RAW264.7细胞在体外分化成破骨细胞的研究

目的:观察小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的一般生物学特征及在重组细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)诱导下形成成熟的有骨吸收能力的破骨细胞的可行性。方法:培养RAW264.7后,RANKL诱导RAW264.7,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察阳性多核细胞,电镜下扫描检测电镜骨吸收陷窝。结果:RANKL诱导RAW264.7第3天开始出现少数多核巨细胞,随时间的延长细胞数目逐渐增多,第7天多核巨细胞数达峰值,多核巨细胞TRAP染色阳性,电镜下可见骨片上的吸收陷窝呈圆形或椭圆形,边界轮廓清晰,陷窝底部纤维腐蚀吸收的纹路清晰可见,提示多核巨细胞具有骨吸收功能。结论:RAW264.7是一种较好的破骨前体细胞模型。RANKL诱导RAW264.7形成破骨细胞方法简便易行、可重复性好。

钴铬离子对成骨细胞细胞毒性及对其分泌骨保护素及其配体的影响

[目的]观察金属Co2+、Cr3+离子对小鼠成骨细胞(MC3T3E1)的细胞毒性以及在Co2+、Cr3+离子刺激下对成骨细胞分泌RANKL、OPG的影响。[方法]体外培养成骨细胞。MTT法检测细胞活力。ELISA法对培养上清液RANKL、OPG浓度进行检测。[结果]MTT显示与对照组相比,钴铬离子使成骨细胞的细胞活力明显下降。成骨细胞暴露在钴铬离子下,与对照组相比,24 h、48 h后:OPG的分泌分别增长32.1%、17.8%(P<0.05);RANKL的分泌量分别是对照组的61.6倍、13.8倍(P<0.05);RANKL/OPG比率分别升高51.4倍、12.3倍。[结论]金属离子对成骨细胞有细胞毒性,可刺激成骨细胞释放RANKL、OPG,并上调RANKL/OPG的比值。

NF-κB抑制剂PDTC抑制UHMWPE磨损颗粒诱导产生破骨细胞的研究

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对高分子质量聚乙烯(UHMWPE)磨损颗粒诱导的假体周围组织破骨细胞分化成熟的影响。方法:昆明小鼠24只,分别构建颅骨模型,随机分成3组。阳性对照组模型内注入UHMWPE颗粒悬液,腹腔注射生理盐水;实验组模型内注入UHMWPE颗粒悬液,腹腔注射PDTC;阴性对照组模型内注入生理盐水,腹腔注射PDTC;14d后处死动物,免疫组织化学抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)特异性染色检测小鼠颅骨中破骨细胞的数量。结果:阳性对照组、实验组、阴性对照组破骨细胞计数分别为(12.8500±3.5484)个、(7.2000±2.6897)个和(3.7250±1.4617)个,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:PDTC能够抑制UHMWPE颗粒诱导的小鼠颅骨模型中破骨细胞的分化成熟,对假体无菌性松动有一定的防治作用。

早期康复治疗对于股骨骨折术后患者免疫球蛋白影响的观察研究

目的:探讨股骨骨折术后,早期康复锻炼对人体免疫球蛋白指标的影响。方法:收治股骨干骨折患者322例,行切开复位内固定。随机分为实验组和对照组。前者采取早期运动康复,后者行简单术后指导,无针对性康复治疗,以卧床休息为主。所有患者均在手术后2周测定免疫球蛋白指标。结果:实验组患者的血清IgG较对照组差异有显著性(P<0.01),IgM和IgA组间差异无显著性,但IgM测定值在女性中差异存在显著性(P<0.05)。结论:早期合理有效的运动康复治疗可以改善患者的免疫功能,减少感染的发生率,促进骨折术后恢复。

镁硅玉人工髋关节假体周围骨溶解与诱导型一氧化氮合酶、过氧亚硝基阴离子的关系

[目的]观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和过氧亚硝基阴离子(ONOO-)在假体周围各区的表达和分布变化,各区iNOS和ONOO-表达与骨溶解程度之间的关系。[方法]临床选取6例镁硅玉人工全髋关节翻修术,手术中按Delee-Charnley髋臼分区法和Gruen股骨分区法,取出松动假体周围各区的假体-骨间界膜,免疫组化法检测iNOS和ONOO-体内生成标志物硝基酪氨酸(NT)的表达,同时以术前X线片,区分假体周围非骨溶解区和骨溶解区。分析并比较iNOS和NT在各个分区中的阳性表达,与骨溶解程度的关系。[结果]髋臼侧Ⅲ区的iNOS阳性细胞率高于Ⅰ、Ⅱ区,股骨侧1、2、6、7区染色阳性细胞率高于3、4、5区(P<0·05);髋臼侧Ⅲ区的NT阳性细胞率明显高于Ⅰ、Ⅱ区,股骨侧阳性细胞率由高到低依次为1、7区,2区,6、4、3、5区(P<0·05);骨溶解区界膜组的iNOS和NT阳性细胞率均明显高于非溶骨区界膜组和OA滑膜组(P<0·01)。[结论]假体周围iNOS和ONOO-的表达具有一定规律性,并与骨溶解程度密切相关。iNOS和ONOO-的异常表达可能是磨损颗粒造成界面骨重建受阻和骨溶解的关键环节之一。

早期系统康复对老年股骨近端骨折的影响

目的评价综合康复治疗对老年股骨近端骨折患者术后疗效的影响。方法 90例采用手术治疗的75岁以上老年股骨近端骨折患者,排除病理性骨折、双侧股骨骨折或以前对侧股骨骨折、痴呆、认知障碍。根据术后有无系统的康复治疗分为康复组46例、对照组44例。康复组术后采取早期系统康复治疗和训练,对照组术后常规康复治疗。比较2组疗效及并发症发生率。结果术后随访6个月,康复组术后并发症发生率为16%,明显少于对照组(36%)(P<0.05);康复组优良率为89%,高于对照组(68%)(P<0.05)。结论手术治疗老年股骨近端骨折能获得可靠的固定,系统的康复训练是保证疗效的重要措施,有助于加快患者术后功能康复,提高生活质量。

骨折术后运动康复安全评定的几点体会

骨科学以运动系统疾病为对象,功能康复是骨科疾病治疗的最终目的。骨科治疗与康复是不可分割的整体。但骨科治疗与康复往往未能很好地结合,探索将两个学科有机地结合起来的安全运动康复评定的几点体会,制定出合理的运动处方,为较大限度地提高骨折疾病的功能疗效。

影响老年髋部骨折手术风险的相关因素分析

目的探讨影响老年髋部骨折手术治疗效果的相关因素。方法选取广东医学院附属惠东县人民医院及南昌大学第一附属医院2011年3月至2014年8月收治的139例65岁以上髋部骨折手术治疗患者的临床资料,根据患者术后6个月随访Harris髋部功能评价分为优良组和(可+差)组,采用单因素χ2检验及多因素logistics回归分析,探讨影响老年髋部骨折手术治疗效果的危险因素。结果单因素分析显示,影响患者手术后6个月髋部功能恢复的单因素主要有年龄、骨折部位、骨折分型、受伤至手术时间、伤前ASA分级、伤前ADL评分、手术方式;多因素分析显示,年龄(OR=2.048)、骨折部位(OR=3.096)、骨折分型(OR=4.028)、受伤至手术时间(OR=5.174)、伤前ADL评分(OR=3.560)、手术方式(OR=3.928)为影响术后6个月髋部功能恢复的相关因素。结论老年髋部骨折患者手术后功能恢复情况受到多种因素的影响,应根据患者的实际情况进行术前预防,及时处理相关危险因素。

不同强度恒磁场协同顺铂促进U2骨肉瘤细胞凋亡的分子机制

[目的]探讨不同强度恒磁场促进顺铂诱导的U2骨肉瘤细胞(U2-OS)细胞凋亡及p53、bcl-2、c-myc基因表达变化的情况。[方法]分别使用1mT、10mT、100mT恒磁场和加入3.0μg/ml顺铂的细胞培养液共同培养U2-OS细胞24h。采用四甲基氮唑蓝比色法(MTT法)、流式细胞术、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测恒磁场和顺铂联合对U2骨肉瘤细胞体外增殖、凋亡及相关基因表达。[结果]不同强度恒磁场能促进顺铂对人U2-OS细胞的抑制作用,10Gs场强下其抑制率、凋亡率最高;凋亡率达37.66%,而p53 mRNA表达最强,bcl-2、c-myc mRNA表达最弱。[结论]不同强度恒磁场协同顺铂通过诱导细胞内p53、bcl-2、c-myc基因表达的变化是其抗肿瘤的机制之一,10Gs场强下协同顺铂的抗肿瘤作用最强。

低应力环境对儿童坏死股骨头修复过程的影响

[目的]观察低应力环境下儿童坏死股骨头修复过程的变化,探讨低应力环境对Perthes病的影响。[方法]用髋关节多功能外固定支架进行髋关节支撑,减轻股骨头负重,同时保持下肢的外展内旋以增加髋臼对股骨头的包容,允许髋关节在矢状面上的部分屈伸功能活动,达到患髋的低应力环境。得到随访、资料完整病例28例(32髋),分析手术前后影像学特征的变化。[结果]髋关节支撑使关节间隙增宽,高密度坏死影在3个月内逐渐缩小,股骨头影渐变得饱满,头骺高度增加,而骺核碎裂累及骺板者,发现股骨头大颈粗、髋关节半脱位。[结论]儿童坏死股骨头在低应力环境下的修复表现为头骺高度及头臼的协调性增加,坏死高密度骺核区缩小,股骨头顶部的沟槽不同程度的修复,股骨头也渐变得饱满。治疗的预后与Perthes病Catterall分期有直接的关系,CatteralⅡl、Ⅲ期则疗效较好,Ⅳ期则疗效不明显,特别是头骺塌陷累及骺板者则日后往往发生头大颈粗的扁平髋畸形,甚至并发半脱位。

血管内皮生长因子在磨损颗粒诱导骨溶解中的作用研究

目的运用小鼠植骨气囊模型,观察局部注射血管内皮生长因子(VEGF)及VEGF抑制剂bevacizumab对磨损颗粒诱导骨溶解的影响,进一步探讨VEGF在人工关节无菌性松动中的作用。方法将40只小鼠按随机数字表法分成空白对照组、颗粒组、VEGF刺激组、VEGF抑制组,每组10只。在小鼠背部皮下注射无菌空气形成气囊,继而将近交系小鼠(10只)颅骨片植入气囊。在颗粒组、VEGF刺激组、VEGF抑制组小鼠气囊内注入磨损颗粒,空白对照组则注入PBS。气囊植骨后隔天分别在VEGF刺激组和VEGF抑制组小鼠气囊内注入重组人血管内皮生长因子(rh-VEGF)和bevacizumab进行干扰,颗粒组和空白对照组则注入生理盐水。植骨2周后取囊壁和植入颅骨组织进行HE染色检测炎症反应情况及骨片吸收情况;采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞的分化成熟情况;取组织匀浆液应用ELISA方法检测炎性细胞因子IL-1β、TNF-α浓度;qRT-PCR进一步检测炎性细胞因子IL-1β、TNF-αmRNA表达水平。结果磨损颗粒诱导囊壁产生明显炎症反应及骨溶解。颗粒组囊壁厚度、细胞密度及TNF-α、IL-1β等炎性因子表达均较空白对照组明显增加(均P<0.05),局部注射VEGF进一步促进磨损颗粒诱导囊壁产生炎症反应及骨溶解,而bevacizumab则使囊壁炎症反应及骨溶解受到了明显抑制。结论磨损颗粒在体内可以诱导VEGF的表达,而VEGF抑制剂可抑制其诱导的炎症反应及骨溶解。

椎体骨密度与椎体生物力学的关系

目的探讨椎体骨密度(BMD)与其生物力学的关系.方法取5具女性和3具男性福尔马林浸泡的胸腰段脊柱标本(T8～L5),X线摄片无明显病理异常,双能X线吸收骨密度仪(DEXA)测定椎体骨密度(BMD).将标本游离成单个椎体,去除椎间盘及附件等.共选择60个椎体,按骨密度分对照组(正常)、轻中度和重度骨质疏松组,即A组、B组和C组.用材料试验机轴向加载,压缩椎体高度25%,制造椎体压缩骨折,确定椎体的初始压缩强度和刚度.结果对照组、轻中度和重度骨质疏松组平均骨密度分别为(1.098±0.147)、(0.650±0.137)和(0.393±0.060)g/cm2;3组间的压缩强度分别为(6.775±1.952)、(3.450±0.909)和(2.395±0.697)KN;刚度分别为(2.216±0.897)、(1.391±0.461)和(0.942±0.206)KN/mm.BMD与椎体压缩强度和刚度呈正相关;3组间的BMD、最大抗压力和刚度均存在显著性差异(P<0.01).结论椎体BMD与椎体的生物力学性质有较明显的相关关系,对骨质疏松的早期诊断和预测椎体压缩性骨折危险性有一定的参考意义.

静磁场作用下金属离子对成骨细胞的生物学影响

目的:探讨静磁场(SMF)作用下金属离子对成骨细胞的毒性影响,寻找防治假体周围骨溶解的理论依据。方法:将CoCl2粉末与CrCl3粉末溶于无菌注射用水配制成CoCl2溶液和CrCl3溶液,将Co2+、Cr3+分别与小鼠颅骨成骨细胞(MC3T3-E1)在不同的磁场强度下共培养。将细胞随机分为对照组及3个实验组,各实验组分别放入1、10和100mT的磁场中,培养12、24和48h。倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态特征。扫描电镜检测成骨细胞表面超微结构。流式细胞术检测细胞凋亡情况。酶联免疫吸附测定(ELISA)法对培养上清液碱性磷酸酶(ALP)含量进行检测。结果:静磁场作用24h后的成骨细胞呈现更加成熟的形态学特征,不同强度静磁场加载组的成骨细胞细凋亡率除1mT组在12和24h与对照组比较差异无统计学意义外,其他各组不同时段凋亡率均小于对照组。100mT组ALP活性明显高于对照组。结论:静磁场作用下Co2+、Cr3+金属离子对成骨细胞的毒性作用会明显减低,为磁场疗法防治假体周围骨溶解提供了实验依据。

HoffmannⅡ外固定支架结合有限切开内固定治疗胫腓骨粉碎性骨折的体会

目的探讨HoffmannⅡ外固定支架结合有限切开内固定在高能量损伤的胫腓骨粉碎性骨折治疗中的应用及其效果。方法对2003年8月～2007年1月收治的88例高能量损伤性胫腓骨粉碎骨折患者，使用HoffmannⅡ外固定支架结合有限切开内固定治疗；对合并关节内骨折的病例首先强调关节面的解剖复位，腓骨骨折强调解剖复位坚强内固定，便于维持肢体力线。结果经过4～20个月（平均13．8个月）随访，88例骨折全部愈合，平均愈合时间3．8个月。82例患者膝、踝关节功能正常，行走正常；3例膝关节伸约5°、屈约70°，3例踝关节背伸约5°、跖屈约10°。踝关节参照Helfet评定标准、膝关节参照Lysholm评分标准，优良率为93．2％。6例钉道渗出稍多。结论HoffmannⅡ外固定支架结合有限切开内固定是治疗高能量损伤性胫腓骨粉碎骨折的一种理想选择。

静磁场作用下金属离子对成骨细胞的毒性

背景:体内体外实验研究证明,静磁场具有促进成骨细胞分化及骨形成的作用。目的:观察静磁场作用下金属离子对成骨细胞毒性的影响。方法:将CoCl2粉末与CrCl3粉末溶于无菌注射用水配制成CoCl2溶液和CrCl3溶液,将金属离子Co2+、Cr3+分别与小鼠颅骨成骨细胞(MC3T3-E1)在不同的磁场强度(1,10,100mT)下共培养。实验分4组:设Co2++Cr3+组(对照组)和Co2++Cr3+分别+1,10,100mT组。结果与结论:恒磁场作用下的成骨细胞呈现更加成熟的形态学特征,Co2+、Cr3+金属离子对成骨细胞MC3T3的毒性明显降低;同时G2M(分裂期)分布比例明显增加,细胞停滞在G0G1(休眠期)的比率明显减少;与对照组相比,不同场强磁场加载后,成骨细胞碱性磷酸酶活性明显增强(P<0.05)。提示一定强度的静磁场可拮抗Co2+、Cr3+金属离子对成骨细胞的毒性作用。

胫骨平台骨折治疗的研究进展

胫骨平台骨折是一种常见的关节内骨折，常为高能量暴力所致。若处理不当，易出现膝关节不稳定，严重者还可合并半月板或韧带损伤，引起膝关节功能严重障碍，晚期发生膝关节退行性变。随着现代骨科的发展以及对胫骨平台骨折研究的不断深入，治疗方法在逐步改进和完善，治疗概念也不断更新。本文就近年来胫骨平台骨折治疗的新进展作如下综述。

关节周围骨折手术入路探索的哲学思考

关节周围骨折多属于高能量损伤,临床处理相当困难,术后疗效差,现运用科学认识的规律,以康复理念为指导探索新的手术入路,并阐述新的手术入路与功能康复的辩证关系。

陈旧性胸腰椎骨折相关因素的探讨

胸腰椎骨折是脊柱骨折中最常见的类型，随着临床医生对胸腰椎骨折生物力学的进一步认识及脊柱内固定器械的迅速发展和广泛应用，多数胸腰椎骨折病人获得了正确及时的处理；远期因陈旧性骨折来就诊的人数减少。骨折因未及时治疗或治疗不当导致僵硬的后凸畸形，进而导致脊柱不稳、局部疼痛、畸形和神经功能障碍。这时多需手术治疗，但是手术难度大、并发症多、术式多样化及选择困难，手术效果不如新鲜骨折满意。本文对其发生原因、生物力学、手术适应症、手术策略和疗效评估作一综述。

静磁场对成骨细胞和骨组织影响的研究进展

磁治疗的基础和临床应用研究越来越受到关注。作为一种基本磁场,静磁场无需外部电源,对组织无电、热刺激,具有体积小、便于长期局部应用等优点。该文从静磁场对骨生长因子、成骨细胞增殖和分化、成骨细胞外基质及体内骨组织影响等方面作一综述,并阐述静磁场影响骨组织的可能作用机制。