氯离子参与心肌细胞缺氧复氧损伤机制的研究

目的研究氯离子参加心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的机制。方法采用原代培养新生大鼠的心肌细胞A/R损伤模型,去除细胞外的氯离子(Cl--free),或分别给予Na+-K+-2Cl-共同转运体阻断剂bumetanide,Cl-/HCO3-离子交换系统抑制剂SITS和氯通道阻断剂9-AC,观察细胞存活率、MDA含量、LDH、SOD、GSH-Px酶活性变化及细胞内的钙含量、NF-κB活性变化。结果A/R组与对照组比,MDA含量、LDH活性、细胞内的钙含量、NF-κB活性升高,细胞存活率、SOD、GSH-Px活性降低;bumetanide及9-AC组与A/R组比,各项指标无统计学意义。Cl--free、SITS处理后较A/R组,MDA含量、LDH活性、细胞内的钙含量、NF-κB活性降低,而细胞存活率、SOD、GSH-Px明显升高。结论Cl-/HCO3-离子交换系统在心肌细胞A/R损伤中起了重要作用,Cl-参与心肌A/R损伤的机制与钙超载及NF-κB活性升高有关。

Pim-3对抗心肌细胞缺氧／复氧损伤的研究

目的研究原癌基因Pim-3对心肌细胞急性缺氧/复氧(A/R)损伤的保护作用。方法采用原代培养新生大鼠的心肌细胞A/R损伤和缺氧预适应(APC)保护模型,将已经构建好的pEGFP-N2/Pim-3质粒导入原代培养的乳鼠心肌细胞中,实验结束后测定Pim-3mRNA及蛋白表达水平(RT-PCR、Western blot法)的改变,同时检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、四唑盐(MTT)比色试验测定细胞存活率、TUNEL法检测细胞凋亡。结果RT-PCR和Western blot结果显示,Pim-3在正常组几乎不表达,A/R组表达明显升高,缺氧预适应(APC)+A/R组表达则进一步升高;转染pEGFP-N2/Pim-3质粒后24h,荧光倒置显微镜显示转染效率达30%;在A/R损伤后,Pim-3基因转染组较未转染组的心肌细胞LDH值明显降低,细胞存活率则明显升高,心肌细胞的凋亡指数明显下降。结论在细胞水平,Pim-3参与心肌APC保护作用,导入外源性的Pim-3基因能对抗急性A/R损伤。

PPARγ介导卡托普利改善高糖诱导血管内皮细胞胰岛素抵抗的作用

目的研究卡托普利(captopril,Cap)对高糖(high glucose,HG,33 mmol·L-1)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelium cells,HUVECs)胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的作用及机制。方法首先观察Cap对HG(33 mmol·L-1)诱导的HUVECs IR的改善作用。实验随机分为5组,即正常对照(Control)组、IR组、IR+CapⅠ(1×10-6mol·L-1)组、IR+CapⅡ(1×10-5mol·L-1)组、IR+CapⅢ(1×10-4mol·L-1)组。其次证实Cap改善HG(33mmol·L-1)诱导HUVECs IR的作用是由PPARγ介导。实验随机分为6组,即Control组、IR组、IR+Cap(1×10-5mol·L-1)组、PPARγ抑制剂GW9662(PI,1.0μmol·L-1)组、IR+PPARγ抑制剂(IR+PI,1.0μmol·L-1)组、IR+Cap+PPARγ抑制剂(IR+Cap+PI,1.0μmol·L-1)组,除Control组和PI组外,所有各组先用含33 mmol·L-1葡萄糖的DMEM培养48 h,Cap各组再加不同浓度的Cap处理4 h,最后胰岛素(100 nmol·L-1)处理30 min,抑制剂组再加抑制剂(1.0μmol·L-1)处理1 h,最后进行指标检测。结果 IR组NO水平明显降低、ET-1含量明显升高,提示细胞已产生IR,但PPARγmRNA和蛋白表达水平与Control组相比差异无统计学意义(P>0.05);Cap呈浓度依赖性逆转HG诱导NO和ET-1水平的改变,明显增加磷酸化PPARγ(PPPARγ)水平,说明其可明显改善HG诱导的IR,但对PPARγmRNA和蛋白表达水平无明显影响(vs IR,P>0.05);加PI处理后,Cap改善IR的作用完全取消,提示Cap改善IR的作用是由PPARγ介导。结论Cap可通过PPARγ介导改善高糖所致血管内皮细胞IR,其机制可能与PPARγ表达水平无关,而与PPARγ激活有关。

人PPARγ基因过表达重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的构建人的过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)基因的重组腺病毒载体。方法从人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中提取并扩增人PPARγcDNA目的片段,将该目的片段经AgeⅠ/NheⅠ酶切后插入经相同内切酶酶切后表达质粒(CMV-MCS-SV40-EGFP)得到重组穿梭质粒;再将该重组穿梭质粒与AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒(pBHG loxΔE1,3Cre)经Cre/loxP酶切重组,构建重组腺病毒(Ad-PPARγ);最后,将Ad-PPARγ感染HEK293T细胞,进行病毒的包装、扩增、纯化及滴度检测。结果通过PCR鉴定及基因测序分析,PPARγ过表达重组腺病毒载体构建成功;Western blot结果显示经包装及纯化的Ad-PPARγ感染HUVECs后,可显著上调HUVECs中PPARγ基因的表达。结论PPARγ过表达重组腺病毒载体构建成功,且能有效上调HUVECs中PPARγ基因的表达。

Cx43对脑胶质瘤C6细胞增殖的影响及机制

目的将p CMV-Cx43c DNA重组质粒转染入大鼠脑胶质瘤C6细胞,上调C6细胞Cx43表达,进而探讨C6细胞Cx43过表达对其增殖能力的影响及机制。方法通过脂质体将p CMV-Cx43c DNA重组质粒转入C6细胞,使C6细胞过表达Cx43,并用G418筛选出稳定过表达Cx43的C6细胞;测定细胞倍增时间和软琼脂集落形成实验,检测各组细胞的增殖程度;分别用ERK1/2特异性阻断剂PD98059(30μmol·L^(-1))、p38MAPK特异性阻断剂SB20219(10μmol·L^(-1))处理各组细胞,Western blot检测各组细胞Cx43、p-Cx43、pERK1/2和p-p38MAPK的表达;MTT比色法检测各组细胞活性。结果成功将p CMV-Cx43c DNA重组质粒转入C6细胞,并筛选出稳定转染Cx43基因的C6细胞;测定细胞倍增时间和软琼脂集落形成实验表明C6-Cx43组比C6组、C6-p CMV组细胞增殖速度减慢,细胞集落数明显减少(P<0.01);ERK1/2、p38MAPK特异性阻断剂处理细胞后,Western blot检测发现C6-Cx43+PD98059组、C6-Cx43+SB202190组较C6-Cx43组Cx43表达升高(P<0.01)、pCx43(P<0.05)表达下调。结论阻断ERK1/2、p38MAPK通路,导致Cx43蛋白表达升高,从而抑制C6细胞的增殖。

柚皮苷对高糖诱导的血管内皮细胞损伤及PI3K/AKT/eNOS信号通路的影响

目的:研究柚皮苷(naringin,Nar)对高糖(high glucose,HG)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的作用及对PI3K/AKT/e NOS信号通路的影响。方法:利用HG(33 mmol/L glucose)培养基孵育HUVECs不同时间(6、12、24、48、72 h)后,用胰岛素(5 m IU/L)刺激细胞15 min,建立内皮细胞损伤模型,分别测定各组上清液中NO水平、细胞中e NOS和磷酸化e NOS(p-e NOS)的水平。对损伤的HUVECs用不同浓度的Nar(5、10、25、50、100 mg/L)孵育不同时间(6、12、24、48和72 h),用胰岛素(5 m IU/L)刺激细胞15min,检测细胞上清中的NO水平,观察Nar对HG诱导HUVECs损伤的作用。对损伤细胞先分别用PI3K抑制剂LY294002(10μmol/L)和AKT抑制剂AKT inhibitorⅣ(0.5μmol/L)预处理24 h,再用50 mg/L的Nar处理24 h,用胰岛素(5 m IU/L)刺激细胞15 min,检测细胞上清中NO的水平,以及e NOS、p-e NOS、PI3K、AKT及p-AKT的蛋白水平,探讨Nar减轻HG对HUVECs损伤作用的机制。结果:Nar的量效和时效结果显示,50 mg/L Nar预处理HUVECs 24 h后,其减轻HG对HUVECs损伤的作用最为显著,表现为NO和p-e NOS的水平升高(P<0.05)。加入PI3K和AKT抑制剂后,Nar减轻HG致内皮细胞的损伤及上调p-e NOS和NO水平的作用完全取消(P<0.05)。结论:Nar能减轻HG诱导的血管内皮细胞损伤,其作用机制可能是通过PI3K/AKT/e NOS信号通路介导的。

ox-LDL对血管内皮细胞促聚集和促黏附相关分子表达的影响

目的观察血管内皮细胞在不同浓度的氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导及诱导不同时间后内皮细胞促聚集和促黏附活性的动态改变及可能机制。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)株接种在6孔培养板,分别加入不同浓度的ox-LDL(50、100和200 mg/L)并孵育不同时间(12、24和48 h)。放射免疫法测定细胞上清液中前列环素(PGI2)和血栓素A2(TXA2)含量;Western blot检测HUVEC中组织因子(TF)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的表达。结果量效关系显示,ox-LDL预处理HUVEC 24 h后,ox-LDL呈浓度依赖性促进HUVEC聚集,表现为PGI2/TXA2比值显著下降(P<0.05或P<0.01);时效关系显示类似的结果,但以24 h作用最为显著;同时,TF的表达随浓度的升高呈升高趋势。此外,ox-LDL还促进HUVEC黏附,表现为ICAM-1和VCAM-1呈浓度依赖性升高。结论 ox-LDL可增强HUVEC促聚集和促黏附活性,其机制可能与其分泌的PGI2/TXA2下降及上调TF、ICAM-1和VCAM-1的表达有关。

基于VDAC1/mPTP调节机制探讨葛根素抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究葛根素(puerarin,Pue)抗心肌缺血/再灌注损伤作用,及其可能涉及的线粒体机制。方法建立H9c2心肌细胞缺氧/复氧(anoxia/reoxygenation,A/R)损伤模型。构建VDAC1重组质粒pFLAG-VDAC1。细胞随机分为4组,正常对照组(Control)、缺氧/复氧组(A/R)、葛根素组(Pue+A/R)、VDAC1高表达组(pFLAG-VDAC1-葛根素),采用Real-time PCR法检测VDAC1 mRNA的表达情况,Western blot法检测其蛋白水平。流式细胞术观察线粒体膜电位(Δψm)和细胞凋亡,自动生化分析仪检测LDH、CK活性,线粒体肿胀实验检测各组细胞线粒体通透性转换孔道(mitochondria permeability transition pore,mPTP)的开放情况。结果与Control组相比,A/R组VDAC1 mRNA及蛋白表达水平均上调,LDH、CK水平升高,Δψm崩溃,mPTP开放,细胞凋亡明显增多。葛根素预处理则可下调VDAC1表达,维持Δψm,防止mPTP开放,减少细胞凋亡。转染VDAC1高表达载体pFLAG-VDAC1,可取消葛根素的保护作用。结论葛根素抗A/R损伤作用与VDAC1密切相关,其可通过下调VDAC1,防止mPTP开放,从而减少细胞凋亡,保护心肌细胞。

ox-LDL诱导泡沫细胞形成中AnnexinⅡ的表达改变及意义

目的观察AnnexinⅡ在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导泡沫细胞形成中表达的改变及其与细胞内胆固醇酯(CE)/总胆固醇(TC)比值(CE/TC)改变的相关性,从而探讨AnnexinⅡ在ox-LDL诱导泡沫细胞形成中的意义。方法常规培养RAW264.7单核细胞株,待细胞长至90%汇合度时,分别加入不同浓度的ox-LDL(50、100、200 mg/L)孵育24 h,以未经氧化修饰的天然低密度脂蛋白(n-LDL,200 mg/L)为阴性对照,测定细胞内TC和CE含量,油红O染色鉴定泡沫细胞;比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释出量和MTT法检测细胞存活率来观察oxLDL对细胞的毒性作用;RT-PCR和Western blot检测AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达水平。结果不同浓度的oxLDL(50、100、200 mg/L)孵育24 h,仅200 mg/L ox-LDL组细胞活力显著降低,LDH释出量显著升高,与n-LDL(200mg/L)组比较差异具有显著性(P<0.01),50 mg/L和100 mg/L ox-LDL对细胞活力和LDH释出量无显著影响(P>0.05);CE/TC比值分别是55.0%±6.7%、61.8%±4.8%和59.6%±5.2%,与n-LDL(200 mg/L)组比较差异均具有显著性(P<0.05),其中浓度为100 mg/L的ox-LDL作用最显著;ox-LDL呈浓度依赖性抑制AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达,AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达改变与CE/TC比值呈负相关(r_1=-0.9374,P<0.05;r_2=-0.9548,P<0.05)。结论 ox-LDL呈浓度依赖性抑制AnnexinⅡ表达,提示其可能影响细胞内胆固醇自平衡从而诱导泡沫细胞形成。

菌药共孵育-平皿法检测虎杖体外抑菌活性

目的探讨菌药共孵育-平皿法在虎杖提取液体外抑菌活性检测中的应用效果。方法采用菌药共孵育-平皿法检测虎杖提取液对金色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌的体外最小抑菌浓度(MIC)及出现明显抑菌作用所需的共孵育时间。结果虎杖提取液对金色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌均具有不同程度的抑菌作用,其MIC分别为12.5、25.0、25.0、50.0g·L^(^(-1));出现明显抑菌作用所需的共孵育时间分别为8、8、8、12h。结论虎杖提取液在体外具有明显的抑菌作用;菌药共孵育-平皿法模拟了虎杖体内抗菌环境,具有准确、快速、可靠的优点,可作为常规抗菌药物的体外抑菌实验方法。

白脂素对高浓度葡萄糖诱导心肌细胞损伤的保护作用及机制

目的探讨白脂素(ASP)对高浓度葡萄糖(HG)诱导的心肌细胞(H9C2)损伤的保护作用及机制。方法建立HG诱导H9C2损伤模型。实验分为正常对照组(Ctrl,5.5 mmol·L^(-1))、高浓度葡萄糖组(HG,50 mmol·L^(-1))、Ctrl+ASP(20 nmol·L^(-1))组和HG+ASP(20 nmol·L^(-1))组。Ctrl组和Ctrl+ASP组细胞先用含正常浓度葡萄糖(5.5 mmol·L^(-1))的完全培养基处理36 h,HG组和HG+ASP组则先用含葡萄糖50 mmol·L^(-1)的完全培养基处理36 h,36 h后将各组培养基均换成正常葡萄糖浓度的完全培养基;除Ctrl组和HG组外,其余2组分别加入20 nmol·L^(-1)的ASP继续培养24 h。处理结束后收集细胞和上清液,采用CCK8检测分析各组细胞活力,使用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)等指标,Western blotting和RT-PCR检测各组细胞SOD、GSH-PX蛋白及mRNA表达量,荧光倒置显微镜检测ROS水平。结果当用葡萄糖浓度为50 mmol·L^(-1)的培养基处理细胞时,细胞活力下降,LDH活性升高,与Ctrl组比较,差异有统计学意义(P<0.05),表明损伤模型建立成功;与HG组相比,HG+ASP组的细胞活力升高,LDH活性和MDA含量下降,SOD和GSH-PX的表达和活性均显著升高,ROS水平显著下降(均P<0.05)。结论ASP对HG诱导的H9C2损伤具有保护作用,其机制主要通过对抗ROS介导的氧化应激来实现。

金雀异黄酮调节小鼠成骨细胞和破骨细胞的介导受体研究

目的探讨金雀异黄酮(GEN)对小鼠成骨细胞和破骨细胞的调节效应是否由雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)所介导。方法对小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7、小鼠成骨细胞株MC3T3-E1进行体外诱导培养。将传至第3代的细胞随机分为8组:CON组(正常对照组)细胞未做任何处理,低剂量GEN组、中剂量GEN组、高剂量GEN组分别给予浓度为1×10^(-9)、1×10^(-8)、1×10^(-7) mol·L^(-1)的GEN孵育处理细胞,中剂量GEN+MPP组、中剂量GEN+PHTPP组分别给予浓度为1×10-8 mol·L^(-1)的GEN和浓度为1×10^(-8) mol·L^(-1)的MPP、PHTPP孵育处理细胞,MPP组、PHTPP组分别给予浓度为1×10^(-8) mol·L^(-1)的MPP、PHTPP孵育处理细胞。对各组细胞分别采用ALP染色、茜素红染色、TRAP染色及进行骨吸收陷窝实验。结果 ALP染色结果显示,CON组和低剂量GEN组ALP阳性细胞数无明显差异;中剂量GEN组ALP阳性细胞数较CON组多;高剂量GEN组、MPP组和PHTPP组ALP阳性细胞数均较CON组少;中剂量GEN+MPP组、中剂量GEN+PHTPP组ALP阳性细胞数较MPP组、PHTPP组均有明显增多。TRAP染色结果显示,低剂量GEN组、中剂量GEN组、高剂量GEN组TRAP阳性细胞数均较CON组有明显减少;MPP组、PHTPP组TRAP阳性细胞数与CON组比较均无明显变化;中剂量GEN+MPP组与MPP组比较TRAP阳性细胞数无明显差异;中剂量GEN+PHTPP组与PHTPP组比较TRAP阳性细胞数明显减少。茜素红染色结果与ALP染色结果一致,骨吸收陷窝实验结果与TRAP染色结果一致。结论 GEN的促小鼠成骨细胞MC3T3-E1分化是由ERα、ERβ所共同介导,而抑制小鼠RAW264.7诱导的破骨细胞的形成主要由ERα介导。

葛根素对铁过载诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨葛根素(Pue)对铁过载诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用.方法将体外培养的HUVECs分为7组:正常对照组(Control组),未给予任何处理;IRON组,单独给予右旋糖酐铁50μmol处理;不同剂量Pue+IRON组,给予不同剂量(20、40、80、160和320μmol)Pue联合右旋糖酐铁50μmol处理.各组细胞培养24h后,采用MTS比色法检测HUVECs的存活率,采用分光光度计法检测HUVECs的乳酸脱氢酶(LDH)的活性.结果与Control组比较,IRON组和各剂量Pue+IRON组细胞存活率均显著降低(均P<0.01),而LDH活性均显著升高(均P<0.01);与IRON组比较,各剂量Pue+IRON组细胞存活率均显著升高(均P<0.01),而LDH活性均显著降低(均P<0.01).结论Pue对铁过载所致的HUVECs损伤具有明显的保护作用.

白脂素通过AC-cAMP通路调控血管内皮细胞功能

目的探讨白脂素(asprosin,ASP)是否通过腺苷酸环化酶(AC)-环磷酸腺苷(cAMP)通路调控血管内皮细胞功能。方法实验1将80%融合的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分别加入不同浓度(10、50、100 nmol·L^(-1))的ASP,Ctrl组则加入等体积的PBS,各组分别处理48 h。实验2分为Ctrl组、ASP组、AC抑制剂SQ22536(SQ)组、SQ+ASP组,以ASP 50 nmol·L^(-1)、SQ 0.25μmol·L^(-1)为作用浓度。CCK-8法检测细胞增殖活性,划痕实验和Transwell实验检测血管内皮细胞迁移和浸润侵袭能力;体外成管实验检测血管新生能力;RT-qPCR检测mRNA表达水平;硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)含量;Western blotting检测血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF受体2(VEGFR2)和p-eNOS/eNOS的蛋白水平。结果与Ctrl组相比,50、100 nmol·L^(-1) ASP作用48 h血管内皮细胞的增殖活性可显著增强(P<0.01),血管内皮细胞迁移率、浸润侵袭能力和成管能力均显著提高(P<0.01);VEGF和VEGFR2的mRNA和蛋白水平、p-eNOS/eNOS比率及NO水平均有显著增加(P<0.01,P<0.05);10 nmol·L^(-1) ASP处理时,上述指标无显著变化(P>0.05)。使用SQ处理细胞后,与ASP组比较,SQ+ASP组的VEGF和VEGFR2表达量、p-eNOS/eNOS和NO水平均降低(P<0.01,P<0.05)。结论生理浓度的ASP对血管内皮细胞的增殖、迁移和血管新生无显著影响,但超生理浓度的ASP可促进血管内皮细胞的增殖、迁移和血管新生,其机制可能通过AC-cAMP通路介导调控血管内皮细胞的功能。

去泛素连接酶USP9X通过调控FOXM1介导糖酵解影响鼻咽癌细胞增殖的机制研究

目的:探讨去泛素连接酶USP9X(deubiquitin ligase 9X)是否通过调控叉头框蛋白M1(forkhead box M1,FOXM1)介导糖酵解从而影响鼻咽癌细胞的增殖能力。方法:采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测鼻咽癌组织和正常鼻黏膜组织以及鼻咽癌细胞中USP9X mRNA和蛋白的表达情况。通过病毒感染的方法将携带有特异性针对USP 9X基因的shRNA(shUSP9X)和携带有USP9X全基因的重组质粒Flag-USP9X(过表达USP9X)分别转入鼻咽癌CNE2和HNE2细胞,采用CCK-8法检测沉默或过表达USP 9X基因对鼻咽癌细胞增殖的影响,通过对细胞能量代谢和细胞外酸化率(extracellular acidification rate,ECAR)的检测分析对鼻咽癌细胞糖酵解能力的影响。通过ubibrowser_v3/数据库、免疫共沉淀和ZDOCK软件分析USP9X与FOXM1蛋白的结合情况,并通过泛素化实验观察沉默USP9X对FOXM1蛋白泛素化水平的影响;随后进一步通过实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测对FOXM1 mRNA和蛋白表达的影响。最后,采用慢病毒感染的方法在沉默USP9X表达的CNE2细胞中同时转入重组载体Flag-FOXM1恢复FOXM1的表达,再通过CCK-8法、细胞能量代谢和ECAR检测分析上调FOXM1对CNE2细胞增殖和糖酵解能力的影响。结果:与正常鼻黏膜组织相比,鼻咽癌组织中USP9X mRNA和蛋白的表达水平均显著提高(P均<0.05)。下调鼻咽癌CNE2细胞中USP9X的表达水平后,CCK-8法、细胞能量代谢检测和ECAR实验检测发现,CNE2细胞的增殖和糖酵解能力均被明显抑制(P均<0.05)。相反,上调HNE2细胞中USP9X的表达水平后,HNE2细胞的增殖和糖酵解能力均被明显提高(P均<0.05)。通过ubibrowser_v3/数据库、免疫共沉淀和ZDOCK软件证实,USP9X与FOXM1蛋白存在相互结合的关系,CNE2细胞中沉默USP9X表达水平可显著增加FOXM1的泛素化水平。在低表达USP9X的CNE2细胞中过表达FOXM1可恢复鼻咽癌细胞的增殖和糖酵解能力(P均<0.05)。结论:去泛素连接酶USP9X通过抑制FOXM1泛素化降解进而提高鼻咽癌细胞的糖酵解能力,最终促进鼻咽癌细胞的增殖。USP9X可能是鼻咽癌治疗上一个潜在的新靶点。

缝隙连接蛋白43在肺动脉高压中作用的研究进展

缝隙连接(GJ)是胞膜上由连接蛋白组成的微通道,允许离子、第二信使和质量为1k Da的小分子代谢物自由通过,是细胞间信息快速传递的重要途径。在肺中,连接蛋白参与各种生理功能,例如组织稳态和宿主防御。缝隙连接蛋白在多种肺部炎症性疾病中发挥着重要作用,如肺动脉高压。在肺部炎症性疾病中,连接蛋白表达的改变可破坏正常细胞间通信途径,从而导致各种病理生理学状态,例如炎症或组织反应性改变和重构。在血管平滑肌细胞(VSMC)表型改变过程中,缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达显著增加。此外,病变血管中Cx43的大小、数量、分布和结构也可能发生改变,即Cx43重构。越来越多的证据表明,Cx43重构参与肺动脉高压的形成过程。本文对Cx43在血管中的分布、Cx43的调节、Cx43与肺动脉高压的关系做简要综述,来表明Cx43可能是肺动脉高压治疗新的潜在靶点。

脂氧素A_4受体激动剂BML-111对大鼠肝纤维化模型氧化/抗氧化平衡的影响

该文探讨了脂氧素A4受体激动剂BML-111[5(S),6(R),7-trihydroxyheptanoic acid methyl ester]对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型氧化和抗氧化平衡的影响。40只SD(Sprague-Dawley)大鼠皮下注射40%CCl4以建立肝纤维化模型,干预处理为在不同时间段皮下注射1 mg/kg BML-111。经不同的方式处理过的40只SD大鼠被分为4组,分别为对照组、CCl4组、治疗组和预防组。通过观察肝脏表面的颜色、光滑度及结节确定大鼠肝纤维化程度;通过病理组织切片HE(hematoxylin-eosin)染色对大鼠肝脏损伤和炎症细胞浸润情况进行评估;通过检测肝组织匀浆中丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)和天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)活性进行评价大鼠肝功能情况;通过检测肝组织中脂质氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、抗氧化酶如谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性以及肝组织中总抗氧化能力(total antioxidative capacity,T-AOC)对大鼠体内氧化/抗氧化平衡状态进行评价。结果显示,CCl4组大鼠肝脏颜色明显偏黄,表面失去光滑,结节化程度最严重;BML-111预防或治疗后,其症状明显改善。BML-111可以抑制CCl4诱导的大鼠肝脏损伤和炎症细胞浸润。CCl4组肝组织匀浆液中ALT和AST活性明显降低;BML-111能够提高ALT和AST的活性(P<0.05)。CCl4组MDA含量明显升高,而GSHPx、SOD和CAT的活性降低,总抗氧化能力T-AOC下降。BML-111预防或治疗处理后,MDA含量明显下降(P<0.05),T-AOC增强(P<0.05),GSH-Px、CAT和SOD的活性均明显回升(P<0.05)。由此可知,BML-111可以抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化,此效应与其调节肝组织的氧化/抗氧化平衡相关。