自发性高血压大鼠心肌纤维化时序动态变化

目的观测自发性高血压大鼠心肌纤维化时序动态变化。方法纳入4周龄SPF级雄性自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)45只、京都种Wistar大鼠(Wistar Kyoto rats,WKY)35只,随机分笼饲养至42周,分别于预设时点尾套法监测收缩压,超声心动图监测心脏结构与功能;解剖大鼠心脏标本并计算左室质量指数(left ventricular mass index,LVMI),Masson染色观测左室组织纤维化,qRT-PCR检测左室组织纤维化相关基因TGF-β_(1)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原。结果6~12周SHR收缩压快速上升,12周时明显高于WKY(P<0.05),此后SHR血压趋于平稳并维持高位。伴随血压及鼠龄变化,SHR左室结构相关指标室间隔厚度(interventricular septal thickness,IVST)、左室后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness,LVPWT)、LVMI均呈现特征性动态变化。SHR胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF)随鼠龄增长逐渐增加,12周开始即显著高于WKY(P<0.05)。SHR左室心肌纤维化相关基因TGF-β_(1)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达均呈现随鼠龄增长先降后升变化,且32周后大幅上调。结论SHR心肌纤维化伴随鼠龄及血压变化不断发展演变,并从结构到功能,宏观入微观均呈现出时序动态特征性改变。

PWV/ABI及IMT与冠心病相关性研究进展

冠心病是动脉粥样硬化(AS)导致器官病变最常见、最重要的类型,也是严重危害人民健康的常见病,在我国,近年来呈增长趋势。冠心病的早期检测对于冠心病的治疗和预防有着重大的意义。冠心病的相关检查方法很多,而动脉脉搏波速(PWV)、踝臂指数(ABI)及颈动脉内膜中层厚度(IMT)在冠心病的检测中,以其自身的优势得到了很大的发展。

突变型PUMA(S10A)对Hela细胞的凋亡作用及其分子机制

目的观察突变型PUMA和野生型PUMA对Hela细胞在促凋亡及抑制肿瘤细胞增殖方面的生物学功能差异,并探讨导致这些差异的分子机制。方法实验随机分为:空载体质粒组、野生型PUMA组、突变型PUMA 3个实验组,应用脂质体转染方法分别将空载质粒、野生型PUMA质粒、突变型PUMA质粒转染Hela细胞中,转染24、48 h后用实时定量PCR和Western blot法检测各组PUMA表达情况;野生型实验组和突变型实验组分别加入蛋白质合成抑制剂放线菌酮后,Western blot法检测PUMA蛋白的表达;MTT及流式细胞术检测野生型PUMA与突变型PUMA对细胞增殖抑制和促凋亡作用。结果在相同转染效率的情况下,通过Western blot法分析野生型PUMA组和突变型PUMA组的表达水平,结果表明突变型PUMA蛋白比野生型PUMA蛋白有一个更高的稳定状态。转染24 h后诱导表达野生型和突变型的PUMA细胞中均加入放线菌酮,结果表明,突变型PUMA蛋白降解延迟、半衰期延长;光密度值测定结果显示细胞转染两种质粒后,细胞存活率随着时间的延长逐渐下降,且转染突变型PUMA质粒在24、48 h的存活率均比野生型PUMA组低(P<0.05,P<0.01);流式细胞术结果显示,随着PUMA转染时间的增加,野生型和突变型两组肿瘤细胞的凋亡率均逐渐升高,并且突变型组细胞比野生型组细胞的凋亡率增加更加明显(P<0.05,P<0.01)。结论 PUMA具有抑制Hela细胞增殖、促进其凋亡的作用,而其10号位的丝氨酸被丙氨酸取代后增加了突变型PUMA的稳定性、延长了其半衰期,导致突变型比野生型PUMA对Hela细胞的抑制作用及促凋亡功能得到加强。