干扰素γ抑制IL-13对成纤维细胞的纤维化作用

目的:研究干扰素γ(IFN-γ)抑制白细胞介素13(IL-13)对成纤维细胞纤维化作用的影响。方法:将成纤维细胞分为实验组和空白对照组,实验组加入IFN-γ(4×105U/L)和IL-13(100μg/L),共同作用24、48和72 h后,分别用羟脯氨酸法、RT-PCR和Western blotting检测成纤维细胞分泌胶原蛋白、I型胶原α1(Col 1A1)mR-NA表达和I型胶原蛋白的表达水平。另外对比空白对照组、IFN-γ组、IL-13组和IFN-γ+IL-13组72 h后Col1A1mRNA表达和I型胶原蛋白的表达水平。结果:MTT结果表明IFN-γ浓度增加到4×105U/L后可显著抑制成纤维细胞的增殖(P<0.01)。羟脯氨酸法检测显示48 h和72 h实验组成纤维细胞分泌的胶原蛋白含量显著低于空白对照组(P<0.05);RT-PCR分析结果揭示48 h和72 h实验组的Col1A1 mRNA表达水平显著低于空白对照组(P<0.05);Western blotting检测也进一步证实了48 h和72 h实验组成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的水平显著低于空白对照组。另外各因素组对比结果显示,72 h后IFN-γ组Col1A1 mRNA和蛋白的表达水平显著低于空白对照组(P<0.05),IL-13组显著高于空白对照组(P<0.05),而IFN-γ+IL-13组显著低于显著低于其它组(P<0.01)。结论:IFN-γ可抑制IL-13对成纤维细胞的纤维化作用。

白细胞介素13诱导Dami细胞STAT6磷酸化及上调GPⅡb表达

目的研究重组人白细胞介素13(rhIL-13)诱导巨核细胞白血病细胞株Dami细胞STAT6(signal transducers and activators of transcription 6)磷酸化及对Dami细胞GPⅡb表达的影响。方法RT-PCR检测Dami细胞IL-13Rα1 mRNA、IL-4RαmRNA和GPⅡb mRNA;Western blot检测Dami细胞磷酸化STAT6蛋白表达;流式细胞仪检测Dami细胞GPⅡb蛋白表达。结果Dami细胞表达IL-13 Rα1 mRNA;Dami细胞表达IL-4RαmRNA;IL-13作用Dami细胞2 h,STAT6磷酸化;IL-13组Dami细胞GPⅡb表达高于空白对照组(P<0.05)。结论IL-13诱导Dami细胞STAT6磷酸化并上调Dami细胞GPⅡb表达。