环境温度变化对大鼠肺组织病理损伤的观察

目的探讨环境温度变化时大鼠肺组织的病理损伤及规律。方法将9～15周龄雄性SD大鼠84只按随机数字表法分为常温对照组(20℃,21只)和温度骤变组[骤升温至37℃组(21只)、骤降温至4℃组(21只)和骤降温至-12℃组(21只)],每组均观察1、4、8、12、24、48和168h7个时间点,每个时间点3只大鼠。分别于各时间点处死动物,切取左侧肺脏上叶,经4%多聚甲醛液固定24h、石蜡包埋和切片,常规HE染色观察肺组织病理学变化。结果温度骤变组大鼠肺组织均出现不同程度的损伤,主要表现在肺泡壁毛细血管扩张充血、出血、细支气管黏膜上皮坏死、炎细胞浸润等,在骤升温至37℃组最严重。各组出现损伤最严重的时间不同,骤升温至37℃组在12h损伤最严重,而骤降温至4℃组和骤降温至-12℃组均在24h损伤最明显。结论环境温度变化可引起肺组织损伤,出现肺泡壁毛细血管扩张充血、出血、细支气管黏膜上皮坏死、炎症细胞浸润等病理变化。

CXCL2、HIF-1α在前列腺癌组织中的表达及意义

目的探讨CXCL2和HIF-1α在前列腺癌(prostatic cancer,PC)组织中的表达,分析其与前列腺癌临床病理特征的关系。方法对112例前列腺标本[PC(PC组)76例,前列腺上皮内瘤(prostatic intraepithelial neoplasia,PIN;PIN组)15例,良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH;BPH组)21例]行免疫组化SP法检测CX-CL2和HIF-1α的表达。结果 PC组、PIN组CXCL2、HIF-1α阳性表达率均显著高于BPH组,差异均有统计学意义(均P<0.01);PC组CXCL2、HIF-1α阳性表达率显著高于PIN组,差异有统计学意义(P<0.01)。高分化组CXCL2、HIF-1α阳性表达率显著低于中分化组,差异有统计学意义(P<0.05);高分化组、中分化组CXCL2、HIF-1α阳性表达率均显著低于低分化组,差异有统计学意义(均P<0.01)。A期组、B期组CXCL2阳性表达率均显著低于C期组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),A期组、B期组、C期组CXCL2阳性表达率均显著低于D期组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。A期组、B期组、C期组HIF-1α阳性表达率均显著低于D期组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),A期组HIF-1α阳性表达率显著低于B期组、C期组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),B期组HIF-1α阳性表达率显著低于C期组,差异有统计学意义(P<0.05)。PC转移组CXCL2、HIF-1α阳性表达率均显著高于PC无转移组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。PC中CXCL2表达与HIF-1α表达呈正相关(r=0.422,P<0.01)。结论 CXCL2、HIF-1α在PC组织中呈高表达。CXCL2、HIF-1α表达与前列腺癌病理分级、临床分期、淋巴结转移等有关。但CXCL2和HIF-1α在PC发生、发展中的作用机制还有待进一步的研究。

四氯化碳诱导性肝纤维化大鼠肝组织白细胞介素4表达的研究

目的通过观察四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的白细胞介素4(IL-4)在肝组织中的表达情况,探讨肝纤维化机制。方法建立(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化动物模型。19只Wistar大鼠分为对照组4只和肝纤维化组15只(肝纤维化组按照CCl4的作用时间又分为2、4、6、8周组)。对各组大鼠肝组织进行苏木精-伊红染色和SP法免疫组织化学染色,观察肝组织病理变化及IL-4的表达情况。结果免疫组织化学染色显示,IL-4在正常肝脏组织几乎没有表达,肝纤维化组注射CCl4诱导后,大鼠肝组织中IL-4的表达强度较对照组明显增强,主要分布在肝组织纤维化增生的汇管区。IL-4表达随CCl4作用时间延长而增强,4、6周后变化尤其明显。结论IL-4可能在肝纤维化过程中发挥着重要作用。

辐射对小鼠骨髓多能造血祖细胞的慢性损伤

目的:通过测定辐射后小鼠骨髓内多能造血祖细胞相关指标,探索电离辐射对多能造血祖细胞(MPPs)的慢性损伤及可能机制。方法:将16只C57BL/6成年小鼠随机分为正常对照组和照射组,每组8只小鼠,照射组小鼠经6 Gy X-射线全身照射。通过流式细胞术检测照射后2个月小鼠骨髓内多能造血祖细胞比例、细胞凋亡及增殖情况。采用Mitotracker Red探针和DCFDA探针结合流式细胞术分别检测各细胞群的线粒体活性及活性氧(ROS)水平,并分析骨髓内多能造血祖细胞的老化状态。结果:辐射能降低小鼠骨髓多能造血祖细胞的比例,6 Gy X-射线全身辐射后,小鼠骨髓内MPP1、MPP3和MPP4比例和数量显著减少(P<0.05)。辐射后骨髓多能造血祖细胞克隆形成能力显著降低(P<0.05),骨髓内MPP1和MPP4细胞群的凋亡细胞比例显著升高(P<0.05)。与对照组比较,骨髓MPP2、MPP3和MPP4细胞群内线粒体活性均显著降低(P<0.05)。辐射能升高骨髓多能造血祖细胞ROS水平,骨髓中MPP2、MPP3和MPP4细胞群内ROS含量均显著升高(P<0.05)。照射后骨髓内MPP1、MPP3和MPP4细胞群的老化细胞比例较对照组显著升高(P<0.05)。结论:电离辐射可导致小鼠多能造血祖细胞慢性损伤,其损伤与细胞氧化应激、细胞凋亡和细胞老化密切相关。

白细胞介素13刺激成纤维细胞胶原基因转录和胶原蛋白的合成

目的:以成纤维细胞株3T3为实验对象,观察白细胞介素13对成纤维细胞株3T3胶原合成作用,探讨白细胞介素13对纤维化形成的作用机制。方法:实验于2005-03/2006-10在江西医学科学研究所江西省医学生物高技术重点实验室进行。实验材料:成纤维细胞株3T3细胞为江西省医学科学研究所江西省医学生物高技术重点实验室保存。白细胞介素13购自Peprotech公司。实验方法:①3T3细胞培养:3T3细胞常规培养在含体积分数为0.15胎牛血清、100U/mL青、链霉素的DMEM培养液中,置于37℃、含体积分数为0.05的CO2孵箱中培养,并分为实验组和对照组,两组细胞均用无血清DMEM培养12～16h,实验组加入100μg/L白细胞介素13,作用24,48,72h后进行以下实验。②应用Van Gieson胶原纤维特殊染色观察白细胞介素13作用下,3T3细胞体外合成胶原纤维情况。细胞培养上清液采用羟脯氨酸实验检测细胞分泌的总胶原蛋白含量。采用RT-PCR检测3T3细胞Ⅰ型胶原α1基因(COL1A1)mRNA的表达。采用Western blotting检测白细胞介素13作用后成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果:①Van Gieson胶原纤维特殊染色观察白细胞介素13对成纤维细胞体外合成胶原纤维的影响:有胶原纤维地方被Van Gieson液染成红色,细胞核则为灰黑色。显微镜下可见成纤维细胞呈放射状、编织状或旋涡状排列,细胞体呈梭形或不规则三角形,胞质向外伸出大小不等的突起,核为椭圆形,位于胞浆的中央,在白细胞介素13孵育的3T3细胞中可观察到较多的胶原纤维。②羟脯氨酸实验检测白细胞介素13对成纤维细胞分泌总胶原含量影响:白细胞介素13刺激3T3细胞分泌的总胶原含量24h后即明显增高,持续至72h(t=6.751,P<0.01),明显高于对照组(t=3.019,P<0.05)。③RT-PCR检测白细胞介素13作用下3T3细胞Ⅰ型胶原α1mRNA水平:在511bp(β-actin)和378bp处(COL1A1)均可见一明显条带。④Western blotting检测白细胞介素13作用下Ⅰ型胶原蛋白表达情况:白细胞介素13作用3T3细胞0,24,48,72h后,Ⅰ型胶原蛋白表达逐渐增强,与actin蛋白相比,差异显著(P<0.05)。结论:白细胞介素13可促进3T3细胞胶原基因的转录和胶原蛋白的合成,可能在纤维化疾病发病机制中发挥重要作用。

成纤维细胞胶原合成及细胞内STAT6蛋白磷酸化与白细胞介素13的促进作用

目的:观察重组白细胞介素13对成纤维细胞3T3的胶原合成作用,及其在3T3细胞胞内的信号转导途径,探讨白细胞介素13促纤维化的作用机制。方法:实验于2005-03/2006-03在江西医学科学研究所江西省医学生物高技术重点实验室进行。将3T3细胞分为实验组和对照组,在进行实验前,两组细胞均用无血清DMEM培养12～16h,实验组加重组白细胞介素13(100 μg/L),作用24,48,72h后,应用胶原纤维特殊染色观察白细胞介素13作用下3T3细胞体外合成胶原纤维情况;上清液用羟脯氨酸试验检测细胞分泌的总胶原含量;用逆转录-聚合酶链反应检测3T3细胞白细胞介素13受体的表达;用免疫印迹技术检测白细胞介素13作用0,1,2,4h后STAT6蛋白磷酸化情况,组间比较采用t检验。结果:①实验组细胞胶原纤维合成增加及上清液分泌总胶原含量高于对照组(P<0.05)。②逆转录-聚合酶链反应检测到3T3细胞表达白细胞介素13受体α1。③免疫印迹技术检测到白细胞介素13作用1,2,4h均有磷酸化STAT6蛋白表达,且白细胞介素13作用2h磷酸化STAT6蛋白表达最强,4h衰减。结论:白细胞介素13受体α1在3T3细胞上表达,重组白细胞介素13促进3T3细胞胶原合成和STAT6蛋白磷酸化,可能在纤维化发病机制中发挥重要作用。

酪氨酸激酶抑制剂A77 1726阻断IL-13对成纤维细胞的促胶原合成作用

目的:观察酪氨酸激酶抑制剂A771726对白细胞介素13(IL-13)促成纤维细胞胶原合成作用的影响。方法:MTT法观察不同浓度的A771726对成纤维细胞的增殖作用的影响。成纤维细胞分为实验组和实验对照组,实验对照组加入IL-13(100μg/L),实验组加入A771726(50μmol/L)和IL-13(100μg/L),作用24、48、72h后,羟脯氨酸(Hyp)检测A771726对IL-13促进成纤维细胞分泌胶原蛋白的影响,RT-PCR观察A771726对IL-13促进成纤维细胞I型胶原α1基因mRNA水平表达的影响,Western blot观察A771726对IL-13促进成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的影响。结果:A771726可抑制成纤维细胞的增殖。羟脯氨酸检测实验组48h组和72h组成纤维细胞分泌胶原蛋白的含量显著低于实验对照组(P<0.05),RT-PCR观察到实验组48h组和72h组成纤维细胞I型胶原α1基因(COL1A1)mRNA表达水平显著低于实验对照组(P<0.05),Western blot观察到实验组48h组和72h组成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的水平显著低于空白对照组(P<0.05)。结论:酪氨酸酶抑制剂A771726阻断IL-13对成纤维细胞的促胶原蛋白合成作用,阻断IL-13促成纤维细胞I型胶原α1基因mRNA水平和蛋白水平的表达。

氯化镧对烧伤大鼠胸腺iNOS表达及细胞凋亡的影响

用原位末端标记术、免疫组织化学术和体视学形态记量法观察稀土化合物氯化镧(LaCl3)对严重烧伤大鼠胸腺诱导性一氧化氮合酶(iN-OS)表达及胸腺细胞凋亡的影响。结果显示,LaCl3能减轻烧伤后大鼠胸腺应激性萎缩的程度,降低病理性胸腺细胞凋亡率,其行为主要是通过部分抑制iNOS在烧伤后大鼠胸腺组织中的表达,表明LaCl3对严重烧伤后机体免疫功能具有一定的保护作用,可作为一种有效的烧伤后免疫功能调节和保护剂。

IL-13对成纤维细胞IL-13受体和IL-4受体表达的影响

目的研究IL-13对人肺成纤维细胞株HFL-1和人肝星状细胞株LX-2 IL-13受体和IL-4受体表达的调节作用。方法 RT-PCR法检测HFL-1细胞株和LX-2细胞株IL-13Rα1、IL-4R和IL-13Rα2 mRNA的表达;凝胶电泳定量软件Image Tool2.0对RT-PCR电泳条带进行光密度分析;ELISA法检测HFL-1细胞株和LX-2细胞株分泌可溶型IL-13Rα2以及检测细胞裂解液总IL-13Rα1、IL-4R和IL-13Rα2含量。结果 IL-13(5～100 ng/ml)对HFL-1细胞株和LX-2细胞株表达IL-13Rα1和IL-4R无影响;IL-13为5、10、20 ng/ml时能诱导HFL-1细胞株表达IL-13Rα2并呈现剂量依赖,当IL-13为50 ng/ml时,对HFL-1细胞株IL-13Rα2表达的诱导作用明显减弱,IL-13 100 ng/ml组没有检测到HFL-1细胞株IL-13Rα2的表达;LX-2细胞株IL-13Rα2表达缺失且IL-13不能诱导LX-2细胞株表达IL-13Rα2。结论 IL-13不能上调人肺成纤维细胞株HFL-1和人肝星状细胞株LX-2表达功能型受体IL-13Rα1和IL-4R,表明IL-13不能通过上调IL-13Rα1和IL-4R表达量来放大自身作用;一定浓度的IL-13能诱导人肺成纤维细胞株HFL-1表达抑制型受体IL-13Rα2,表明IL-13的自身负调控。

白细胞介素13对瘢痕成纤维细胞增生及转录因子c-fos表达的影响

目的研究白细胞介素13(interleukin 13,IL-13)对瘢痕成纤维细胞增生和转录因子c-fos表达的影响。方法 MTT比色法检测IL-13不同质量浓度(50、100、150、200μg.L-1)下CRL-1762细胞的增殖水平,对照组不加IL-13;RT-PCR检测100μg.L-1 IL-13在不同培养时间(15、30、60min)CRL-1762细胞表达c-fos mRNA的水平,对照组不加任何试剂;Western Blotting检测100μg.L-1 IL-13在不同培养时间(30、60、120min)对CRL-1762细胞表达c-fos蛋白质的水平,对照组不加任何试剂。结果 IL-13组CRL-1762细胞吸光度较对照组明显增强,且细胞增殖率与IL-13浓度有关;IL-13诱导CRL-1762细胞30min后,c-fos mRNA的表达较其余各组均明显增强(P<0.05);IL-13诱导CRL-1762细胞60min后,c-fos蛋白质的表达较其余各组均有显著升高(P<0.05)。结论IL-13对CRL-1762细胞的生长有明显的促进作用,并在一定范围内呈浓度依赖性;IL-13能够诱导CRL-1762细胞c-fos mRNA和蛋白质的表达瞬时增强。

IL-18基因启动子区-656G/T基因多态性与类风湿关节炎和哮喘的关系

目的探讨IL-18基因启动子区-656G/T基因多态性与类风湿关节炎和哮喘的关系。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对120例哮喘(A组)、144例类风湿关节炎患者(R组)及112例健康对照者(C组)IL-18基因启动子区-656G/T基因型多态性进行检测。结果 -656T等位基因频率在A、R、C组中分别为50.0%、60.4%、48.7%,R组和C组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-18基因启动子区-656G/T基因多态性与类风湿关节炎具有相关性而与哮喘无关。

人胎小肠GnRH-IR细胞的形态测量分析

目的探索不同胎龄人胎小肠GnRH-IR细胞的变化。方法用免疫组织化学方法对44例第9～38周新鲜人胎小肠GnRH-IR细胞染色定位后,用体视学方法对其进行形态学测量分析。结果①GnRH-IR细胞散在分布于人胎小肠的上皮细胞之间和固有层结缔组织中,形态多样;②上皮GnRH-IR细胞比固有层更规则,同肠段上皮GnRH-IR细胞的形状因子(FF)比固有层小(P<0.05);③上皮GnRH-IR细胞比固有层大,上皮GnRH-IR细胞的平均截面面积(A)和平均周长(B)比固有层大(P<0.05);④GnRH-IR细胞的相对数量在肠段之间有差异,其体密度(Vv)、数密度(Nv)从十二指肠到回肠依次减少(P<0.001)。各肠段GnRH-IR细胞数量随胎龄而变化,且上皮和固有层变化不同,在上皮第21～24周以前Vv、Nv随胎龄增加而增大,其后则随胎龄增加而变小;在固有层Vv、Nv随胎龄增加而增多,且第21～24周以前增长明显,以后增长变缓。结论人胎小肠GnRH-IR细胞广泛存在于人胎小肠粘膜上皮和固有层,形态多样,大小不一。数量从十二指肠到回肠依次减少,且随胎龄增加上皮Gn-RH-IR细胞数量与固有层出现不同的变化。

缺血预处理减少大鼠肝缺血再灌注损伤期间白三烯C4生成

白三烯（leukotrienes,LTs）是经5-脂氧化酶（5-lipoxygenase,5-LO）途径产生的一类重要前炎症花生四烯酸类物质.它包括半胱氨酰白三烯（cysteinyl leukotrienes,Cys-LTs）（LTC4、LTD4和LTE4）以及LTB4.Cys-LTs母体复合物LTC4由肝微粒体白三烯C4合酶（leukotriene C4 synthase,LTC4S）、谷胱甘肽S转移酶（microsomal glutathione S-transferase,mGST） mGST2和mGST3催化LTA4和还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）结合而成[1].

IL-13和乙醇促进人肺成纤维细胞胶原的表达

目的:研究乙醇和/或白细胞介素13(IL-13)对人肺成纤维细胞(HFL-1)Ⅰ、Ⅲ型胶原α1链基因(COL1A1、COL3A1)以及Ⅰ型胶原蛋白(CoⅠ)表达的影响,探讨肺纤维化的机制。方法:培养HFL-1,通过实时定量荧光RT-PCR检测乙醇和/或IL-13对HFL-1细胞IL-13受体(IL-13Rα1、IL-13Rα2、IL-4Rα)mRNA、COL1A1 mRNA和COL3A1 mRNA表达的影响,ELISA的方法检测乙醇和/或IL-13对HFL-1分泌CoⅠ的影响。结果:单独低浓度乙醇(25、50、100、200mmol/L)作用HFL-1后,与对照组相比IL-13Rα1 mRNA与IL-4Rα mRNA水平比对照组显著增高(P<0.05),而IL-13Rα2 mRNA水平比对照组显著降低(P<0.05)。单独低浓度乙醇(25、50、100、200 mmol/L)对HFL-1的COL1A1 mR-NA和COL3A1 mRNA表达无影响(P>0.05)。IL-13(10、20、50μg/L)可以促进HFL-1的COL1A1 mRNA和COL3A1 mR-NA的表达(P<0.05),且存在浓度依赖性。乙醇(200 mmol/L)与IL-13(10、20、50μg/L)共同作用刺激HFL-1促进COL1A1 mRNA和COL3A1 mRNA的表达比IL-13(10、20、50μg/L)单独作用强(P<0.05)。IL-13组(10、20、50μg/L)和乙醇(200 mmol/L)与IL-13(10、20、50μg/L)共同刺激组HFL-1均有CoⅠ的分泌,但共同刺激组HFL-1分泌CoⅠ量显著增加(P<0.05)。结论:单独低浓度乙醇(25、50、100、200mmol/L)不影响HFL-1细胞的COL1A1和COL3A1表达,但可以影响HFL-1细胞IL-4Rα、IL-13Rα1和IL-13Rα2的表达,而乙醇与IL-13共同刺激与单独IL-13刺激相比对HFL-1的COL1A1和COL3A1以及CoⅠ的表达有显著的促进作用。

大鼠烫伤后小肠上皮内T细胞的变化

目的:探讨大鼠烫伤后小肠上皮内TCRαβT细胞和TCRγδT细胞在各肠段问的变化。方法:将大鼠随机分成正常对照组,烫伤后1、3和7d组。除正常对照组,其余的制作全身体表面积(TBSA)30%Ⅲ°烫伤模型。采用免疫组化和体视学测量方法,分别测出其T细胞数密度、平均体积和表面积体积比,并比较它们在肠段间的差异。结果:烫伤后(除回肠TCRγδT细胞)肠黏膜T细胞数密度均下降,第3天最低。无论正常或烫伤后,TcRγδT细胞平均体积均比TCRαβT细胞增大。结论:烫伤后(除回肠TCRγδT细胞)肠黏膜T细胞的数量均减少,第3天最少,但其平均体积和形状规则程度与烫伤前相比没有显著变化。

人胎胰腺CgA-IR细胞的形态计量学研究

目的 探讨人胎胰腺嗜铬素A免疫反应（Chromogranin A-immunoreactive，CgA-IR细胞）细胞的发生规律。方法 用免疫组织化学及体视学方法对33例10～32周人胎胰腺CgA-IR细胞进行形态计量学研究。结果 人胎胰腺CgA-IR细胞广泛分布于胰岛、腺泡及导管上皮细胞间。其体积密度和数密度随胎龄增大而逐渐增多。大小在胚胎早期随胎龄增大而增大，24周后趋于稳定。胰头CgA-IR细胞的分布密度比胰尾的低，其体积密度扣数密度比胰尾的要小。结论 人胎胰腺CgA-IR细胞的数量和形状随胎龄而变化，因部位而不同。

大鼠烫伤后肠壁微血管的形态计量学分析

了解烫伤后肠粘膜微血管形态测量学方面的改变,探讨肠粘膜损伤的机制。以大鼠烫伤为模型,用AKP染色分别显示未烫伤及烫伤鼠回肠壁微血管,并进行体视学测量分析。伤后平均截面面积和平均周长均变小。对照组微血管平均截面面积为56.06±8.03μm2,伤后12 h最低(30.90±6.46μm2,P<0.01);对照组血管平均周长为23.84±4.17μm,伤后6 h降至最低,为19.43±1.59μm(P<0.01)。微血管长度密度除伤后12 h组外,其余各组均较对照组高;在伤后12 h肠壁微血管体积密度降低(P<0.01),其余各组虽较对照组高,但无统计学意义(P>0.05)。结果表明大鼠严重烫伤后肠壁微血管管径缩小,证明存在肠血流量减少的现象,旁证肠粘膜损伤是因为缺血缺氧所致。

正常大鼠小肠上皮内T细胞的形态计量学研究

目的 研究TCRαβT细胞和TCRγδT细胞在大鼠小肠上皮内各肠段间的分布规律.方法 采用免疫组化和体视学测量方法,对10只180～220 g的雄性Wistar大鼠小肠上皮内T细胞的数密度、体积密度、表面积密度、平均体积和表面积体积比进行测量,并比较它们在各肠段间的差异.结果 从十二指肠到回肠各肠段上皮内CD3^＋ T细胞和TCRγδT细胞的体积密度、数密度和表面积密度均依次降低;各肠段上皮内TCRαβT细胞的体积密度、数密度和表面积密度则依次有增大的趋势;各肠段上皮内TCRγδT细胞的平均体积大于TCRαβT细胞的;各肠段上皮内CD3^＋T细胞、TCRαβT细胞和TCRγδT细胞的算术平均体积和细胞表面积体积比均变化不大,提示各肠段间同种T细胞的体积接近形状相似.结论 总体上,从十二指肠到回肠大鼠小肠上皮内T细胞数依减少;而TCRγδT细胞的体积比TCRαβT细胞的大.

溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响

背景:白细胞介素13受体α2与白细胞介素13结合后,不介导白细胞介素13功能,对白细胞介素13起负调控作用。有研究表明,溶血磷脂酸能增加人支气管上皮细胞白细胞介素13受体α2的表达,从而抑制白细胞介素13的作用。目的:验证溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的诱导作用。设计、时间及地点:mRNA水平的观察对照实验,于2007-07/2008-11在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成。材料:人肺成纤维细胞HFL-1购于中科院上海生化和细胞生物研究所。方法:培养HFL-1细胞,行时间依赖和剂量依赖实验。时间依赖实验采用1μmol/L溶血磷脂酸刺激细胞,分别于0,6,12,24h收集细胞。剂量依赖实验分别用0,0.1,1,10μmol/L的溶血磷脂酸刺激细胞,12h收集细胞。主要观察指标:显微镜下观察溶血磷脂酸对HFL-1细胞生长的影响,提取HFL-1细胞总RNA,用反转录-聚合酶链反应及图像分析法检测溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响。结果:溶血磷脂酸不影响HFL-1细胞生长。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达增高,并呈时间依赖性。随着溶血磷脂酸浓度的增加,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达明显增加。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达可达高峰。溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α1的表达无影响。结论:溶血磷脂酸能促进人肺成纤维细胞HFL-1白细胞介素13受体α2 mRNA的表达。

粉尘螨变应原对树突状细胞作用的研究

目的研究粉尘螨(Der.f)变应原对树突状细胞的作用。方法分别检测经Der.f变应原作用后,DC2.4(树突状细胞株)细胞白介素-12(IL-12)和IL-10的分泌,TLR2受体的基因表达和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)p44/42的磷酸化水平。结果Der.f促进DC2.4IL-10的分泌(由空白组的不分泌到Der.f作用组的27.7pg/mL,P<0.01),抑制IL-12的分泌(由空白组的22.8pg/mL到Der.f作用组的15.9pg/mL,P<0.05),并可促进p44/42MAPK蛋白的磷酸化和TLR2的基因表达,U0126可逆转其细胞因子的分泌模式,并降低p44/42MAPK磷酸化水平。结论Der.f变应原可影响树突状细胞的细胞因子分泌,受体表达及信号通路磷酸化水平。