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庚型肝炎病毒NS3蛋白在杆状病毒载体中的表达及其抗原性研究
被引量:
3
1
作者
朱分禄
任浩
+4 位作者
朱诗应
谢南
潘卫
董辉
戚中田
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第9期849-852,共4页
目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。 方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4...
目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。 方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4h使发生转座 ,用抗生素平皿筛选重组 bacmid。脂质体介导转染 Sf9昆虫细胞 ,待细胞形态明显改变后收获细胞和培养上清液 ,将上清液再次感染 Sf9细胞以大量表达 HGV NS3重组蛋白。利用 SDS- PAGE和 Western- blotting方法分析重组蛋白。结果 :SDS- PAGE分析发现表达产物在 Mr43810处有一条明显的蛋白带 ,占细胞总蛋白量的 30 %以上 ;应用 Ni- NTA亲和层析柱获得了纯化的重组蛋白 ;Western- blotting显示该抗原可与 HGV RNA阳性血清发生特异反应。 结论 :获得了昆虫细胞内表达的 HGV NS3重组蛋白 ,并证明该蛋白有可能用于 HGV感染的抗体检测。
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关键词
免疫原性
杆状病毒载体
庚型肝炎
NS3蛋白
下载PDF
职称材料
题名
庚型肝炎病毒NS3蛋白在杆状病毒载体中的表达及其抗原性研究
被引量:
3
1
作者
朱分禄
任浩
朱诗应
谢南
潘卫
董辉
戚中田
机构
第二军医大学基础医学部微生物学教研室
南昌市传染病医院中心实验室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第9期849-852,共4页
基金
国家自然科学基金!资助项目 ( 3 982 5 116
3 9970 3 94
3 9770 3 93 )
文摘
目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。 方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4h使发生转座 ,用抗生素平皿筛选重组 bacmid。脂质体介导转染 Sf9昆虫细胞 ,待细胞形态明显改变后收获细胞和培养上清液 ,将上清液再次感染 Sf9细胞以大量表达 HGV NS3重组蛋白。利用 SDS- PAGE和 Western- blotting方法分析重组蛋白。结果 :SDS- PAGE分析发现表达产物在 Mr43810处有一条明显的蛋白带 ,占细胞总蛋白量的 30 %以上 ;应用 Ni- NTA亲和层析柱获得了纯化的重组蛋白 ;Western- blotting显示该抗原可与 HGV RNA阳性血清发生特异反应。 结论 :获得了昆虫细胞内表达的 HGV NS3重组蛋白 ,并证明该蛋白有可能用于 HGV感染的抗体检测。
关键词
免疫原性
杆状病毒载体
庚型肝炎
NS3蛋白
Keywords
hepatitis G virus
non structural protein 3
Sf 9 insect cell
immunogenicity
分类号
R512.630.2 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
庚型肝炎病毒NS3蛋白在杆状病毒载体中的表达及其抗原性研究
朱分禄
任浩
朱诗应
谢南
潘卫
董辉
戚中田
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000
3
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