环境温度变化对大鼠肺组织病理损伤的观察

目的探讨环境温度变化时大鼠肺组织的病理损伤及规律。方法将9～15周龄雄性SD大鼠84只按随机数字表法分为常温对照组(20℃,21只)和温度骤变组[骤升温至37℃组(21只)、骤降温至4℃组(21只)和骤降温至-12℃组(21只)],每组均观察1、4、8、12、24、48和168h7个时间点,每个时间点3只大鼠。分别于各时间点处死动物,切取左侧肺脏上叶,经4%多聚甲醛液固定24h、石蜡包埋和切片,常规HE染色观察肺组织病理学变化。结果温度骤变组大鼠肺组织均出现不同程度的损伤,主要表现在肺泡壁毛细血管扩张充血、出血、细支气管黏膜上皮坏死、炎细胞浸润等,在骤升温至37℃组最严重。各组出现损伤最严重的时间不同,骤升温至37℃组在12h损伤最严重,而骤降温至4℃组和骤降温至-12℃组均在24h损伤最明显。结论环境温度变化可引起肺组织损伤,出现肺泡壁毛细血管扩张充血、出血、细支气管黏膜上皮坏死、炎症细胞浸润等病理变化。

CXCL2、HIF-1α在前列腺癌组织中的表达及意义

目的探讨CXCL2和HIF-1α在前列腺癌(prostatic cancer,PC)组织中的表达,分析其与前列腺癌临床病理特征的关系。方法对112例前列腺标本[PC(PC组)76例,前列腺上皮内瘤(prostatic intraepithelial neoplasia,PIN;PIN组)15例,良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH;BPH组)21例]行免疫组化SP法检测CX-CL2和HIF-1α的表达。结果 PC组、PIN组CXCL2、HIF-1α阳性表达率均显著高于BPH组,差异均有统计学意义(均P<0.01);PC组CXCL2、HIF-1α阳性表达率显著高于PIN组,差异有统计学意义(P<0.01)。高分化组CXCL2、HIF-1α阳性表达率显著低于中分化组,差异有统计学意义(P<0.05);高分化组、中分化组CXCL2、HIF-1α阳性表达率均显著低于低分化组,差异有统计学意义(均P<0.01)。A期组、B期组CXCL2阳性表达率均显著低于C期组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),A期组、B期组、C期组CXCL2阳性表达率均显著低于D期组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。A期组、B期组、C期组HIF-1α阳性表达率均显著低于D期组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),A期组HIF-1α阳性表达率显著低于B期组、C期组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),B期组HIF-1α阳性表达率显著低于C期组,差异有统计学意义(P<0.05)。PC转移组CXCL2、HIF-1α阳性表达率均显著高于PC无转移组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。PC中CXCL2表达与HIF-1α表达呈正相关(r=0.422,P<0.01)。结论 CXCL2、HIF-1α在PC组织中呈高表达。CXCL2、HIF-1α表达与前列腺癌病理分级、临床分期、淋巴结转移等有关。但CXCL2和HIF-1α在PC发生、发展中的作用机制还有待进一步的研究。

氯化镧对烧伤大鼠胸腺iNOS表达及细胞凋亡的影响

用原位末端标记术、免疫组织化学术和体视学形态记量法观察稀土化合物氯化镧(LaCl3)对严重烧伤大鼠胸腺诱导性一氧化氮合酶(iN-OS)表达及胸腺细胞凋亡的影响。结果显示,LaCl3能减轻烧伤后大鼠胸腺应激性萎缩的程度,降低病理性胸腺细胞凋亡率,其行为主要是通过部分抑制iNOS在烧伤后大鼠胸腺组织中的表达,表明LaCl3对严重烧伤后机体免疫功能具有一定的保护作用,可作为一种有效的烧伤后免疫功能调节和保护剂。

IL-13对成纤维细胞IL-13受体和IL-4受体表达的影响

目的研究IL-13对人肺成纤维细胞株HFL-1和人肝星状细胞株LX-2 IL-13受体和IL-4受体表达的调节作用。方法 RT-PCR法检测HFL-1细胞株和LX-2细胞株IL-13Rα1、IL-4R和IL-13Rα2 mRNA的表达;凝胶电泳定量软件Image Tool2.0对RT-PCR电泳条带进行光密度分析;ELISA法检测HFL-1细胞株和LX-2细胞株分泌可溶型IL-13Rα2以及检测细胞裂解液总IL-13Rα1、IL-4R和IL-13Rα2含量。结果 IL-13(5～100 ng/ml)对HFL-1细胞株和LX-2细胞株表达IL-13Rα1和IL-4R无影响;IL-13为5、10、20 ng/ml时能诱导HFL-1细胞株表达IL-13Rα2并呈现剂量依赖,当IL-13为50 ng/ml时,对HFL-1细胞株IL-13Rα2表达的诱导作用明显减弱,IL-13 100 ng/ml组没有检测到HFL-1细胞株IL-13Rα2的表达;LX-2细胞株IL-13Rα2表达缺失且IL-13不能诱导LX-2细胞株表达IL-13Rα2。结论 IL-13不能上调人肺成纤维细胞株HFL-1和人肝星状细胞株LX-2表达功能型受体IL-13Rα1和IL-4R,表明IL-13不能通过上调IL-13Rα1和IL-4R表达量来放大自身作用;一定浓度的IL-13能诱导人肺成纤维细胞株HFL-1表达抑制型受体IL-13Rα2,表明IL-13的自身负调控。

酪氨酸激酶抑制剂A77 1726阻断IL-13对成纤维细胞的促胶原合成作用

目的:观察酪氨酸激酶抑制剂A771726对白细胞介素13(IL-13)促成纤维细胞胶原合成作用的影响。方法:MTT法观察不同浓度的A771726对成纤维细胞的增殖作用的影响。成纤维细胞分为实验组和实验对照组,实验对照组加入IL-13(100μg/L),实验组加入A771726(50μmol/L)和IL-13(100μg/L),作用24、48、72h后,羟脯氨酸(Hyp)检测A771726对IL-13促进成纤维细胞分泌胶原蛋白的影响,RT-PCR观察A771726对IL-13促进成纤维细胞I型胶原α1基因mRNA水平表达的影响,Western blot观察A771726对IL-13促进成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的影响。结果:A771726可抑制成纤维细胞的增殖。羟脯氨酸检测实验组48h组和72h组成纤维细胞分泌胶原蛋白的含量显著低于实验对照组(P<0.05),RT-PCR观察到实验组48h组和72h组成纤维细胞I型胶原α1基因(COL1A1)mRNA表达水平显著低于实验对照组(P<0.05),Western blot观察到实验组48h组和72h组成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的水平显著低于空白对照组(P<0.05)。结论:酪氨酸酶抑制剂A771726阻断IL-13对成纤维细胞的促胶原蛋白合成作用,阻断IL-13促成纤维细胞I型胶原α1基因mRNA水平和蛋白水平的表达。

IL-13和乙醇对人肺成纤维细胞增殖的影响

目的研究乙醇和(或)IL-13对人肺成纤维细胞(HFL-1)的促增殖作用。方法培养HFL-1,通过MTT法检测乙醇和(或)IL-13对HFL-1增殖的影响,并对结果进行分析。结果①25、50、100、200 mmol.L-1乙醇对HFL-1的增殖无影响(P>0.05)。②10、20、50μg.L-1的IL-13对乙醇有促增殖作用,且有浓度依赖性(P<0.05)。③不同浓度的乙醇(25、50、100、200 mmol.L-1)和10μg.L-1IL-13共同刺激HFL-1后增殖效果与10μg.L-1IL-13单独刺激的效果差异无统计学意义(P>0.05);除50 mmol.L-1外,其余浓度的乙醇(25、100和200 mmol.L-1)和20μg.L-1IL-13共同刺激HFL-1后增殖效果高于20μg.L-1IL-13单独刺激的效果(P<0.05);不同浓度的乙醇(25、50、100和200 mmol.L-1)和50μg.L-1IL-13共同刺激HFL-1后增殖效果明显高于50μg.L-1IL-13单独刺激的效果(P<0.05),且具有浓度依赖性。结论单独低浓度乙醇(25、50、100和200 mmol.L-1)不会影响HFL-1的增殖,但与一定浓度IL-13共同作用下将对HFL-1的增殖有显著影响。

人胎小肠GnRH-IR细胞的形态测量分析

目的探索不同胎龄人胎小肠GnRH-IR细胞的变化。方法用免疫组织化学方法对44例第9～38周新鲜人胎小肠GnRH-IR细胞染色定位后,用体视学方法对其进行形态学测量分析。结果①GnRH-IR细胞散在分布于人胎小肠的上皮细胞之间和固有层结缔组织中,形态多样;②上皮GnRH-IR细胞比固有层更规则,同肠段上皮GnRH-IR细胞的形状因子(FF)比固有层小(P<0.05);③上皮GnRH-IR细胞比固有层大,上皮GnRH-IR细胞的平均截面面积(A)和平均周长(B)比固有层大(P<0.05);④GnRH-IR细胞的相对数量在肠段之间有差异,其体密度(Vv)、数密度(Nv)从十二指肠到回肠依次减少(P<0.001)。各肠段GnRH-IR细胞数量随胎龄而变化,且上皮和固有层变化不同,在上皮第21～24周以前Vv、Nv随胎龄增加而增大,其后则随胎龄增加而变小;在固有层Vv、Nv随胎龄增加而增多,且第21～24周以前增长明显,以后增长变缓。结论人胎小肠GnRH-IR细胞广泛存在于人胎小肠粘膜上皮和固有层,形态多样,大小不一。数量从十二指肠到回肠依次减少,且随胎龄增加上皮Gn-RH-IR细胞数量与固有层出现不同的变化。

抗三价流感病毒亚单位疫苗IgY防治小鼠流感病毒感染的实验研究

目的：探讨抗三价流感病毒亚单位疫苗IgY（Immunoglobulin Yolk）预防及治疗流感病毒感染小鼠的作用。方法：建立A/fm/1/47（H1N1）流感小鼠模型;分5组,观察各组小鼠死亡率,脾、肺指数及肺指数抑制率。结果：0.2%抗三价流感病毒亚单位疫苗IgY于攻毒前24、6、1小时滴鼻3次显著地预防流感病毒致死率（30.0%）,而攻毒后1、6、24小时分别滴鼻3次,此后每天滴鼻1次,持续5天,致死率为20.0%,两组与阳性对照组（致死率90.0%）、非特异性IgY预防和治疗组（致死率80.0%,70.0%）比较差异显著（P〈0.01）。0.2%抗三价流感病毒亚单位疫苗IgY预防组和治疗组肺指数显著低于阳性对照组（P〈0.05~0.01）,其治疗组也低于非特异性IgY预防和治疗组（P〈0.05）。结论：抗三价流感病毒亚单位疫苗IgY感染前后24小时内多次滴鼻能有效地预防和治疗流感病毒感染。

IL-13和乙醇促进人肺成纤维细胞胶原的表达

目的:研究乙醇和/或白细胞介素13(IL-13)对人肺成纤维细胞(HFL-1)Ⅰ、Ⅲ型胶原α1链基因(COL1A1、COL3A1)以及Ⅰ型胶原蛋白(CoⅠ)表达的影响,探讨肺纤维化的机制。方法:培养HFL-1,通过实时定量荧光RT-PCR检测乙醇和/或IL-13对HFL-1细胞IL-13受体(IL-13Rα1、IL-13Rα2、IL-4Rα)mRNA、COL1A1 mRNA和COL3A1 mRNA表达的影响,ELISA的方法检测乙醇和/或IL-13对HFL-1分泌CoⅠ的影响。结果:单独低浓度乙醇(25、50、100、200mmol/L)作用HFL-1后,与对照组相比IL-13Rα1 mRNA与IL-4Rα mRNA水平比对照组显著增高(P<0.05),而IL-13Rα2 mRNA水平比对照组显著降低(P<0.05)。单独低浓度乙醇(25、50、100、200 mmol/L)对HFL-1的COL1A1 mR-NA和COL3A1 mRNA表达无影响(P>0.05)。IL-13(10、20、50μg/L)可以促进HFL-1的COL1A1 mRNA和COL3A1 mR-NA的表达(P<0.05),且存在浓度依赖性。乙醇(200 mmol/L)与IL-13(10、20、50μg/L)共同作用刺激HFL-1促进COL1A1 mRNA和COL3A1 mRNA的表达比IL-13(10、20、50μg/L)单独作用强(P<0.05)。IL-13组(10、20、50μg/L)和乙醇(200 mmol/L)与IL-13(10、20、50μg/L)共同刺激组HFL-1均有CoⅠ的分泌,但共同刺激组HFL-1分泌CoⅠ量显著增加(P<0.05)。结论:单独低浓度乙醇(25、50、100、200mmol/L)不影响HFL-1细胞的COL1A1和COL3A1表达,但可以影响HFL-1细胞IL-4Rα、IL-13Rα1和IL-13Rα2的表达,而乙醇与IL-13共同刺激与单独IL-13刺激相比对HFL-1的COL1A1和COL3A1以及CoⅠ的表达有显著的促进作用。

大鼠烫伤后小肠上皮内T细胞的变化

目的:探讨大鼠烫伤后小肠上皮内TCRαβT细胞和TCRγδT细胞在各肠段问的变化。方法:将大鼠随机分成正常对照组,烫伤后1、3和7d组。除正常对照组,其余的制作全身体表面积(TBSA)30%Ⅲ°烫伤模型。采用免疫组化和体视学测量方法,分别测出其T细胞数密度、平均体积和表面积体积比,并比较它们在肠段间的差异。结果:烫伤后(除回肠TCRγδT细胞)肠黏膜T细胞数密度均下降,第3天最低。无论正常或烫伤后,TcRγδT细胞平均体积均比TCRαβT细胞增大。结论:烫伤后(除回肠TCRγδT细胞)肠黏膜T细胞的数量均减少,第3天最少,但其平均体积和形状规则程度与烫伤前相比没有显著变化。

人胎胰腺CgA-IR细胞的形态计量学研究

目的 探讨人胎胰腺嗜铬素A免疫反应（Chromogranin A-immunoreactive，CgA-IR细胞）细胞的发生规律。方法 用免疫组织化学及体视学方法对33例10～32周人胎胰腺CgA-IR细胞进行形态计量学研究。结果 人胎胰腺CgA-IR细胞广泛分布于胰岛、腺泡及导管上皮细胞间。其体积密度和数密度随胎龄增大而逐渐增多。大小在胚胎早期随胎龄增大而增大，24周后趋于稳定。胰头CgA-IR细胞的分布密度比胰尾的低，其体积密度扣数密度比胰尾的要小。结论 人胎胰腺CgA-IR细胞的数量和形状随胎龄而变化，因部位而不同。

大鼠烫伤后肠壁微血管的形态计量学分析

了解烫伤后肠粘膜微血管形态测量学方面的改变,探讨肠粘膜损伤的机制。以大鼠烫伤为模型,用AKP染色分别显示未烫伤及烫伤鼠回肠壁微血管,并进行体视学测量分析。伤后平均截面面积和平均周长均变小。对照组微血管平均截面面积为56.06±8.03μm2,伤后12 h最低(30.90±6.46μm2,P<0.01);对照组血管平均周长为23.84±4.17μm,伤后6 h降至最低,为19.43±1.59μm(P<0.01)。微血管长度密度除伤后12 h组外,其余各组均较对照组高;在伤后12 h肠壁微血管体积密度降低(P<0.01),其余各组虽较对照组高,但无统计学意义(P>0.05)。结果表明大鼠严重烫伤后肠壁微血管管径缩小,证明存在肠血流量减少的现象,旁证肠粘膜损伤是因为缺血缺氧所致。

正常大鼠小肠上皮内T细胞的形态计量学研究

目的 研究TCRαβT细胞和TCRγδT细胞在大鼠小肠上皮内各肠段间的分布规律.方法 采用免疫组化和体视学测量方法,对10只180～220 g的雄性Wistar大鼠小肠上皮内T细胞的数密度、体积密度、表面积密度、平均体积和表面积体积比进行测量,并比较它们在各肠段间的差异.结果 从十二指肠到回肠各肠段上皮内CD3^＋ T细胞和TCRγδT细胞的体积密度、数密度和表面积密度均依次降低;各肠段上皮内TCRαβT细胞的体积密度、数密度和表面积密度则依次有增大的趋势;各肠段上皮内TCRγδT细胞的平均体积大于TCRαβT细胞的;各肠段上皮内CD3^＋T细胞、TCRαβT细胞和TCRγδT细胞的算术平均体积和细胞表面积体积比均变化不大,提示各肠段间同种T细胞的体积接近形状相似.结论 总体上,从十二指肠到回肠大鼠小肠上皮内T细胞数依减少;而TCRγδT细胞的体积比TCRαβT细胞的大.

溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响

背景:白细胞介素13受体α2与白细胞介素13结合后,不介导白细胞介素13功能,对白细胞介素13起负调控作用。有研究表明,溶血磷脂酸能增加人支气管上皮细胞白细胞介素13受体α2的表达,从而抑制白细胞介素13的作用。目的:验证溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的诱导作用。设计、时间及地点:mRNA水平的观察对照实验,于2007-07/2008-11在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成。材料:人肺成纤维细胞HFL-1购于中科院上海生化和细胞生物研究所。方法:培养HFL-1细胞,行时间依赖和剂量依赖实验。时间依赖实验采用1μmol/L溶血磷脂酸刺激细胞,分别于0,6,12,24h收集细胞。剂量依赖实验分别用0,0.1,1,10μmol/L的溶血磷脂酸刺激细胞,12h收集细胞。主要观察指标:显微镜下观察溶血磷脂酸对HFL-1细胞生长的影响,提取HFL-1细胞总RNA,用反转录-聚合酶链反应及图像分析法检测溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响。结果:溶血磷脂酸不影响HFL-1细胞生长。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达增高,并呈时间依赖性。随着溶血磷脂酸浓度的增加,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达明显增加。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达可达高峰。溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α1的表达无影响。结论:溶血磷脂酸能促进人肺成纤维细胞HFL-1白细胞介素13受体α2 mRNA的表达。

标准化粉尘螨疫苗免疫治疗哮喘小鼠肺组织病理变化动态观察

目的对标准化粉尘螨疫苗免疫治疗哮喘小鼠肺组织的病理变化进行观察,以进一步探讨标准化粉尘螨疫苗免疫治疗疗效。方法利用粉尘螨抗原建立哮喘小鼠模型,将32只小鼠分为4组:对照组、哮喘组、低剂量治疗组、高剂量治疗组。末次激发后24h,处死动物,取小鼠肺组织,分别固定、包埋和切片,用光镜、电镜观察肺组织病理变化。结果光镜下哮喘组相对于空白组,肺组织结构紊乱、充血以及水肿,有大量炎症细胞浸润;高剂量粉尘螨疫苗治疗组较哮喘组肺组织病理变化有明显改善,炎性细胞浸润显著减少,水肿较轻。而低剂量粉尘螨疫苗组肺组织仍可见明显炎性细胞浸润和病变,但较哮喘组病理变化为轻。电镜观察显示:哮喘组肺组织结构紊乱,有炎性细胞浸润,而高剂量粉尘螨疫苗治疗组Ⅰ型和Ⅱ型肺泡细胞结构基本正常、清晰。结论粉尘螨疫苗能有效减轻哮喘小鼠肺组织的病理变化,减少炎症细胞浸润,且高剂量粉尘螨疫苗较低剂量治疗疗效更为显著,为临床过敏性哮喘尘螨脱敏治疗奠定理论基础。

严重烧伤大鼠胸腺诱导型一氧化氮合酶表达对细胞凋亡的影响

目的观察严重烧伤大鼠胸腺诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达对胸腺细胞凋亡的影响,探讨一氧化氮(NO)与胸腺病理损害的关系。方法将56只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(8只)、烧伤组(24只)、烧伤+硫酸甲基异硫脲(SMT)组(24只)。后两组大鼠背部造成30％TBSAⅢ度烧伤,伤后分别立即静脉注射等渗盐水、等渗盐水+SMT(7．5 mg／kg);对照组不予烧伤及SMT处理。两烧伤组分别于伤后6、24、72 h检测胸腺重量、胸腺细胞凋亡情况(原位缺口末端标记法)、胸腺iNOS表达情况(免疫组织化学染色法),采用体视学方法测定阳性细胞密度,每时相点8只;同时测定对照组相应指标。结果烧伤组大鼠伤后24、72 h胸腺重量分别为(153±14)、(91±22)mg,明显轻于对照组[(243±12)mg,P<0．01];烧伤+SMT组此时明显高于烧伤组(P<0．01)。对照组大鼠胸腺皮、髓质可见散在少量凋亡阳性细胞、iNOS阳性细胞。烧伤组大鼠伤后6 h胸腺皮质有凋亡阳性细胞及少量iNOS阳性细胞;伤后24 h时凋亡阳性细胞分布于被膜下皮质、皮髓交界处及髓质,iNOS阳性细胞广泛出现在小叶间隔内血管旁;伤后72 h时凋亡阳性细胞使胸腺皮质广泛呈现棕褐色;伤后6～72 h烧伤组iNOS阳性细胞呈进行性增加(P<0．05)。烧伤+SMT组大鼠伤后各时相点阳性细胞较少且分布不均,凋亡灶少见,未见iNOS阳性细胞。烧伤组大鼠伤后24、72 h凋亡阳性细胞密度分别为(2．428±0．728)×10-5／μm3、(5．586±1．233)×10-5／μm3,高于对照组和烧伤+ SMT组(P<0．01)。结论严重烧伤大鼠伤后早期胸腺细胞凋亡率增加,iNOS在胸腺表达增强并促进了胸腺细胞凋亡;SMT则能部分改善这一现象。

心理干预对先天性无阴道患者术后婚姻和生活质量的影响

目的探讨心理干预对先天性无阴道患者术后婚姻和生活质量的影响。方法将先天性无阴道患者按自愿原则分为干预组18例和非干预组11例，对干预组的患者进行术前的认知行为治疗，用Olson婚姻质量调查问卷及诺丁汉健康量表对两组手术前后生活质量以及术后婚姻质量进行评估。结果干预组术后婚姻和生活质量评分均显著优于非干预组（P〈0．05或P〈0．01）。结论手术前心理干预能有效提高先天性无阴道患者术后婚姻和生活质量。