消症汤对子宫内膜异位模型大鼠异位组织细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨“消症汤”对子宫内膜异位症 (endometriosis,EMT)模型大鼠异位组织细胞增殖和凋亡的影响 ,为临床用药提供实验依据。方法 制作大鼠EMT动物模型 ,模型鼠每日分别以 0 5ml和 1 0ml中药灌胃 ,连续用药 3周后观察异位组织细胞增殖指数和凋亡指数。结果 模型对照组细胞增殖指数大于用药组 ,凋亡指数小于用药组 (P <0 0 1)。 0 5ml组和 1 0ml组比较细胞增殖指数和凋亡指数无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 “消症汤”能促进异位组织细胞凋亡 ,抑制异位组织增殖。

Bcl-2在EMT模型大鼠中药治疗前后异位组织中的表达

目的观察细胞凋亡调控蛋白Bcl2在子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)模型大鼠异位组织中的表达,探讨“消症汤”促进异位组织消退的作用机理,为临床用药提供实验依据。方法制作大鼠EMT动物模型,模型鼠每日分别以05ml和10ml中药灌胃,采用免疫组化方法观察用药前后在位和异位子宫内膜组织中Bcl2的表达。结果Bcl2在各组在位和异位组织中的上皮细胞、腺细胞、基质细胞、白细胞以及巨噬细胞中均有表达,且模型对照组中阳性细胞数大于正常对照组和10ml用药组(P<001)。“消症汤”治疗前后,巨噬细胞数无显著差异(P>005),而Bcl2阳性表达的巨噬细胞渐减(P<001)。结论子宫内膜中Bcl2的高表达可能抑制了异位组织细胞凋亡,而“消症汤”降低了Bcl2蛋白水平,后者可能与促进细胞凋亡有关。

巨噬细胞和嗜酸性粒细胞在EMT模型大鼠术后不同时间异位组织中的变化

目的 :观察大鼠腹腔子宫内膜异位症 (endometriosis ,EMT)模型造模早期在位和异位组织中巨噬细胞和嗜酸性粒细胞的变化 ,探讨其与EMT的关系。方法 :建立大鼠EMT动物模型 ,术后第 2天起 ,每日取 1～ 2只模型大鼠在位和异位子宫内膜分别制作光、电镜标本。观察术后不同天数 ,异位组织的生存变化以及巨噬细胞和嗜酸性粒细胞的数量和形态改变。结果 :模型大鼠在位内膜巨噬细胞比正常大鼠多 ,异位比在位更多。P <0 .0 5。术后第 8天见凋亡的巨噬细胞。 10天后见基质中嗜酸性粒细胞增多。结论

第七周人胚主要结构发育的研究

以组织学、组织化学PAS法、ATP酶法观察7周人胚标本的连续切片。7周胚胎体表可见脑泡、骨骼,头皮下可见皮下毛细血管丛。头、心脏、肝脏相对体积最大。软骨、消化和呼吸道上皮,血管上皮和平滑肌、心肌PAS阳性,肝细胞弱阳性。ATP酶除神经管周围间充质细胞阳性外,其余均阴性。

酒精和乙醛对小鼠的胚胎毒性和致畸效应

小鼠妊娠第9天用25%乙醇腹腔注射。5.8 g/kg和6.8 g/kg酒精剂量组有意义的增加吸收胎和畸胎的百分率,而减少了胎重的胎儿脑重。用2.9 g/kg两次腹腔注射,相隔4小时和相隔8小时,这两组均未增加吸收胎和畸胎率,也未减少胎鼠体重和脑重。妊娠小鼠第9天接受酒精(5.8 g/kg)造成心脏缺陷,包括肌性室间隔部分。单次0.32 g/kg乙醛和五次注射乙醛0.2 g/kg,每次相隔2小时,没有增加畸形率。这些资料支持乙醇是小鼠胎儿酒精综合征最接近的致畸原。

胎鼠和新生小鼠表皮郎格汉斯细胞的组织化学和电镜组化研究

用ATP酶组织化学、电镜组化和图像分析方法,研究胎鼠和新生小鼠表皮内郎格汉斯细胞的发育.结果表明:第16天胎鼠表皮中开始出现ATP酶阳性郎格汉斯细胞,电镜组化观察郎格汉斯细胞的胞膜表面有ATP酶反应物沉积。图像分析结果证实,随着表皮分化,郎格汉斯细胞数量迅速增长,细胞的周长、面积和ATP酶反应物的灰度也逐渐增大。出生后4～5天郎格汉斯细胞的结构和数量均与成鼠相似,ATP酶含量也达成鼠的水平。

氢化可的松对胎鼠和新生鼠郎格汉斯细胞的影响：酶组化,电镜组化…

用免疫抑制剂氢化可的松体外处理胎鼠和新生鼠表皮，观察它对朗格汉斯细胞数量和结构的影响。结果如下：（１）经氢化可的松处理的表皮内郎格汉斯细胞数量减少，细胞结构发生行性变化。（２）图像分析显示，随氢化可的松浓度增大，郎格汉斯细胞数量和ＡＴＰ酶组化染色反应的灰度逐渐下降。

不同剂量的敌枯双煮沸水溶液对小鼠胚胎毒性和致畸效应的影响

用不同剂量的敌枯双煮沸水溶液,对妊娠第九天的小白鼠作腹腔注射。在妊娠第十八天处死,共得胎鼠728只,检查胎鼠致畸频率及畸形分类。另设对照组。结果:12.5毫克/公斤组已出现胸骨畸形;外形、内部出现畸形的需数均以200毫克/公斤组为多,有高度显著差异;400毫克/公斤组中吸收胎达高度显著差异;800毫克/公斤组全部为吸收胎。100毫克/公斤组以下剂量无统计学意义。

周围神经损伤后相关结构组织学变化的实验研究

目的 :观察大鼠周围神经损伤后不同时期 ,神经元胞体、损伤神经远端及靶器官的形态学变化。方法 :于股中部切除成年SD大鼠右侧坐骨神经 6mm ,建立坐骨神经缺损伤模型 ,左侧不做手术作为对照。在术后不同时期取材 ,观察脊髓前角运动神经元、损伤远端神经结构及损伤侧肌肉的改变。结果 :周围神经损伤后 1个月 ,脊髓前角运动神经元数目减少 ,但伤后 1个月 ,损伤神经远端施万细胞增生并形成B櫣ｎｇｎｅｒ带 ;3个月时B櫣ｎｇｎｅｒ带断裂 ,成纤维细胞明显增生 ;6个月时成纤维细胞减少 ,胶原纤维呈致密平行排列。伤后 1个月时损伤侧腓肠肌纤维明显萎缩 ,结缔组织增生 ;2个月后肌纤维萎缩速度减慢 ,以结缔组织增生为主。电镜下 ,神经切断后 1月、2月、3月时 ,髓鞘消失 ,原来有髓神经纤维轴突部位出现大量巨噬细胞样细胞 ;4个月和 6个月时 ,巨噬细胞样细胞消失 ,形成无髓神经纤维样结构 ,周围由胶原纤维填补。结论 :周围神经损伤早期神经元即明显减少 ,晚期趋于稳定。肌纤维萎缩以损伤早期为主 ,以后转为结缔组织增生。损伤神经远端在损伤早期以施万细胞增生为主 。

美托洛尔对腹主动脉缩窄大鼠心肌CalpainⅠ、CaN信号通路的影响

目的以钙调神经磷酸酶(Ca N)和钙蛋白酶Ⅰ(CalpainⅠ)为研究对象,探讨美托洛尔预防腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚的机制。方法 30只SD大鼠建立腹主动脉缩窄模型,造模成功者随机分为假手术组(n=10)、腹主动脉缩窄手术组(n=9)和美托洛尔组(n=9,在腹主动脉缩窄基础上每日予美托洛尔干预)。术后4周检测大鼠血压[收缩压(SBP)/舒张压(DBP)]及心肌肥厚程度变化[左心室质量/体质量的比值(LVW/BW表示)],逆转录PCR(RT-PCR)法检测Ca N m RNA表达,Western blot法检测Ca N和CalpainⅠ蛋白表达。检测各组的Ca N酶活性。结果手术组大鼠SBP、DBP、LVW/BW,心肌Ca N m RNA、Ca N蛋白、Ca N活性及CalpainⅠ蛋白表达均较假手术组增高(P<0.05)。美托洛尔组大鼠SBP、DBP虽较手术组略下降,但差异无统计学意义(P>0.05),且仍高于假手术组(P<0.05)。与手术组相比,美托洛尔组大鼠LVW/BW、心肌中Ca N m RNA、蛋白表达和酶活性,CalpainⅠ蛋白显著下降(P<0.05),与假手术组差异均无统计学意义。结论美托洛尔可通过抑制CalpainⅠ,调控Ca N信号通路,从而预防压力超负荷大鼠心肌肥厚的发生。

钙调神经磷酸酶在cTnI基因Asp128Tyr突变致心肌肥大中的作用

目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)在心肌钙蛋白I(cTnI)基因第128位天冬氨酸→酪氨酸(Asp128Tyr)突变致心肌肥大中的作用。方法:乳鼠心肌细胞,以心钠素(ANF)、脑钠肽(BNP)mRNA表达作为心肌肥大指标,观察含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒转染对心肌细胞的作用,并观察CaN抑制剂环孢菌素A(CsA)或FK506对突变基因转染的影响。Real-time PCR检测ANF、BNP和CaN mRNA表达变化,同时行CaN活性测定。结果:转染含cTnI Asp128Tyr突变基因腺病毒的心肌细胞增大,胞内ANF和BNP的mRNA表达较空白对照组、不含任何目的基因的阴性对照腺病毒转染组和转染含野生型cTnI基因的腺病毒组增高(P<0.05)。与含野生型cTnI基因的腺病毒组相比,转染含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒组在ANF和BNP mRNA表达升高的同时存在CaN活性升高和CaN mRNA表达上调(P<0.05)。转染含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒并用CsA或FK506干预后,心肌细胞缩小,胞内ANF和BNP mRNA表达量较单纯转染含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒组降低(P<0.05),同时心肌细胞内CaN活性显著下降(P<0.05),CaN mRNA表达下调(P<0.05)。结论:cTnI Asp128Tyr突变可引起心肌细胞肥大;CaN信号通路参与了cTnI Asp128Tyr突变致心肌肥大过程的调控。

人腭扁桃体上皮内郎格汉斯细胞的观察研究

应用ATP酶组化法、电镜观察和图像分析,对人腭扁桃体上皮内郎格汉斯细胞进行了观察.结果显示:儿童期和青年期腭扁桃体上皮基底层均存在郎格汉斯细胞,其形态结构与皮肤内的相似,但胞体较大,突起略少.青年期腭扁桃体上皮的郎格汉斯细胞的数量、面积、周长均大于儿童期,而ATP酶反应的灰度无显著差别.

Dyrk1A经ASF调控CaMKⅡδ可变剪接在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用

目的:探讨双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(Dyrk1A)经可变剪接因子(ASF)对钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱδ(CaMKⅡδ)可变剪接的调控在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用。方法:制备两肾一夹肾血管性高血压大鼠模型,给予Dyrk1A抑制剂表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和哈尔碱(harmine)干预,观察大鼠血压及心肌肥厚程度变化,逆转录-多聚酶链反应法检测CaMKⅡδ可变剪接的改变,免疫印迹法检测大鼠心肌Dyrk1A和ASF蛋白质表达的变化。结果:两肾一夹术后8周,与假手术组相比,手术组大鼠血压显著升高(P<0.05),大鼠左室重、左室重/体重比值及心肌细胞面积均增高(P<0.05),同时该组大鼠心肌中Dyrk1A蛋白表达增加,ASF蛋白表达下降(P<0.05),CaMKⅡδ亚型可变剪接表现为CaMKⅡδA、δB mRNA表达升高,δC mRNA表达降低(P<0.05);与手术组相比,EGCG和哈尔碱组大鼠左室重、左室重/体重比值和心肌细胞面积下降,同时大鼠心肌中Dyrk1A蛋白表达降低,ASF蛋白表达上调,CaMKⅡδ亚型可变剪接逆转(均P<0.05)。结论:Dyrk1A可通过ASF调控CaMKⅡδ的可变剪接,从而参与肾血管性高血压大鼠心肌肥厚的发生。

小鼠睾丸、附睾发育过程中的形态学研究

目的 :观察不同年龄小鼠睾丸及附睾的形态学变化 ,为男性生殖、不孕和计划生育的实验研究提供形态学依据。方法 :取出生后不同年龄ICR小鼠的睾丸、附睾制作光、电镜切片 ,比较各组的形态变化。结果 :小鼠的性成熟期应从 1月开始 ,1岁以后开始步入老年。睾丸间质细胞的发育先于附睾上皮的发育。

心脏复跳后输入不同液体对肺超微结构的影响

本文用１８只杂交犬随机分为三组，均在戊巴比妥钠３０ｍｇ／ｋｇ肌注麻醉下气管插管，行控制呼吸。右侧进胸，作主动脉阻断缺血停跳２ｍｉｎ后开放。观察了心脏复跳后输入三种不同液体对肺超微结构的影响。Ⅰ组（ＬＲ组）用平衡液２０ｍｌ／ｋｇ以２ｍｌ／ｋｇ／ｍｉｎ输入；Ⅱ组（ＬＲＢＤ组）以１／２平衡液及１／２全血＋地塞米松０．５ｍｇ／ｋｇ按上述量输入；Ⅲ组（ＨＴＳ组）以１０ｍｌ／ｋｇ之７．５％氯化钠输入。结果ＣＶＰ、ＭＡＰ以ＬＲ组上升至基线时间最长，ＨＴＳ组最快，ＬＲＢＤ组介于两者之间。ＬＰＯ三组均有上升，ＬＲＢＤ组迅速下降有显著保护作用。在光镜及电镜下显示ＬＲ组有明显肺间质水肿及Ⅱ型细胞部分损害，ＬＲＢＤ组间质水肿不明显，Ⅱ型细胞亦较完整。故从本实验初步结果，认为以ＬＲＢＤ组之混合液体输入·较好。

氢化可的松对小鼠角膜、结膜上皮中郎格罕细胞的影响

郎格罕细胞（ＬＣ）在角膜排斥反应中起着重要的作用，若能在角膜移植前后选择性地抑制ＬＣ的功能活性，有可能延长移植角膜的存活期。本实验选用免疫抑制剂──氢化可的松处理小鼠眼球，利用酶组化──ＡＴＰ酶法和图像分析仪，观察其对角膜、结膜上皮内ＬＣ密度以及酶活性的影响。结果显示，随着氢化可的松浓度的增大，ＬＣ内ＡＴＰ酶反应程度、ＬＣ密度显示下降趋势。当氢化可的松浓度增加至１．７ｍｇ／ｍｌ时，除角巩缘外，周边角膜和结膜已无ＡＴＰａｓｅ阳性的ＬＣ，当浓度达到２．０ｍｇ／ｍｌ时，角巩缘也很少见ＡＴＰａｓｅ阳性的Ｌｃ。

乙醇对胎鼠肝细胞超微结构的影响及体视学分析

BALB/c妊娠小鼠用20％乙醇作为饮水,平均每d每kg体重摄入乙醇15g。与对照组相比,乙醇组胎鼠肝细胞胞质溶解,部分线粒体肿胀,嵴排列紊乱、溶解破坏,外膜破裂。部分线粒体小、基质电子密度高。有些粗面内质网池扩张、脱颗粒。胞质溶解区域见较多脂肪空泡和溶酶体。毛细胆管普遍扩张,激绒毛短小。经体视学测量,乙醇组线粒体、粗面内质网体积密度与对照组相比有显著下降,具统计学意义。线粒体截面数密度和数密度均下降。结果表明乙醇能导致胎鼠肝细胞超微结构的损害。

壳聚糖神经干细胞复合物修复大鼠完全性脊髓损伤的组织学观察

目的 探讨壳聚糖与神经干细胞复合物修复成年SD大鼠完全性脊髓损伤的可行性。方法 制作大鼠脊髓完全缺损模型 ,在形成的缺损中植入壳聚糖与神经干细胞复合物 (实验组 ) ,或只植入壳聚糖 (对照组 ) ,或不加任何材料 (空白组 ) ,术后 2、4、8周灌注取材 ,观察结果。结果 壳聚糖与神经干细胞复合物在植入SD大鼠脊髓完全缺损模型后 ,能桥接缺损两端脊髓 ;其内的神经干细胞能存活、迁移并分化成多种形态的神经组织细胞 ,并诱导神经轴突向复合材料内生长。结论 壳聚糖与神经干细胞复合物有可能桥接并修复大鼠脊髓完全缺损性损伤。

活动力不足精子的线粒体变化──形态学和计量学研究

通过电镜观察和体视学方法，研究活动力不足精子的线粒体变化．结果是运动力不足的精子尾部中段存在较多胞质，线粒体排列方式呈现异常，线粒体内部的结构有退化现象。运动力不足的精子线粒体的体密度（ＶＶ）、外膜面密度（ＳＶ）和面数密度（ＮＡ）均小于对照组（Ｐ＜０．０５），线粒体的外膜比表面（ＲＳＶ）则大于对照组（Ｐ＜０．０１），而线粒体的平均体积及平均外表面积和对照组比无差异（Ｐ＞０．５）．结果提示线粒体在形态学和计量学方面发生了改变，这可能是导致精子运动力低下的原因之一．

Dyrk1A-ASF-CaMKⅡδ信号通路在EGCG预防腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚中的作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚的影响及可能机制。方法 30只SD大鼠随机均分为腹主动脉缩窄组(A组)、腹主动脉缩窄+EGCG组(B组)和假手术组(C组)。4周后,计算左室重量/体重(LVW/BW)比值以判断大鼠心肌肥厚程度,Western blot法检测双特异性酪氨酸磷酸化调控激酶1A(Dyrk1A)和可变剪接因子(ASF)蛋白表达,RT-PCR法检测钙调素依赖蛋白激酶Ⅱδ(CaMKⅡδ)mRNA表达。结果与C组相比,A组大鼠LVW/BW升高,心肌中Dyrk1A蛋白及CaMKⅡδA、B亚型mRNA表达增加,ASF蛋白及CaMKⅡδC亚型mRNA表达下降(P<0.05);而B组能明显逆转A组上述指标的变化(P<0.05)。结论 EGCG可通过调控Dyrk1A-ASF-CaMKⅡδ可变剪接的信号通路预防腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚的发生。