链接式教学法在组织学与胚胎学教学中的应用

链接式教学法是一种在老师和教学大纲的指导下,选择链接点,针对性的与临床和科研链接并分析和讨论的学习过程。在组织学与胚胎学教学实施过程中,链接式教学法具体步骤为选择链接点;学生自主学习;分组讨论;小组发言;老师总结。链接式教学法的特点:增强教师知识结构整合和自身素质提高;链接点有效链接结构、功能、临床和科研;提高学生自主学习能力;使学生对科研工作有基本的认识。链接式教学法的应用是为了让学生在获得更多专业知识的同时培养学生的兴趣、观察力、想象力和思维能力。

建设《组织胚胎学》多媒体网络课程的内容及体会

组织胚胎学的教学难点是内容多,课时少,学生缺乏镜检经验以及对组织图像理解的完整性,这就要求我们要实现医学教学手段的改革,利用网络进行多媒体教学是必然趋势。文章具体阐述了网络课程的研究背景、研究过程,研究内容、特点和体会。该课程的开发和推广可以提高课堂教学效果,帮助学生对知识点的形象理解,同时也为师生之间和同行之间的交流提供平台,实现资源共享。

重组人白细胞介素-13对造血细胞白细胞介素-13受体α1表达的调控

目的探讨白细胞介素-13受体α1(interleukine-13 receptor α1,IL-13,Rα1)在造血细胞的表达及其在重组人白细胞介素-13(recombmant human ineterleukine-13,rhIL-13)作用下的表达变化。方法细胞培养,提取细胞总RNA,用RT-PCR及图象分析法检测Dami细胞白细胞介素-13受体浕1mRNA表达的水平。结果Dami细胞均表达白细胞介素-13受体α1;rhIL-13作用Dami细胞4h后,白细胞介素-13受体α1 mRNA表达降低12h后,IL-13Rα1 mRNA表达恢复。结论①Dami细胞表达IL-13Rα1。②rhIL-13短暂下调Dami细胞IL-13Rα1的表达。

大黄酸对大鼠肠黏膜的保护作用观察

目的观察大黄酸(RH)对大鼠肠黏膜的保护作用。方法将28只SD雌性大鼠随机分成对照组、肠黏膜损伤组、RH保护组和RH修复组。用HE染色和体视学方法测量各组大鼠肠绒毛高度、肠隐窝深度、两者比值、肠绒毛中中央乳糜管体密度及其直径,ELISA法检测肠黏液中免疫球蛋白A(IgA)的浓度。结果 RH保护组、RH修复组与肠黏膜损伤组相比,肠绒毛高度增加,肠隐窝深度变浅,两者比值增大,肠绒毛中中央乳糜管体密度减小,直径缩短,肠黏液中IgA的浓度下降(P<0.05)。以上结果比较,以RH保护组效果为佳。结论 RH能改善损伤的肠黏膜结构,减轻肠绒毛的缩短,促进肠上皮的生长,减轻中央乳糜管的扩张,减少肠黏膜IgA的过度分泌,具有保护肠黏膜的作用。

大黄酸对IgA肾病Peyer结T细胞亚群的调节作用

目的探讨Peyer结T细胞亚群失衡在IgA肾病(IgAN)发病机制中的作用及大黄酸对其的调节作用。方法采用牛血清白蛋白+LPS+CCl4法建立IgA肾病大鼠模型。将32只SD雄性大鼠随机分成对照组、IgA肾病模型组、大黄酸预防组和大黄酸治疗组。10周末采用免疫荧光检测肾小球IgA沉积,ELISA方法检测血清中Th1类细胞因子IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4含量。用流式细胞术测定各组Peyer结CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞、γδT细胞亚群和IgA+B细胞(IgA+B220+)的比例。结果和对照组相比,模型组中Th2类细胞因子IL-4含量增加而Th1类细胞因子IFN-γ的含量降低(P均<0.05);模型组中CD4+T细胞、CD4+/CD8+、IgA+B220+B细胞比例升高(P均<0.05);模型组中γδT细胞亚群的比例增加,CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞的比例降低,但差异均无统计学意义(P>0.05)。大黄酸预防组和大黄酸治疗组均可减少IL-4含量、CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+比例和IgA+B220+B细胞比例,并提高IFN-γ的含量。结论 Peyer结Th细胞亚群失衡在IgAN发病机制中起到一定的作用,而大黄酸对Peyer结T细胞亚群平衡具有调节作用。

大鼠IgA肾病模型肾脏变化分析

目的探讨IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠肾小体、肾小囊、肾小球和近端肾小管病理变化。方法将20只SD雌性大鼠随机分成2组,即对照组和IgAN组(n=10)。用免疫荧光、HE染色和体视学方法,测出2组动物肾小体、肾小囊和肾小球体密度、球囊体积比、肾小体数密度、肾小体和肾小球长径、近端肾小管管腔和管壁面积及其比值,比较其差异。结果IgA免疫荧光染色,IgAN组皮质部见较强绿色荧光。与对照组比,IgAN组肾小体体密度增大,肾小囊体密度增大,肾小球体密度减小,球囊比减小,肾小体数密度变化差异无显著性,肾小体长径增大,肾小球长径减小,近端肾小管管腔面积减小,管壁面积增大,腔壁比减小。结论 IgAN大鼠肾小体和肾小囊增大,肾小球减小,近曲小管细胞体积增大,管腔变小。

食物过敏对大鼠小肠形态学及肠黏膜淋巴细胞的影响

目的观察卵蛋白经口致敏的大鼠小肠(十二指肠、空肠、回肠)形态学及肠道黏膜内淋巴细胞(CD4+、CD8+T淋巴细胞、CD20+B淋巴细胞)变化的情况。方法将27只大鼠按随机数字表法分为2组:实验组(17只)和对照组(10只)。对照组大鼠以无菌PBS液灌胃。实验组大鼠以卵蛋白灌胃,建立肠道食物过敏的动物模型。HE染色观察食物过敏大鼠十二指肠、空肠、回肠病理学变化的情况,免疫组织化学法和体视学方法检测大鼠十二指肠、空肠、回肠肠黏膜CD4+、CD8+T淋巴细胞、CD20+B淋巴细胞免疫反应阳性细胞的分布和数量变化的情况。结果实验组大鼠十二指肠、空肠、回肠均可见肠绒毛出现不同程度的糜烂、肿胀、脱落现象,固有层见嗜酸性粒细胞、浆细胞等炎症细胞浸润。与对照组比较,实验组大鼠十二指肠、空肠、回肠肠绒毛均变短、萎缩(P<0.05或P<0.01);十二指肠、空肠肠腺均增长(P<0.05或P<0.01)。实验组大鼠十二指肠、空肠、回肠肠黏膜固有层CD4+T淋巴细胞数密度略低于对照组,但差异均无统计学意义(均P>0.05);实验组大鼠十二指肠、空肠、回肠肠黏膜固有层、上皮内CD8+T淋巴细胞数密度均明显低于对照组(P<0.05或P<0.01),实验组大鼠十二指肠、空肠、回肠肠黏膜固有层CD20+B淋巴细胞数密度均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论卵蛋白致敏大鼠小肠肠黏膜损伤明显,肠黏膜淋巴细胞的变化导致肠黏膜局部免疫失调,在食物过敏变态反应性炎症发病过程中可能发挥重要的作用。

血清血管内皮生长因子对诊治子宫内膜异位症的临床价值

目的探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)诊治子宫内膜异位症(EM)的价值。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测100例EM患者和43例非内异症患者(对照组)手术前后血清中VEGF的含量。结果EM患者术前血清中VEGF水平明显高于对照组(P<0.01);Ⅲ-Ⅳ期EM患者血清VEGF水平高于Ⅰ-Ⅱ期者(P<0.01),术后EM患者血清VEGF水平迅速下降(P<0.01)。以血清VEGF 142 ng/L为EM诊断界点时,其诊断灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为0.930、0.930、0.968、0.833;血清VEGF为260 ng/L时,可对Ⅰ-Ⅱ期及Ⅲ-Ⅳ期EM患者进行分期。结论血清VEGF的水平对EM有重要的诊断价值,并可作为判定疗效、评价复发的重要指标。

小肠缺血预适应微血管床保护作用的体视学研究

探讨小肠缺血预适应(IP)对缺血再灌注(I/R)损伤肠黏膜保护机理。通过用无创动脉夹夹闭肠系膜前动脉(SMA)30 m in,再松夹灌注60 m in以制造I/R模型;夹8 m in松10 m in反复3次以制造IP模型;采用改良AKP组织化学方法显示要观察测量的肠黏膜微血管,用方网格测试系统进行微血管体视学测量。与对照组相比,I/R组及IP+I/R组均可见血管腔闭塞等组织学变化,I/R组比IP+I/R组严重;I/R组和IP+I/R组肠黏膜固有层微血管的体积密度(Vv)、长度密度(Lv)、平均截面面积(-A)和平均周长(B-)均比对照组的小,但IP组明显比I/R组更大(均p<0.01)。结果表明小肠缺血预适应对缺血再灌注肠黏膜微血管损伤变化具有明显的保护作用,能改善局部微循环而减少组织损伤。

白细胞介素-13与骨髓增生异常综合征

白细胞介素-13(IL-13)是由活化T细胞分泌产生的一种细胞因子,它能抑制单核细胞释放炎性细胞因子和化学因子,诱导B细胞增殖和分化,促进IgE合成,引起变态反应,促进肺的纤维化,IL-13还参与造血调控,对原始造血前体细胞增殖和分化起一定作用,对巨核细胞生长有促进作用;骨髓增生异常综合征(MDS)是一组源于骨髓造血干/祖细胞的恶性克隆增殖性疾病,目前研究认为MDS的发病机制复杂,涉及凋亡、增殖以及免疫低监视性,IL-13在其发生发展中可能起到一定作用。

特殊生物显微标本的火棉胶包埋制片法

火棉胶包埋制片法是生物显微研究的一项重要技术,在标本尺寸很大、硬度过高或过低及制作厚切片等场合,具有独特的质量优势。该文根据作者的实践经验,介绍了火棉胶包埋制片法的原理、操作流程和技术要点,展示了该法在上述3种条件下的制片结果和优点。实践表明,如需处理尺寸特别大、硬度很高或很低的标本,或者要求切片既有很大厚度,又要结构精细,应考虑使用本方法。

原癌基因c-fos及c-myc在IL-13诱导Dami细胞分化中的表达关系

目的研究重组人白细胞介素-13(recombinant humaninterleukine-13,rhIL-13)诱导Dami细胞分化中原癌基因c-fos及c-myc表达,探索原癌基因c-fos及c-myc在IL-13信号传导通路中的作用。方法采用RT-PCR检测rhIL-13分别作用不同时间GPⅡb mRNA、c-fos mRNA和c-myc mRNA的表达;Western Blotting检测c-Fos和c-Myc的表达。结果IL-13促进巨核细胞表面标志物GPⅡb mRNA表达;诱导原癌基因c-fos mRNA和蛋白的表达,并随后下调原癌基因c-myc mRNA和蛋白的表达。结论原癌基因c-fos与c-myc参与了IL-13诱导的信号传导并具有相关性。

白细胞介素-13诱导原癌基因c-myc表达的研究

目的:研究重组人白细胞介素-13(rhIL-13)诱导Dami细胞分化中c-myc表达。方法:Dami细胞20h无血清培养,rhIL-13分别作用不同时间,RT-PCR检测Dami细胞GPIIbmRNA,c-mycmRNA的表达。结果:①IL-13促进巨核细胞表面标志物GPIIbmRNA表达;②IL-13下调原癌基因c-mycmRNA。结论:白细胞介素-13诱导Dami细胞并抑制c-myc的表达。

小麦GLB 1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

以小麦主要过敏原Glb-1蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。采用细胞融合和有限稀释法相结合的方法快速筛选获得稳定分泌的特异性杂交瘤细胞株,用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水并用蛋白A亲和层析法纯化抗体后检测。采用间接ELISA法鉴定该单克隆抗体的IgG亚型;通过间接ELISA鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。利用双单抗夹心ELISA法检测单抗的抗原表位特异性。结果表明:共获得4株可稳定分泌小鼠抗小麦主要过敏原Glb-1蛋白的单克隆抗体,分别命名为1C4、4H5、1A9、4F5,经检测其Ig亚型均为IgG1,且4株单抗效价均在10-9以上。ELISA结果分析表明该4株单抗均能特异性识别小麦主要过敏原Glb-1蛋白且和其他常见食物无交叉反应性。将4株单抗两两配对进行ELISA实验,结果发现1C4与4H5可能有不同的抗原表位,以此建立的双抗夹心ELISA系统可以检测小麦Glb1-G3蛋白。实验成功制备了鼠抗小麦主要过敏原Glb-1蛋白抗原的单克隆抗体,并且建立了双单抗夹心ELISA检测系统,为小麦主要过敏原蛋白的检测奠定了基础。

动物源性食物抗原与糖尿病的相关性研究

目的探讨动物源性食物抗原与糖尿病的关系。方法选择糖尿病患者(糖尿病组)29例,其摄入动物源性食物(鱼、虾、牛奶和鸡蛋)后,采集血清。采用食物抗原包被ELISA法检测糖尿病组血清免疫球蛋白G(IgG)水平,ELISA法检测糖尿病组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和干扰素-γ(IFN-γ)水平,并与正常对照组进行比较。结果 29例患者中,大量摄入虾的有4例(13.79%),大量摄入牛奶的有11例(37.93%),大量摄入鱼的有22例(75.86%),大量摄入鸡蛋的有19例(65.52%)。糖尿病组血清IgG、TNF-α、IL-1β和IFN-γ水平均较正常对照组显著升高(均P<0.05)。结论特异动物源性食物可引发体内炎性反应,炎性反应过程产生的炎性因子与糖尿病的发生存在密切关系。