大鼠急性胰腺炎病理学特征与氧自由基变化的关系

急性胰腺炎(AP)是临床常见的急腹症之一,其病因及发病机制至今尚未完全明确,近年来研究提示细胞因子及炎症递质在AP病程演变过程中起着一定的作用,而氧自由基在AP发病中的作用尤为重要,甚至认为起着始动作用。我们应用“十二指肠闭袢法”制备AP大鼠模型,在光、电镜水平研究其病理变化的特征,并检测各时期血浆过氧化脂质的含量,探讨与AP大鼠病理学特征之间的关系。 1 材料和方法 1.1 材料健康(?) Wistar大白鼠体质量210g～290g,随机分为四组,AP 6h,16h,24h及对照组,每组均为11只。AP模型的制备:用“十二指肠闭袢法”,实验动物术前禁食12h,戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。

精氨酸治疗对胆道梗阻患者血清可溶性白介素-Ⅱ受体表达的影响

目的探讨胆道梗阻患者围手术期血清可溶性白介素-Ⅱ受体(sIL-2R)的表达状况及精氨酸对胆道梗阻患者的免疫调节作用。方法选择一组胆道梗阻患者,检测其术前术后血清sIL-2R的水平(采用双抗夹心ELISA法),同期检测其血清总胆红素(Tbi,采用改良比色法),患者按疾病的良恶性分为两组。另择一组良性梗阻患者术前行为期7d的精氨酸治疗,观测其血清sIL-2R的表达状况。结果良恶性两组术前血清sIL-2R都明显高于对照组,术后血清sIL-2R逐渐下降,但良恶性两组的下降幅度差异明显;胆红素水平升高可导致血清sIL-2R过度表达,且黄疸程度愈深,sIL-2R水平愈高。在良性组,胆道的内外引流术式对血清sIL-2R表达的恢复存在着显著的差异。精氨酸对良性梗阻患者术前血清sIL-2R的表达有明显抑制作用。结论胆道梗阻患者血清sIL-2R过度表达,可能为术后并发症较多的原因之一,胆道外引流不利于血清sIL-2R的恢复,可能与肠道细菌易位和肠源性内毒素血症有关,精氨酸可通过抑制血清sIL-2R的表达而发挥其免疫调节作用。

大肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达

临床上根据转移瘤和原发瘤形态结构近似的这一生物学特性对诊断转移瘤十分有帮助,通常采用免疫组织化学技术显示特殊成分 CK 及其单克隆抗体以识别上皮性肿瘤.近年来,一些学者应用靶向 CK20 mRNA 的逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测结直肠癌患者外周血中的肿瘤细胞.我们采用巢式逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法,以 CK20 mRNA为靶基因,检测32例大肠癌患者外周血中 CK20 mRNA 表达,CK20 mRNA 阳性表达可作为癌细胞血行播散的临床指标,结果如下.1 材料和方法1.1 材料大肠癌患者32例均为本院普外科住院病例,男19例,女13例.年龄27岁～74岁,平均55.7岁.32例均行手术治疗,其中大肠癌根治术21例,非根治性切除术组11例(姑息性切除术者8例,剖腹探查者3例),均经病理组织学证实.癌细胞分化程度:高分化者3例,中分化者17例,低分化者12例.Dukes 分期:A 期12例,B 期6例,C 期7例,D 期7例.有淋巴结转移者13例(40.6%),有远处转移者7例(21.8%).治愈出院者27例(84.4%),病情无明显变化者5例(15.6%).对照组10例(直肠息肉3例,胆囊结石3例,其他4例),分别于术前、术后48 h,7 d～14 d 抽取患者的外周血标本,采用 RT-PCR 法检测.另外还检测了3例原发性肝细胞肝癌患者外周血标本.1.2 方法从外周静脉中抽取血液4mL,置于肝素化的试管内立即混匀送实验室.有核细胞的制备采用密度梯度离心法.提取细胞总 RNA,采用 Trizal 抽提法.合成 cDNA,应用

复方参七汤治疗胃癌的基础研究

目的阐明复方参七汤治疗胃癌的作用机制.方法体外抑癌研究:体外培养人胃癌细胞株BGC-823,观察复方参七汤对人胃癌细胞株BGC-823的杀伤效应、细胞分裂及集落形成的抑制作用.在体实验研究:中药组(50只)大鼠每日喂MNNG100mg/L和含复方参七汤(18mL/kg)的颗粒饲料,连续9mo.对照组(50只)大鼠每日喂MNNG100mg/L和颗粒饲料,连续9mo.9mo后(除自然死亡外)杀死生存大鼠,切取鼠腺胃和十二指肠标本,应用10%福尔马林固定标本,石蜡包埋,组织切片HE染色.免疫组化研究:鼠腺胃标本的石蜡切片进行免疫组化染色,应用免疫组化S-P法检测Wistar大鼠腺胃粘膜的正常细胞、异型增生细胞和癌细胞PCNA和CyclinD1表达.结果体外实验研究:复方参七汤抑制人胃癌细胞株BGC-823的细胞分裂和集落细胞形成,IC50为7g生药/L.高浓度时有直接杀死癌细胞作用,LC50为48g生药/L.在体实验研究:中药组,50只Wistar大鼠中7只自然死亡,余下43只生存9mo,将它们分批处死,32只大鼠腺胃粘膜细胞呈现正常(74.4%,32/43);8只大鼠腺胃粘膜细胞呈异型增生(18.6%,8/43)和3只大鼠腺胃癌(6.9%,3/43).对照组,50只Wistar大鼠中,11只自然死亡,余下39只生存9mo,将它们分批处死,16只大鼠腺胃粘膜细胞异型增生(41.1%,16/39),23只大鼠腺胃癌(58.9%,23/39),比较两组腺胃癌的发生率,中药组6.9%,明显低于对照组58.9%,P<0.01.免疫组化研究:中药组大鼠腺胃粘膜细胞的PCNA和CyclinD1强阳性表达率分别为13.8%和22.8%,而对照组分别为75.7%和62.8%,两组相比较,中药组的大鼠腺胃PCNA和CyclinD1的强阳性表达率明显低于对照组(P<0.05).结论复方参七汤治疗胃癌有良好的疗效,其作用机制可能抑制人胃癌细胞株BGC-823细胞分裂和集落形成;可能降低MNNG诱发Wistar大鼠腺胃癌发生率;可能抑制鼠腺胃增殖细胞和癌细胞的PCNA和CyclinD1强阳性表达;可能阻止正常腺胃细胞向肿瘤细胞转化,抑制肿瘤细胞的过度增殖.

改良原位胶原酶循环肝灌注法分离猪肝细胞

目的:建立改良原位胶原酶循环肝灌注猪肝细胞分离方法方法:猪门静脉插管,分别用D-Hanks液和胶原酶循环原位肝灌注分离猪肝细胞,分离后的肝细胞以5×108/L-1培养,观察分离和培养7d的肝细胞产量、活率和蛋白质、葡萄糖合成功能、G-6Pase活性、安定转化功能和LDH漏出量.结果:分离获得的肝细胞总量为5.2×107/g肝组织,肝细胞活率98.7%,培养7Dk保持稳定.安定转化功能在培养3d最强(安定浓度3d时为68±6pgcell-1);葡萄糖合成功能从1d时1.05±0.15nmolcell-1下降到3d时0.74±009nmolcell-1G-6-Pase活性从0d时1871±282zmolcell1下降到1d时1218±218zmolcell-1,然后维持在较低水平;LDH漏出量在3d较高.结论:改良原位胶原酶循环肝灌注法分离猪肝细胞.