其它3组(P<0.05),4组的优质胚胎率、新鲜胚胎移植周期的着床率及妊娠率无明显差异(P>0.05)。4组间低质胚胎继续培养的优质囊胚形成率也无显著差异(P>0.05)。结论 PESA来源的精子ICSI中正常受精率较高,但在ICSI中不同来源精子对胚胎质量及发育潜能无显著影响。

男方HBV慢性感染对体外受精-胚胎移植治疗结局的影响

目的探讨男方乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响。方法以男方HBsAg阳性而女方HBsAg阴性的不孕症夫妻102对为研究组;双方均HBsAg阴性的不孕症夫妻204对为对照组,比较两组的累积胚胎评分(CES)、受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率、早期流产率、晚期流产率、分娩率和新生儿畸形率。结果102例男方HBsAg阳性组与204例男方HBsAg阴性组的累积胚胎评分(52.8±18.7对55.4±16.9)、受精率(66.9%对66.1%)、卵裂率(97.6%对97.2%)、优质胚胎率(34.0%对37.1%)、种植率(40.9%对34.6%)、临床妊娠率(56.9%对50%)、早期流产率(6.9%对5.9%)、晚期流产率(8.6%对4.9%)、分娩率(40.2%对43.6%)、新生儿畸形率(0对0),两组间无统计学差异(P>0.05)。结论男方慢性HBV感染不影响IVF-ET治疗的结局。

体外受精治疗中促性腺激素的剂量和卵巢反应性与临床结局的关系

目的探讨体外受精(IVF)治疗中使用不同促性腺激素(Gn)剂量及卵巢反应性与临床结局的关系。方法在接受IVF治疗、Gn用药时间≤15d的患者中,共551个取卵周期按Gn用量和获卵数进行分组,A组Gn≥3375IU,获卵数≥4个,390个周期;B组Gn≥3375IU,获卵数≤3个,64个周期;C组Gn≤3300IU及获卵数≤3个,97个周期。对3组的多个临床特征及治疗结局进行分析比较。结果A组的临床妊娠率和分娩率分别为38.8%和32.5%,B组为16.7%和10.4%,C组为27.3%和23.4%。A组卵泡数、获卵数、可移植胚胎数、血清E2峰值、临床妊娠率和分娩率均高于B、C组(P<0.05)。A、B组Gn用药剂量均较C组大(P<0.05),B组血清E2峰值、临床妊娠率和分娩率均低于C组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论对Gn用量较低而取卵数少的患者,增加Gn用量能提高临床妊娠率和分娩率,这部分患者应视为相对的卵巢低反应者或轻度卵巢储备功能低下;而增加Gn用量后仍不能增加获卵数者,为真正的卵巢低反应者或重度卵巢储备功能低下,临床预后不佳。

脑源性神经营养因子及其受体在人卵巢的表达与卵泡发育的关系

目的 :研究脑源性神经营养因子 (BDNF)及其受体———酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)在人卵巢中的表达。初步探讨其与卵泡发育的关系。方法 :取排卵前期人卵巢组织和来自体外受精 胚胎移植 (IVF ET)周期的取卵日卵泡液、人卵巢黄素化壁层颗粒细胞 (hMGLCs)、人卵巢黄素化卵丘颗粒细胞 (hCGLCs)、未受精卵母细胞或未成熟卵母细胞。用免疫组织化学SABC法研究BDNF在人卵巢组织中不同发育阶段卵泡的表达 ,酶联免疫吸附实验 (ELISA)方法检测BDNF在人卵泡液 ,hMGLCs和hCGLCs无血清培养上清液中的表达。用免疫组织化学SABC法研究TrkB在人卵巢组织不同发育阶段卵泡的表达 ,免疫细胞化学SABC法研究TrkB在hMGLCs,hCGLCs和未受精或未成熟卵母细胞的表达 ,Westernblotting方法检测TrkB在hMGLCs和hCGLCs的表达及其差异。结果 :人卵泡液中存在BDNF ,BDNF表达于初级卵泡和次级卵泡的颗粒细胞及窦状卵泡的卵丘颗粒细胞。TrkB表达于初级卵泡和次级卵泡的颗粒细胞、窦状细胞的卵丘颗粒细胞、壁层颗粒细胞及卵母细胞 ,壁层颗粒细胞表达量高于卵丘颗粒细胞。结论 :在人卵巢BDNF及其受体TrkB可能 (通过旁分泌和自分泌的方式 )参与颗粒细胞功能的完成和卵母细胞发育的调控。

40岁以上妇女行体外受精-胚胎移植治疗的结局分析

目的探究40岁以上高龄妇女行体外受精-胚胎移植（IVF/ICSI-ET）治疗的治疗结局。方法 2007年1月~2015年12月在南方医科大学南方医院生殖医学中心进行非赠卵IVF/ICSI-ET的≥40岁妇女的1050个起始周期的临床资料进行回顾性分析。按妇女年龄分为4组：40岁组（n=393）,41岁组（n=266）,42岁组（n=158）,43岁组（n=107）,44岁组（n=64）,≥45岁（45~51岁）组（n=62）,比较分析各组的临床特征和助孕结局。比较不同促排卵方案和不同移植胚胎数目的妊娠结局。结果共1032个取卵周期,750个移植周期,113个周期获得临床妊娠,临床妊娠率为17.7%,其中64个周期获得活产,活产率为8.5%。各组的临床妊娠率分别为23.4%、21.0%、13.1%、9.2%、5.6%和0%,胚胎着床率为11.2%、10.2%、6.3%、5.1%、2.3%和0%,各组的早期自然流产率分别为31.0%、35.9%、42.9%、42.9%和100%,各组的活产率分别为11.9%、11.8%、2.8%和3.9%。长方案、短方案、拮抗剂方案、促排卵方案的临床妊娠率分别为23.6%、10.2%、13.3%、2.3%。750个移植周期中,移植1个胚胎,临床妊娠率为3.8%,移植2个胚胎,为12.6%,移植3个胚胎,为23.0%。结论年龄大于40岁的患者临床妊娠率逐年显著下降,并且年龄≥44岁获活产的概率极低。对于≥40岁妇女即使无其他明显导致不孕的病因,应在知情告知后实施辅助生殖技术治疗,对于年龄≥44岁妇女,则寻求赠卵是更好的选择。

不同生精功能障碍无精子症患者行ICSI后胚胎发育潜能的研究

目的:分析不同生精功能障碍的无精子症患者行ICSI后其胚胎发育潜能。方法:149例患者分为生精功能正常组,轻度、中度和重度生精功能障碍组,采用经皮附睾精子抽吸术(PESA)或经皮睾丸精子抽吸术(TESA)抽取不同生精功能障碍患者的精子行ICSI,记录和分析胚胎的正常受精率、卵裂率、优良胚胎形成率以及妊娠率。结果:PESA与TESA组比较,正常受精率(%)为74.9±19.6 vs 66.3±22.7(P>0.05),卵裂率(%)为96.7±8.6 vs 92.8±19.8(P>0.05),优良胚胎率(%)为43.5±26.2 vs 35.0±29.4(P>0.05)以及妊娠率(%)为44.0 vs 52.0(P>0.05),均无统计学差异。生精功能障碍从正常组到重度组的正常受精率(%)变化依次为77.8±18.4、68.4±18.5、73.5±19.8、51.4±27.9,其中轻度生精功能障碍与正常生精组有差异(P<0.05),重度生精功能障碍组与其他各组有统计学差异(P<0.05);胚胎卵裂率(%)变化依次为96.7±9.2、96.5±15.0、93.9±12.1、93.7±11.1,各组无统计学差异;优良胚胎率(%)变化依次为47.1±25.8、40.3±27.6、36.2±23.1、15.0±24.6,重度生精障碍组与其他各组有统计学差异(P<0.05);妊娠率(%)依次为54.8%、50.0%、13.6%、10.0%,有统计学差异(P<0.05)。结论:采用PESA或TESA行ICSI在正常受精率,卵裂率,优良胚胎率以及妊娠率上较均无明显差异。随着患者生精障碍程度的加重,受精率、优良胚胎率以及妊娠率均显著下降,而卵裂率却无明显区别。

复方丹参滴丸用于超促排卵中内膜过薄初步探讨

目的探讨复方丹参滴丸对体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)超促排卵中子宫内膜过薄的治疗作用。方法收集接受IVF-ET治疗患者,IVF/ICSI治疗周期(未用复方丹参滴丸),绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日内膜<8mm未孕或取消移植者,3个月后行第2次IVF/ICSI周期(应用复方丹参滴丸)时,应用复方丹参滴丸治疗,总例数为46例,自身对照观察妊娠情况、子宫内膜厚度及子宫动脉血流变化情况。结果(1)应用复方丹参滴丸治疗周期临床妊娠9例,生化妊娠5例;(2)应用复方丹参滴丸周期子宫内膜厚度(8.7±1.2)mm显著高于未用复方丹参滴丸治疗周期(7.2±0.6)mm(P=0.000),子宫内膜厚度≥8mm40例,三线型内膜例数(33例)高于未用复方丹参滴丸周期(23例),但差异无显著性(P>0.05);(3)应用复方丹参滴丸治疗周期hCG日子宫动脉血流阻力指数(RI)(0.76±0.05)显著低于未用复方丹参滴丸周期(0.85±0.44)(P=0.000),子宫动脉搏动指数(PI)(1.84±0.85)显著低于未用复方丹参滴丸周期(2.06±0.84)(P=0.000)。结论复方丹参滴丸在IVF治疗中能使一部分患者妊娠,增加子宫内膜厚度,其机制可能是复方丹参滴丸降低子宫动脉血流阻力、增加子宫血流供应。

计算机辅助精液分析精子运动参数在体外受精中的应用

目的探讨计算机辅助精液分析(CASA)相关运动参数与行IVF治疗后正常受精率、卵裂率及优良胚胎率的关系。方法288例患者按受精情况分为正常受精率≥50%组,正常受精率<50%组;根据卵裂情况分为卵裂率≥90%组及卵裂率<90%组;根据优良胚胎形成情况分为优良胚胎形成率≥50%组,优良胚胎形成率<50%组,记录取卵前男方2次精液检查精子运动相关参数的均值,用t检验法确定各组间相关参数的均值是否存在统计学差异,从而判定与试管婴儿正常受精率、卵裂率及优良胚胎形成率相关的精子运动参数。结果正常受精率≥50%组VCL、VAP、ALH值明显高于正常受精率<50%组,差异具有统计学意义(P<0.05);卵裂率≥90%组VCL、VAP值明显高于卵裂率<90%组,差异具有统计学意义(P<0.05);优良胚胎形成率≥50%组与优良胚胎形成率<50%组间VCL、VSL、VAP、LIN、STR、WOB、ALH、BCF均无统计学差异(P>0.05)。结论正常受精率、卵裂率与精子运动能力有关;试管婴儿优良胚胎形成率的大小与精子运动参数无关。

来曲唑等4种促排卵药物用于宫腔内人工授精的疗效比较

目的:比较来曲唑等4种促排卵药物用于宫腔内人工授精的疗效。方法:回顾分析南方医院生殖医学中心2006年1月至2010年6月采用自然周期(NC)和来曲唑(LE)、氯米芬(CC)、尿促性素(HMG)、尿促卵泡素(u-FSH)4种促排卵药物用于夫精宫腔内人工受精(IUI),共565个周期的临床资料进行比较分析。结果:5组临床妊娠率分别为4.1%、13.4%、8.7%、16.1%、13.8%,促排卵各组妊娠率均高于自然周期组(P均<0.05)。各促排卵组之间,妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。LE组优势卵泡数、排卵数及绒促性素(HCG)日子宫内膜厚度与NC组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:促排卵治疗增加IUI妊娠率。LE促排卵作用温和,妊娠率与低剂量HMG和u-FSH方案相当,用于IUI促排卵安全有效。

卵泡液中TGFβ1和性激素水平的测定及临床意义

目的探讨控制性超排卵(COH)周期取卵(OPU)日卵泡液中转化生长因子β1(TGFβ1)及性激素的含量与卵母细胞成熟、受精和妊娠结局的关系。方法酶联免疫反应法测定90例COH周期OPU日卵泡液中TGFβ1和性激素的含量,卵泡液按相应卵母细胞的成熟度、受精情况和妊娠结局分组。结果成熟组卵泡液中TGFβ1、促黄体生成素(LH)和孕酮水平高于未成熟组[(2824.4±1414.4)pg/mlvs(2015.0±1191.7)pg/ml,(0.71±0.35)mIU/mlvs(0.54±0.21)mIU/ml,(3837.1±942.8)ng/mlvs(3188.1±617.4)ng/ml,均为P<0.05];受精组卵泡液中TGFβ1、LH和孕酮浓度均明显高于非受精组;妊娠组卵泡液中TGFβ1和LH浓度明显高于非妊娠组[(3547.4±1536.3)pg/mlvs(2169.2±1180.4)pg/ml,(0.74±0.25)mIU/mlvs(0.52±0.29)mIU/ml,均为P<0.05]。雌二醇浓度各组间无显著差异。结论COH周期OPU日卵泡液中适量的LH和孕酮促进卵母细胞的成熟;TGFβ1和LH浓度与相应卵泡的卵母细胞成熟及其后的受精和妊娠结局有关。