病理生理学实验课应用PBL教学模式的课堂设计

病理生理学是一门实验性很强的基础医学课程。通过实验课让学生掌握复制人类疾病动物模型的方法和技能,并在此基础上逐步理解和掌握疾病发生发展的原因、条件、机制、功能代谢变化及疾病防治策略的病理生理学基础。然而,传统的教学观念仅仅将实验教学作为验证和巩固理论教学的辅助手段,导致学生养成学习被动、盲从、依赖的不良习惯,阻碍了学生的创新思维和主动学习能力发展。为克服传统实验教学的弊端,本教研室将"以问题为中心的学习(problem-based learning,PBL)"教学模式尝试性地整合于病理生理学实验教学中,以观后效。PBL是一种以临床问题来激发学生创新思维并引导学生主动把握学习内容的教学模式。实验课PBL教学模式的实施共分为4个阶段:(1)课前准备:实验课理论教学、学生实验准备、实验分组要求;(2)实验操作:熟悉实验条件、温故实验设计、分组合作实验、老师穿插指导;(3)课堂小结:学生分组讨论、学生代表发言、学生自我评估、老师总结评价;(4)课后实验报告。通过采用PBL教学模式,将调动学生学习的积极性,促进学生由被动学习向主动学习转变,强化团队协作意识,有利于学生创新思维的培养和综合素质的提高。

串讲教学在病理生理学教学中的作用

病理生理学是贯通基础医学与临床医学的"桥梁学科",它内容复杂、抽象、综合且跨学科,应用传统的教学方法,学生感觉难学难记难理解,学习效果及考试成绩很不理想,探索病理生理学更有效的教学方法势在必行。历经多年的教学实践与研究,本教研室探索出在病理生理学创新主线教学法的基础上实行复习串讲教学,教学效果显着,深得同学们的欢迎。具体做法是在病理生理学课程应用主线教学法授课完之后,再利用8个学时进行课程系统性的整合复习串讲教学,包括:(1)提出学科定位、学科内容、课程内容的主线;(2)将所学章节内容之间的联系性串成主线;(3)在线上再具体阐述每个章节内容要掌握的知识点,特别是课堂上没消化的重点难点;(4)最后举几个特别典型能综合贯穿各章节内容的病案进行分析,巩固所学内容。课程结束后对串讲教学进行了问卷调查,结果显示:88%的同学喜欢并支持串讲,认为串讲强调了病理生理学课程整体和主线,阐明了内在联系,培养了综合思维能力;95%的同学认为串讲对病理生理学的学习和考试有很好的帮助。因此病理生理学应用串讲达到提升教学效果和帮助复习考试的关键在于能帮助学生更好地梳理整合知识,更好地分析思维案例,更好地理解把握要点,更好地构建知识体系。

微课与专题讨论结合方式在生理学教学中的探索

文章提出以学生为主体、以教师为主导的线上线下结合教学模式。该教学模式通过具体案例,从课前准备、课堂引导及课后巩固三方面,对如何在医学生理学理论教学中开展微课和专题讨论结合的教学方法进行了探索、总结和思考。微课和专题讨论结合的教学方法不仅能够激发学生学习兴趣,还可以培养学生的自主学习能力,加强学生的批判性科学思维能力以及提升学生的团队协作能力等。

黄连素调控肠道菌群缓解诱导性小鼠结肠炎

目的探讨黄连素对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导性小鼠结肠炎和肠道菌群的影响。方法40只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为4组即空白对照组(正常喂养,无菌水灌胃)、黄连素组(正常喂养,黄连素灌胃)、模型组(3%DSS喂养,无菌水灌胃)、黄连素治疗组(3%DSS喂养,黄连素灌胃);测量并记录4组体重和疾病活动指数(DAI);采用苏木精伊红(HE)染色观察结肠组织病理改变;利用16S核糖体RNA(rRNA)分析黄连素对肠道菌群的影响。结果与空白对照组比较,模型组小鼠体重显著降低(P<0.001),DAI显著增加(P<0.001)。与模型组比较,黄连素治疗组小鼠的体重减轻显著缓解(P<0.001),DAI评分显著降低(P<0.001)。HE结果显示,空白对照组和黄连素组小鼠的肠壁结构完整,而模型组小鼠结肠组织结构紊乱,腺体消失,可见大量炎症细胞浸润;与模型组比较,黄连素治疗组小鼠结肠黏膜肌层及肠腺排列较为完整,炎症细胞浸润较少,组织学评分显著降低(P<0.05)。rRNA分析结果显示,与空白对照组比较,模型组小鼠肠道菌群的α多样性显著降低(P<0.01),志贺杆菌和肠球菌的丰度显著增加(P<0.01)。与模型组比较,黄连素治疗组小鼠肠道菌群的α多样性显著增加(P<0.01),志贺杆菌和肠球菌的丰度显著降低(P<0.05)。结论黄连素可有效缓解DSS诱导的小鼠结肠炎。DSS诱导性结肠炎小鼠肠道菌群紊乱,黄连素治疗后可以恢复结肠炎小鼠肠道菌群的生物多样性,同时降低致病性志贺杆菌和肠球菌的丰度。

白藜芦醇对皮肤光老化的保护作用

目的探讨白藜芦醇对皮肤光老化的保护作用。方法将40只SD大鼠按随机数字表法分成5组:空白对照组、模型对照组、维生素E治疗组、白藜芦醇低剂量治疗组及白藜芦醇高剂量治疗组,每组8只。除空白对照组外其余各组大鼠制作光老化大鼠模型,空白对照组与模型对照组给予生理盐水20mL·kg-1,维生素E治疗组给予维生素E 30mg·kg-1,白藜芦醇低剂量及高剂量治疗组分别给予白藜芦醇10、60mg·kg-1,每日灌胃1次,共15周。比较各组大鼠皮肤病理学形态改变及对羟脯氨酸(Hyp)含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响。结果白藜芦醇高剂量治疗组、维生素E治疗组与模型对照组比较,SOD活性明显增高、羟脯氨酸含量显著增加,丙二醛含量显著降低(P<0.05)。HE病理切片显示白藜芦醇高剂量治疗组、维生素E治疗组较模型对照组皮肤有较大改善,接近正常皮肤组织形态。结论白藜芦醇可以提高光老化皮肤抗氧化物酶活性,改变氧化产物含量,达到抗皮肤光老化作用。

大蒜素调节Bcl-2/Bax促进宫颈癌U14细胞凋亡的研究

目的探讨大蒜素对小鼠宫颈癌U14细胞凋亡的影响及作用机制。方法体外培养U14细胞,将细胞分为对照组(不加大蒜素处理组)和大蒜素组(质量浓度分别为5、10和20mg.L-1)。采用四甲基偶氮噻唑蓝法测定大蒜素作用24、48、72h时对U14细胞的增殖抑制率;膜联蛋白A5-绿色荧光素/碘化丙啶双染法流式细胞术检测U14细胞的凋亡率;逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法分别检测U14细胞Bcl-2和Bax mRNA和蛋白的表达水平。结果 5、10和20mg.L-1大蒜素组对U14细胞增殖的抑制率:24h时分别为(6.6±1.41)%、(23.5±2.79)%和(58.9±1.65)%,48h时分别为(25.5±2.89)%、(47.9±8.78)%和(69.5±3.72)%,72h时分别为(58.9±1.66)%、(78.9±1.19)%和(92.6±7.33)%,均显著高于对照组(P<0.05),且细胞增殖抑制率呈浓度和时间依赖性。5、10和20mg.L-1大蒜素组作用24h后,细胞凋亡率分别为(9.22±0.55)%、(22.34±1.53)%和(35.73±1.98)%,与对照组的(3.23±0.35)%比较差异有统计学意义(P<0.05),且呈浓度依赖性。与对照组比较:10、20mg.L-1组Bcl-2mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05),而10、20mg.L-1组Bax mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05)。结论大蒜素可能通过上调Bax表达,下调Bcl-2的表达诱导U14细胞凋亡。

水通道蛋白5的表达与胃癌淋巴结转移的关系

目的:探讨人胃癌组织中水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)的表达及其与淋巴结转移之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测40例胃癌组织及相应癌旁正常组织中AQP5蛋白的表达。结果:AQP5蛋白在胃癌组织中表达高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(χ2=7.218,P<0.05);淋巴结转移阳性的胃癌组织中AQP5蛋白的表达高于淋巴结转移阴性的胃癌组织,差异有统计学意义(χ2=8.274,P<0.01);AQP5表达与胃癌淋巴结转移之间呈正相关(r=0.455,P<0.05)。结论 :AQP5可能参与胃癌的发生、发展和转移,是抗胃癌治疗的新靶标。

水通道蛋白5与肿瘤发生发展的关系

自DENKER等[1]在人红细胞膜上发现第1种水通道蛋白（aquaporin,AQP）即AQP1以来,迄今的研究已揭示,在哺乳动物中AQP是一个拥有13个成员的蛋白质大家族,分别被命名为AQP0～12。业已证实,AQP5是AQP家族的重要成员,参与了腺体分泌、水平衡等多种病理生理过程[2]。近年发现,AQP5在多种肿瘤组织或细胞中都呈异常表达,

宫颈癌U_(14)细胞正丁醇提取物脂质体瘤苗的制备及其诱导体液免疫反应观察

目的观察宫颈癌U14细胞抗原性瘤苗诱导的体液免疫效应。方法正丁醇法提取小鼠宫颈癌U14细胞表面抗原(CBE),包裹入阴离子脂质体制成CBE-脂质体瘤苗,腹腔接种免疫Km小鼠,用间接ELISA法检测血清抗CBE特异性抗体的产生情况。结果经CBE-脂质体瘤苗免疫的小鼠血清中有显著的抗CBE抗体生成,抗体滴度在末次免疫后的第14天开始升高,第21天达到高峰,至少保持到第28天。结论脂质体包裹的抗原性瘤苗应用于小鼠体内能诱导出更明显的体液免疫反应。

人AQP5真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达

目的构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒,观察水通道蛋白5(AQP5)基因在胃癌AGS细胞中的稳定表达。方法采用基因重组技术将人AQP5cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1/myc-His,构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒。脂质体介导空载体pcDNA3.1/myc-His和表达质粒pcDNA3.1-AQP5/myc-His分别转染人胃癌AGS细胞株,G418筛选,挑取阳性克隆,扩大培养,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)分别检测AQP5mRNA和蛋白表达。结果双酶切和基因测序结果均证实人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒构建成功。AQP5转染组与空白对照组、空载体组比较,AQP5mRNA表达显著增加(P<0.05),AQP5蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论成功构建人AQP5真核表达质粒并获得稳定表达AQP5基因的胃癌AGS细胞系,为进一步研究AQP5蛋白对胃癌恶性表型的影响奠定实验基础。

宫颈病变hTERC基因表达与人类乳头状病毒感染的相关性研究进展

宫颈癌是严重威胁我国妇女健康的主要恶性肿瘤之一,发病率居女性生殖系统恶性肿瘤之首。我国是宫颈癌的高发国家,每年仍然有新发病例10万左右,且近年来发病有明显年轻化趋势。

CRIM1通过激活ERK1/2-VEGF信号通路促进子宫颈鳞状细胞癌微血管生成

目的探讨CRIM1表达与子宫颈鳞状细胞癌微血管生成的关系及其分子机制。方法采用免疫组化MaxVision法检测并结合光密度分析CRIM1蛋白的组织表达;采用CD34内皮标记及Weinner计数法检测子宫颈鳞状细胞癌组织中的微血管密度(microvascular density,MVD)。通过真核表达质粒pCMV3-CRIM1转染子宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞获得CRIM1基因过表达;采用Western blot法检测癌细胞中p-ERK和VEGF的表达,并利用ERK抑制处理癌细胞,观察ERK信号抑制对VEGF表达的影响;通过ELISA法检测细胞上清液中VEGF蛋白含量。分别利用CCK-8实验和Matrigel管腔形成实验检测人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的增殖和管腔形成能力。结果子宫颈鳞状细胞癌组织中CRIM1表达水平(200039±163274.86)显著高于慢性子宫颈炎组织(28258.0±16606.04,P<0.001),且CRIM1表达与子宫颈鳞状细胞癌MVD呈正相关(r=0.546,P<0.01)。CRIM1基因转染诱导SiHa细胞VEGF表达水平升高(P<0.001),且细胞上清液中VEGF含量也升高(P<0.01)。CRIM1转染后的癌细胞上清液刺激下的内皮细胞增殖能力和管腔形成能力均显著增强。CRIM1基因转染诱导SiHa细胞p-ERK和VEGF蛋白表达上调,而ERK抑制剂(U0126)能显著抑制CRIM1诱导的VEGF上调。人重组蛋白CRIM1直接作用于SiHa细胞后,VEGF蛋白表达及上清液中VEGF含量无明显变化。结论CRIM1促进子宫颈鳞状细胞癌微血管生成,其机制可能与CRIM1激活ERK1/2-VEGF信号通路有关。

肾缺血再灌注损伤与核仁应激的相关性研究

目的:研究核仁应激是否参与了肾缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI),并进一步探索核仁应激的分子机制,为临床防治肾IRI提供新的靶点。方法:将48只雄性昆明小鼠根据肾脏缺血时间不同随机平均分为4组:对照(control)组(0 min)及IRI 30 min组、45 min组和60 min组,采用微创手术夹同时夹闭双侧肾动脉的方法建立急性肾IRI模型。24 h后取眼球血测定血尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)和血清肌酐(serum creatinine, SCr)浓度;取双肾计算肾系数;并采用HE染色观察肾组织病理学改变;提取肾皮质组织总蛋白和RNA进行Western blot及RT-qPCR检测,待测指标包括p53蛋白、45S pre-rRNA、18S rRNA、Bax mRNA和Bcl2 mRNA。结果:与control组相比,IRI组BUN和SCr浓度上升(P<0.01),肾系数及病理损伤范围增大(P<0.01);肾组织结构和功能损害与缺血时间呈正相关(r>0.80,P<0.01)。与control组相比,IRI组皮质细胞内p53蛋白含量显著增加(P<0.05),Bax mRNA表达上调(P<0.01),同时45S pre-rRNA、18S rRNA和Bcl2 mRNA含量下降(P<0.01)。结论:IRI造成的肾组织结构和功能损害可能与核仁应激密切相关。IRI可能通过阻碍rDNA转录导致核仁应激,从而激活下游p53诱导的细胞凋亡。

AMPK在器官纤维化中的研究进展

单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)是细胞内重要的能量感受器,在许多代谢相关性疾病如糖尿病、肥胖症和肿瘤的发生发展中具有重要作用。新近研究发现,AMPK在纤维化疾病中发挥重要作用。本文重点阐述AMPK在常见器官包括心脏、肺脏、肝脏和肾脏纤维化中的作用及其可能的分子机制,以期为靶向AMPK的抗纤维化治疗研究提供参考。

外泌体对前列腺癌诊断的研究进展

前列腺癌是世界范围内男性第二常见的癌症,虽然目前可通过前列腺特异性抗原筛查来诊断大多数前列腺癌,但其检测的特异性不足,而假阳性会导致不必要的活检,增加患者的痛苦与治疗费用。外泌体参与肿瘤的发生、发展、转移,外泌体中的信使RNA、微小RNA、非编码RNA、蛋白质、脂质等可以作为前列腺癌肿瘤标志物,通过检测尿液、血液等体液中的外泌体相关肿瘤标志物,能提高疾病的早期诊断。文章就外泌体的作用机制及其与前列腺癌诊断、治疗及预后的关系进行综述,以期为进一步寻找外泌体内容物中更多特异性高的肿瘤生物标志物提供参考。

细胞因子信号转导抑制分子3与肿瘤关系的研究进展

细胞因子与相应的受体结合可导致信号传导通路的活化,而将细胞因子的信号由胞膜传到胞浆并最终传至胞核,并引起目的基因的表达。已经发现的10余条细胞因子信号传导通路,其中Janus激酶/信号转导和转录激活子（JAK/STAT）系统涉及细胞因子的范围较为广泛。过去研究细胞因子信号的传入较多,较少观察这些信号是如何中止或衰减。

外泌体miRNA在心血管重构中的研究进展

作为一种纳米级囊泡结构,外泌体由多种细胞分泌且在细胞间的信息交流过程中发挥着关键作用,因此受到医学领域研究者的广泛关注。外泌体miRNA在血管重塑、心肌缺血、心肌肥厚等病理性心室重构过程中发挥重要作用。本文对外泌体的来源和功能以及其中的miRNA在病理性心血管重构形成过程中的作用作一综述,以探究外泌体在疾病发生发展中的具体机制,并为其在临床治疗中的应用提供理论基础。

CD_(44)v_6和MMP-9过表达与宫颈癌浸润转移的关系

目的:探讨粘附分子CD44v6和基质金属蛋白酶MMP-9在宫颈癌中的表达及其与宫颈癌浸润转移的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法检测CD44v6、MMP-9在10例正常宫颈组织(NCE)、18例宫颈上皮内瘤变(CIN)和37例宫颈浸润癌(ICC)中的表达情况,分析其表达与宫颈癌临床病理特征之间的关系以及CD44v6、MMP-9二者的相关性。结果:CD44v6与MMP-9的表达在ICC中最高,CIN中次之,NCE中最低;CD44v6、MMP-9的表达在淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P<0.O5),间质浸润深组明显高于间质浸润浅组(P<0.O5);CD44v6与MMP-9两者在宫颈癌中的表达呈正相关,其共同高表达者发生间质浸润深层和淋巴结转移的几率明显高于仅其中之一阳性表达或皆为阴性表达者。结论:CD44v6、MMP-9阳性表达率随正常宫颈组织-宫颈上皮内瘤变-宫颈癌的转化而增加;CD44v6、MMP-9的过表达可能促进宫颈癌浸润和淋巴结转移,且二者在宫颈癌浸润转移过程中相互关联、协同作用。

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对大鼠不同脏器的损伤

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对大鼠各组织器官造成的损伤。方法选用雄性Wistar大鼠50只,随机分为5组,每组10只,以灌胃方式染毒DEHP,4个染毒组剂量分别为1500、3000、4500、6000mg/kg,阴性对照组每天灌胃相同体积的食用油,各组每4d称重1次,28d后称重处死,计算脏器系数,并做病理学检查。结果4个染毒组随DEHP浓度的升高,其体重均数有依次降低的趋势,各染毒组大鼠体重均数普遍低于溶剂对照组(P<0.05,P<0.01),4500和6000mg/kg组大鼠染毒24d后,出现了体重停止增长且有体重减轻的现象;大鼠肝脏、肾脏、心脏的脏器系数均高于对照组(P<0.05,P<0.01),而睾丸脏器系数则均低于对照组(P<0.05,P<0.01);同时大鼠肝脏、肾脏、心脏、睾丸在镜下观察均有不程度的损伤,并随着DEHP浓度的逐渐增高,各脏器损伤的程度也随之加重。结论DEHP对大鼠的脏器可造成一定程度的损伤,并随染毒剂量的增加有加重的趋势。