高效液相色谱-质谱法检测水产品中硝基呋喃及其代谢物的研究

采用超高压液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测了水产品中呋喃它酮(AMOZ)、呋喃西林(SEM)、呋喃妥因(AHD)和呋喃唑酮(AOZ)4种硝基呋喃代谢物的残留量。样品用盐酸溶液水解,用2-硝基苯甲醛衍生化,采用乙酸乙酯液-液萃取净化,初始流动相复溶后,经C_(18)液相色谱柱分离,ESI电离源串联三重四级杆质谱仪以多反应监测扫描模式(MRM)进行检测分析,内标法定量。结果表明,平均回收率在97.77%~99.75%,相对标准偏差(RSD)在0.4%~7.3%,定量结果准确,精密度好,测定结果能够满足实验室对批量化水产品硝基呋喃代谢物残留的检测要求。

产漆酶真菌筛选、鉴定及酶促去除苯酚的条件优化

以愈创木酚为底物,从自然环境中成功筛选到一株高产漆酶的粗毛革孔菌(Coriolopsis gallica)NCULAC F1。对其漆酶诱导表达条件进行探究,结果表明,9种芳香化合物对NCULAC F1表达漆酶均无显著诱导作用(P>0.05);而硫酸铜具有显著诱导作用(P<0.05),且硫酸铜与2,6-二甲基苯酚具有显著的协同诱导作用(P<0.05);最佳协同诱导条件下,摇瓶发酵5 d漆酶活力达11.29 U·mL-1,比未添加任何诱导剂的对照组显著提高了138.69%(P<0.05)。提取纯化漆酶,进一步探究漆酶对苯酚的去除效果,结果表明,酶促去除苯酚的过程遵循Michaelis-Menten动力学模型,R2为0.9843,km为52.45 mg·L-1,Vmax为181.82 mg·L-1·h-1;最佳催化条件为温度70℃,pH 6.0,加酶量5 U·mL-1,介体2’2-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABTS)浓度0.6 mmol·L-1,在此条件下,10 min内苯酚去除率达100%。研究结果为粗毛革孔菌漆酶的高效生产和在酚类污染物控制方面的应用提供了理论参考。