血液肿瘤微环境对CAR-T免疫疗法疗效及其不良反应的影响的研究进展

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法的应用开创了肿瘤治疗的新时代,特别是在多种难治性恶性肿瘤的治疗中取得空前成功,对于难治/复发血液系统恶性肿瘤如急性白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤(MM)等更是效果显著。肿瘤微环境(TME)与CAR-T疗法的疗效及不良反应关系密切,不仅影响CAR-T细胞的活性,降低其抗肿瘤能力,甚至直接参与CAR-T疗法相关不良反应如细胞因子释放综合征(CRS)和免疫效应细胞相关神经毒性综合征(ICANS)的发生发展。因此,深入了解血液TME在CAR-T疗法治疗过程及不良反应中的作用,有助于拓展CAR-T疗法在血液系统恶性肿瘤中的应用。本文主要围绕血液TME对CAR-T疗法疗效和不良反应的影响进行综述,期望为临床优化难治/复发性血液系统恶性肿瘤的治疗方案提供循证依据。

印戒细胞癌细胞株自分泌因子对血液病患者骨髓细胞生长的影响

目的探讨印戒细胞癌细胞株自分泌因子对急性白血病、再生障碍性贫血患者及正常人骨髓单个核细胞的影响，以期对其自分泌因子的临床应用研究提供实验依据。方法本研究采用MTT法体外药物敏感实验，检测31例急性白血病患者骨髓单个核细胞在含有印戒细胞癌细胞株培养上清液浓缩物的培养基中细胞存活率；采用细胞培养技术检测15例再生障碍性贫血患者及10例正常人骨髓单个核细胞在含有印戒细胞癌细胞株培养上清液浓缩物的培养基中细胞集落及集簇形成情况。结果（1）在0～40μL浓度的印戒细胞癌细胞株培养上清液浓缩物，对AL组BMMNC的生长未见明显的促生长作用或抑制作用（P〉0．05）；（2）在10、20、40μL浓度梯度间细胞存活率无显著性差异（P〉0．05）；（3）ALL组与AML组之间细胞存活率无显著性差异（P〉0．05）；（4）在0～50μL浓度的印戒细胞癌细胞株培养上清液浓缩物，对AA组BMMNC生长未见明显的促生长作用或抑制生长作用（P〉0．05）；（5）在0～50μL浓度的印戒细胞癌细胞株培养上清液浓缩物，对正常对照组BMMNC生长未见明显的促生长作用或抑制生长作用（P〉0．05）。结论（1）印戒细胞癌细胞株培养上清液浓缩物对急性白血病患者新鲜骨髓单个核细胞的生长无影响；（2）印戒细胞癌细胞株培养上清液浓缩物对再生障碍性贫血患者骨髓单个细胞的生长无影响；（3）印戒细胞癌细胞株培养上清液浓缩物对正常人骨髓单个核细胞的生长无影响。

微小RNA-21与血液肿瘤

微小 RNA（MicroRNAs，miRNAs）是一类具有调控功能的内源性非编码单链小 RNA 分子，通常与一个或者多个靶基因 mRNA 3′端非翻译区（3′－UTRs）完全或不完全互补结合，抑制翻译或降解靶标 mRNAs 而调节基因的表达，参与生命过程中一系列的重要进程，包括早期发育、细胞增殖、分化、凋亡、死亡、免疫调节和脂肪代谢等。 miRNAs 在肿瘤的发生和发展中扮演着重要的角色，具有癌基因或抑癌基因的作用。 microRNA －21（miR －21）是一个典型的致癌性 miR－NA 分子，在多种肿瘤组织中表达升高。近年来，国内外不断有学者在白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等血液肿瘤中发现miR －21呈现过表达，并可能通过调控多种抑癌基因、凋亡相关分子及相关信号通路促进血液肿瘤的发生，影响肿瘤的进展及预后，然而具体作用机制不明。此外，miR －21还与血液肿瘤的耐药密切相关，使用转染反义寡核苷酸等分子生物学方法降低 miR －21的表达可以抑制肿瘤细胞的生长、侵袭等生物学的行为并提高肿瘤细胞对化疗的敏感性。 miR －21的功能研究和新靶点鉴定已经成为分子生物学研究中最大的热点和突破口之一。

Th17细胞与血液肿瘤

机体特异性免疫应答包括细胞免疫和体液免疫，其中T细胞介导的细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的主体。依据T细胞表面抗原的不同，可将T细胞分为CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞。依据CD4^＋T细胞分化过程和功能特征的不同，传统意义上将CD4^＋T细胞分为辅助性T细胞1型（Th1细胞）、辅助性T细胞2型（Th2细胞）、

恶性血液病红细胞免疫功能观察

恶性血液病红细胞免疫功能观察陈三军，陈文准，杨碧云，曹瑞生（第二附属医院血液科南昌３３０００６）谭立明（第二附属医院检验科南昌３３０００６）血液恶性肿瘤的病因与发病机理目前尚未完全明确，有关实体肿瘤及自身免疫性疾病红细胞免疫功能异常研究较多，但血液恶...

幽门螺杆菌感染在特发性血小板减少性紫癜中的临床意义

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)在特发性血小板减少性紫瘢(ITP)患者的感染情况、Hp感染与ITP患者临床特点的相关性及针对Hp感染的ITP患者采用糖皮质激素联合根治性Hp治疗的临床疗效。方法对ITP患者57例及正常对照30例采用14 C-尿素呼气试验(14 C-UBT)和抗Hp抗体IgG(Hp-IgG)检测确定是否合并Hp感染,阳性组和阴性组分别采用糖皮质激素联合根治性Hp治疗和单用糖皮质激素治疗,观察血小板数、T细胞亚群变化,并进行疗效比较。结果 ITP患者Hp感染率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。阳性组和阴性组平均年龄、骨髓巨核细胞数、临床表现比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前T细胞亚群比例均有不同程度的失调,且阳性组CD3+CD4+百分比及CD3+CD4+/CD3+CD8+比值降低、CD3+CD8+百分比升高分别较阴性组明显。Hp根除治疗成功率为82.50%(33/40)。根除Hp成功组平均血小板计数上升及升高幅度、T细胞亚群失调改善及改善幅度均高于根除Hp失败组和阴性组(P<0.05)。阳性组有效率高于阴性组(P<0.05)。治疗后14 C-UBT检测与临床疗效相符,而Hp-IgG检测与临床疗效不完全相符。结论 ITP患者Hp感染率高于正常人群。Hp阳性组患者平均年龄及骨髓巨核细胞代偿性增生程度高于阴性组,ITP患者T细胞亚群比例均有不同程度失调。糖皮质激素联合根治性Hp治疗有助于阳性组患者血小板数的提升及T细胞亚群比例失常的改善。14 C-UBT和Hp-IgG是两种简便的非侵入性Hp的检测方法,需根据不同特点用于临床。

人脐带间充质干细胞对再生障碍性贫血T细胞的调节作用

背景:间充质干细胞具有免疫调节作用,能降低移植后移植物抗宿主病的发生率,治疗自身免疫性疾病。目的:观察人脐带间充质干细胞对再生障碍性贫血患者骨髓T淋巴细胞的免疫调节作用。设计、时间及地点:随机分组设计,体外细胞学对比观察,病例来自2007-09/2008-11南昌大学第一附属医院、南昌大学第二附属医院血液科。实验于2007-09/2008-11在南昌大学第二附属医院血液研究所完成。对象/材料:选择南昌大学第一附属医院、南昌大学第二附属医院血液科收治的初诊再生障碍性贫血患者22例,其中重型再障6例,男3例,女3例,中位年龄38(16～68)岁;慢性再障16例,男9例,女7例,中位年龄41(25～59)岁。另获取临床正常剖宫产之足月健康胎儿脐带,用于人脐带间充质干细胞的分离、培养和鉴定。方法:从人脐带中提取并培养间充质干细胞;用密度梯度离心法从再生障碍性贫血患者骨髓中分离T淋巴细胞;将两者共培养,实验分为3组,对照组:单独培养T淋巴细胞,细胞密度1×105/孔;人脐带间充质干细胞组:按1×105/孔,0.5×105/孔﹑0.1×105/孔、0.05×105/孔不同密度接种人脐带间充质干细胞;实验组:T淋巴细胞与人脐带间充质干细胞按不同比例1∶1﹑1∶0.5、1∶0.1﹑1∶0.05接种于培养基内。主要观察指标:四甲基偶氮唑盐法检测不同细胞浓度人脐带间充质干细胞对再生障碍性贫血患者淋巴细胞的抑制率;利用流式细胞仪检测T细胞亚群CD4+/CD8+的变化;采用ELISA法测定上清液中造血负调控因子细胞介素2、γ-干扰素的水平。结果:①用贴壁法培养至第2代的间充质干细胞具有长梭形的典型改变,表面分子检测显示高表达CD166、CD29、CD54,低表达CD13、CD34、CD45,经体外诱导可分化为脂肪细胞。②实验组中人脐带间充质干细胞∶淋巴细胞比例分别为1∶1、0.5∶1、0.1∶1时间充质干细胞能够抑制再生障碍性贫血患者淋巴细胞的增殖,抑制率分别为(56.2±12.1)%、(43.7±10.4)%、(28.6±8.9)%,1∶1组抑制作用最强。③人脐带间充质干细胞能够调整再生障碍性贫血患者倒置的CD4+/CD8+比例,抑制再生障碍性贫血患者造血负调控因子白细胞介素2、γ-干扰素分泌水平。结论:人脐带间充质干细胞在体外对再生障碍性贫血患者T淋巴细胞具有免疫调节作用,这种作用依赖于间充质干细胞数量。

多发性骨髓瘤患者血浆HSP90的表达及其临床意义

本研究检测多发性骨髓瘤(MM)患者外周血HSP90的表达情况,探讨其在MM发病中的作用及与疾病治疗、预后转归的关系。收集58例MM患者和20例健康志愿者的外周血,应用双抗体夹心ELISA法检测血浆HSP90的表达水平。结果表明,MM患者外周血HSP90的表达水平明显高于对照组[(325.205±75.942)vs(85.401±11.261)ng/ml](P<0.001)。HSP90表达水平与MM患者的性别、年龄和疾病分型无关(P>0.05),而与疾病国际分期系统(ISS)的分期、疗效、浆细胞百分比和球蛋白、免疫球蛋白、M蛋白、β2-微球蛋白和轻链水平明显相关(P<0.05)。结论:HSP90在MM患者外周血中的过度表达可能参与了MM发病和进展,检测外周血HSP90的表达水平可能对判断MM患者的病情、疗效和预后有一定临床指导意义。

间充质干细胞源性外泌体——未来生物疗法的理想载体

间充质干细胞源性外泌体(MSC-exosomes)是间充质干细胞在生理或者病理状态下分泌的直径在40-100 nm的同质性膜囊泡。M SC-exosomes含有大量且种类繁多的蛋白质和miRNA等生物活性物质。M SC-exosomes与靶细胞通过膜融合或者发生内吞作用后将其中的生物活性物质转运至靶细胞,从而影响靶细胞的功能。它们像是体内的信号载体储存池,在细胞间起信息交换的作用。MSC-exosomes能够模拟MSC的生物学功能,具有促进组织修复或调节免疫等作用。本文将MSC-exosomes的生物学特性及生物学功能做一综述。

医用空气消毒机消毒在预防急性白血病患者化疗后呼吸道感染中的应用

目的探讨医用空气消毒机消毒在预防急性白血病患者化疗后呼吸道感染中的应用效果。方法将198例急性白血病患者按随机数字表法分为对照组(n=96)和试验组(n=102)。对照组病房采用常规的空气消毒方法,试验组病房采用医用空气消毒机进行消毒。观察2组消毒前和消毒后1、2、3、4h空气细菌菌落总数及呼吸道感染发生率。结果对照组消毒后4h空气细菌菌落总数与消毒前比较差异无统计学意义(P>0.05),试验组消毒后1、2、3、4h空气细菌菌落总数均较消毒前明显减少(均P<0.01),试验组消毒后1、2、3、4h空气细菌菌落总数均较对照组明显减少(P<0.05或P<0.01),试验组呼吸道感染发生率明显低于对照组(P<0.01)。结论对病房采用医用空气消毒机消毒能减少空气中的细菌菌落数,降低急性白血病患者化疗后呼吸道感染的发生率。

白血病骨髓基质细胞促进SHI－1细胞体外侵袭及其作用机制探讨

目的:研究白血病患者骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)与白血病SHI-1细胞互相接触对后者侵袭能力的影响及其作用机制。方法:收集白血病患者BMSC及其条件培养液,采用RT-PCR法检测细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)在细胞SHI-1和BMSC中的表达。按1?10比例将BMSC与SHI-1细胞进行混合,接种于铺有matrigel基质胶的Transwell小室内,并加入终浓度为2μg/mL的CXC趋化因子受体4(CXCchemokine receptor 4,CXCR4)或EMMPRIN功能阻断抗体,或以BMSC条件培养液进行侵袭实验。采用实时定量PCR法检测共同培养前后SHI-1细胞的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子2(tis-sue inhibitor of metalloproteinase 2,TIMP-2)和CXCR4 mRNA表达的改变。应用ELISA法测定无血清培养上清液中基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor1,SDF-1)的含量。结果:SHI-1和BMSC细胞均表达EMMPRIN。SHI-1细胞与BMSC共培养后,其侵袭能力有显著提高,但能被CXCR4和EMMPRIN抗体阻断,条件培养液未明显提高SHI-1细胞的侵袭能力。共同培养后,SHI-1细胞的MMP-2、MMP-9、TIMP-2和CXCR4 mRNA以及无血清上清液中SDF-1的含量均有显著提高。结论:白血病患者的BMSC与白血病SHI-1细胞接触时,前者可通过其细胞表面的多种分子途径来诱导SHI-1细胞跨matrigel侵袭能力的提高,这可能是导致白血病细胞向髓外浸润的一种重要机制。

复发/难治多发性骨髓瘤的治疗进展

多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是一种浆细胞恶性增殖性疾病．骨髓中克隆性浆细胞异常增生。并分泌单克隆免疫球蛋白或其片段（M）蛋白．导致相关器官或组织损伤。近十年，由于自体造血干细胞移植（ASCT）联合免疫调节剂（IMiDs）如沙利度胺、来那度胺和蛋白酶体抑制剂硼替佐米（万珂）等新型药物的广泛应用，MM患者治疗缓解率较前提高，生存期延长。

MicroRNA-145在急性髓系白血病患者中的表达及意义

目的探讨MicroRNA-145(miR-145)在急性髓系白血病患者骨髓细胞中的表达情况,并分析其临床意义。方法收集急性髓系白血病患者骨髓标本70例,其中初治组46例、缓解组24例,非血液肿瘤性疾病14例作为对照组。通过实时荧光定量PCR方法检测miR-145的相对表达水平。结果 miR-145在初治急性髓系白血病骨髓中表达水平明显低于缓解组及对照组(P<0.01);其中9例经化疗后缓解的急性髓系白血病患者骨髓miR-145表达水平较治疗前显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);且miR-145表达水平与初诊时原始细胞百分数及外周血白细胞数均无相关性(P=0.456、0.394)。结论 miR-145在急性髓系白血病患者表达下调,提示miR-145的表达与白血病的发生、发展存在显著的关系。

MicroRNA-21在急性髓系白血病骨髓细胞中的异常表达及意义

目的分析急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中miR-21的表达情况及其在白血病发生发展中的可能作用及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR检测40例初治AML患者、22例完全缓解期AML(AML-CR)患者、13例难治复发患者、20例非血液肿瘤患者及健康人骨髓中miR-21的表达水平,并分析AML患者miR-21的表达水平与临床指标的相关性。结果 miR-21在AML中的表达是上调的,初治组、完全缓解组及难治复发组miR-21的表达水平均高于对照组(P<0.05);完全缓解组miR-21的表达量较初治组有所下降(P<0.05);难治复发组miR-21的表达量高于初治组,但两组间无统计学意义(P>0.05);初治AML miR-21表达水平与骨髓原始幼稚细胞数呈正相关(P<0.05),与外周血白细胞数、血小板计数、血红蛋白含量以及年龄、性别、染色体异常等均无明显相关性(P>0.05)。结论 miR-21在急性髓系白血病患者骨髓细胞中的表达上调,并与肿瘤负荷相关,可能在白血病的发生发展中起重要作用,并有望成为白血病诊断的新的分子标志物。

CXCL12-CXCR4/CXCR7轴信号传导通路与肿瘤细胞生物学特性的关系

越来越多的研究表明CXCR4与CXCR7在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要作用,CXCR4与CXCR7作为G蛋白藕联受体介导的信号传导通路及其在胞内激化级联信号通路与肿瘤发生发展的分子机制有密切关系。本文将对它们各自介导的信号通路及其在胞内的级联信号通路与肿瘤细胞的生长、增殖、黏附和迁移等生物学特性的关系进行综述。

热休克蛋白90抑制剂治疗多发性骨髓瘤的研究进展

多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是常见的血液系统恶性肿瘤,好发于中老年人群,预后较差.近10年,随着沙利度胺、来那度胺和硼替佐米等新药的临床应用,MM患者的临床结局较前改善,生存期延长.然而,MM仍被公认是不可治愈的血液恶性疾病,大多患者最终复发或耐药.

HSP90抑制剂在急性髓细胞白血病治疗中的最新研究进展

热休克蛋白90(HSP90)是许多癌基因下游蛋白的分子伴侣,参与多重致癌途径,涉及急性髓细胞白血病(AML)的发生和不良预后。HSP90抑制剂是当前AML分子靶向治疗研究药物之一,通过抑制HSP90同时实现对多重致癌信号通路的调控发挥抗白血病作用。

自体骨髓间充质干细胞输注支持长期反复化疗急性白血病的疗效观察

目的探讨体外培养扩增临床规模的人骨髓间充质干细胞（MSCs）的可行性及自体骨髓MSCs输注支持长期反复化疗急性白血病（AL）的疗效。方法对5例AL患者采用巩固强化治疗后体外培养扩增患者自体骨髓MSCs,经形态学及细胞表面分子加以鉴定,并于化疗后2-3 d由静脉回输,并与同期仅用巩固强化化疗的5例AL患者对照。结果研究组自体骨髓MSCs培养扩增MSCs计数（2.5-7.2）×10^6/kg,输注过程均无不良反应。2组病例在强化治疗后中性粒细胞和血小板分别〈0.5×10^9/L和〈20×10^9/L的低谷时间均发生较早,研究组低谷中位持续时间为3 d,明显短于对照组的8 d,研究组中位生存期38个月,明显长于对照组的12个月。结论体外可培养扩增临床规模的人MSCs。对长期反复化疗的AL患者,MSCs输注安全、可行,近期有助其造血恢复,减少并发症的发生;远期可争取长期无病生存乃至治愈,因此值得临床进一步研究。