BMP-2对ECV304细胞内皮-间质转化功能的影响

目的研究骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对ECV304细胞内皮-间质转化(EndMT)的影响,并探讨其可能的机制。方法构建慢病毒载体并转染肝癌HepG2细胞,Real-Time PCR与Western blot检测转染效率,转染后的HepG2细胞与ECV304细胞共培养。实验分为上调组(BMP-2表达水平上调的HepG2细胞)、正常组(BMP-2表达水平正常的HepG2细胞)、下调组(BMP-2表达水平下调的HepG2细胞)、Normal组(与正常组HepG2细胞共培养的ECV304细胞)、LV组(LV组,与下调组HepG2细胞共培养的ECV304细胞)和Overexpression-LV-BMP-2组(OE组,与上调组HepG2细胞共培养的ECV304细胞)。Western blot分析EndMT标志物(CD31、VE-Cadherin、FSP-1和a-SMA)的表达水平,抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路后观察EndMT标志物的表达水平。结果 Real-Time PCR与Western blot结果显示,与正常组比较,下调组BMP-2 mRNA与蛋白的表达水平降低( P <0.05),上调组HepG2细胞BMP-2 mRNA与蛋白的表达水平增加( P <0.05);与Normal组比较,OE组ECV304细胞内皮相关蛋白(VE-Cadherin、CD31)表达降低及间质相关蛋白(FSP-1、a-SMA)表达增加,LV组ECV304细胞内皮相关蛋白(VE-Cadherin、CD31)表达增加及间质相关蛋白(FSP-1、a-SMA)表达降低( P <0.05);给予PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂LY294002后,VE-Cadherin、CD31表达增加,FSP-1、a-SMA表达降低。结论 BMP-2通过PI3K/AKT/mTOR信号通路促进ECV304细胞的EndMT。

下调MLLT3/AF9基因对肝癌SMMC-7721细胞增殖与侵袭能力的影响

目的本文旨在研究组蛋白甲基转移酶MLLT3/AF9在人肝癌组织中的表达,观察体外下调MLLT3/AF9的表达对肝癌SMMC-7721细胞增殖与侵袭能力的影响。方法应用Real-time PCR技术检测100例肝癌组织、癌旁组织和肝癌细胞系SMMC-7721、HepG2、Hu7、BEL-7402中MLLT3/AF9基因的表达水平;应用RNA干扰下调MLLT3/AF9的表达,采用CCK-8、Transwell实验和划痕实验检测MLLT3/AF9下调组和对照组SMMC-7721细胞的增殖及侵袭能力。结果 Real-time PCR检测结果显示肝癌组织中的MLLT3/AF9基因的表达量显著高于癌旁组织;Real-time PCR和Western blot检测到LVMLLT3-RNAi组中MLLT3/AF9 mRNA和蛋白的表达水平都降低,CCK-8、Transwell和划痕实验结果显示LV-MLLT3-RNAi组细胞的增殖和侵袭能力降低。结论 MLLT3/AF9在肝癌组织中表达水平明显升高,体外下调MLLT3/AF9的表达可以有效抑制肝癌SMMC-7721细胞的增殖与侵袭。

骨形态发生蛋白受体Ⅱ对肝癌细胞增殖与侵袭的影响

目的探讨骨形态发生蛋白受体Ⅱ(bone morphogenetic protein receptorⅡ,BMPR-Ⅱ)对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其可能的机制。方法构建BMPR-Ⅱ过表达载体(overexpression-LV-BMPR-Ⅱ组)和BMPR-ⅡsiRNA干扰表达载体(LV-SH-BMPR-Ⅱ组),同时设立BMPR-Ⅱ过表达阴性对照组(overexpression-LV-CON组)与BMPR-ⅡsiRNA干扰表达阴性对照组(LV-SH-CON组),分别转染人肝癌Hep G2细胞,使用Real-time PCR和Western blot技术检测转染后的Hep G2细胞BMPR-ⅡmRNA与蛋白的相对表达量,采用CCK-8、Transwell实验检测4组Hep G2细胞的增殖和侵袭能力,通过Western blot检测PI3K/AKT/m-TOR信号通路相关蛋白的表达水平。结果 BMPR-ⅡmRNA和蛋白表达水平、Hep G2细胞的增殖和侵袭能力及p-PI3K、p-AKT、pm-TOR蛋白表达水平,overexpression-LV-BMPR-Ⅱ组较overexpression-LV-CON组均显著增加(P<0.05),LVSH-BMPR-Ⅱ组较LV-SH-CON组均显著减少(P<0.05)。结论 BMPR-Ⅱ通过上调PI3K/AKT/m-TOR信号通路促进肝癌HepG2细胞增殖和侵袭能力。

乳腺癌改良根治术后内乳淋巴结放疗患者VMAT与IMRT计划剂量学比较

目的探讨容积调强弧形治疗(VMAT)和固定野动态调强放疗(IMRT)在左侧乳腺癌改良根治术后需辅助放疗并内乳淋巴结照射患者的剂量学差异。方法对20例左侧乳腺癌患者制定VMAT和IMRT两种放疗计划。通过剂量体积直方图计算靶区和危及器官剂量学参数。对分类变量行χ^2或Fisher′s精确概率法检验,连续变量根据正态性采用配对t检验或秩和检验。结果IMRT靶区均匀性指数比VMAT高(P<0.05)。VMAT治疗时间较IMRT更短(P<0.01)。VMAT患侧肺V20Gy、V30Gy优于IMRT(P<0.05)。VMAT在冠脉左前降支Dmean、Dmax和心脏V30Gy、V40Gy、Dmean、Dmax优于IMRT(P<0.01)。食管DmeanVMAT优于IMRT(P<0.05),但健侧肺V5Gy、V10Gy和食管DmaxIMRT优于VMAT(P<0.05)。结论VMAT可以显著减少心脏、健侧肺、脊髓、食管照射剂量,缩短治疗时间。对于左侧乳腺癌根治术后需辅助放疗并照射内乳淋巴结的患者,VMAT技术比IMRT技术可以更好保护正常组织。