案例引入法在医学微生物学教学中的应用

目的:分析在医学微生物学教学实施案例引入结合传统教学法的效果。方法:选取杏林护理专业学生81例,其中2019级学生40例为对照组,采用传统授课法,2020级学生41例为教改组,采用案例引入结合传统教学法。课程结束后对两组学生进行客观题和主观题考核,对教改组学生进行教学满意度调查。结果:教改组主观题成绩44.73±9.50分,总成绩82.23±9.05分,分别高于对照组的39.54±5.24分和76.15±9.21分,差异均有统计学意义(P<0.05);客观题成绩教改组为37.50±10.02分,对照组为36.61±10.06分,差异无统计学意义(P>0.05)。教改组70.73%学生对教学模式满意,21.95%比较满意,大多数学生认可案例引入教学法。结论:案例引入教学模式极大提高学生的学习兴趣和临床思维能力,明显提高教学质量。

医学院校基础实验课教学改革探索

分析现代医学教育改革提出的背景,今后实验教学改革的方法、手段,教学硬件与软件的改进与革新,建立健全合理、公正的教师实验课教学质量评估体系等,目的是培养具有适应现代医学模式的创新型实用人才,同时致力于探索高等医学院校实验教学模式建构等方面的作用和意义,力争形成一种新型的课堂教学模式。

五年制临床医学生医学微生物学教学探索

医学微生物学是临床医学生的专业基础课程,是连接基础医学和临床医学的桥梁课程。为了提高南通大学五年制临床医学生医学微生物学的教学效果,调查分析了学生现状,优化了施教老师组合,对教学内容、施教过程和教学效果评估进行了一系列的改革和探索,取得了较好的效果。

PBL模式在医学微生物学教学中的实践与探索

PBL(Problem-Based Learning)是以问题为导向的教学方法,是一种有效的教学补充手段,对提高学生的自学能力、交流与合作能力、分析及解决问题的能力有重要帮助。本文对PBL模式在医学微生物学教学中的实践进行了初步探索,分析总结了医学微生物学PBL教学的特点、主要问题及应对策略。

MicroRNA-27b的生物学功能研究进展

Micro RNAs（mi RNAs）是一类约22个核苷酸长度的非编码RNAs,在物种之间具有高度的保守性。成熟mi RNAs为单链,能与靶基因3′-UTR区域结合诱导该靶基因m RNA降解,抑制靶基因表达,参与调节细胞生长、分化、衰老、凋亡等过程。

加强病原生物学专业研究生科研能力培养的探索

研究生科研能力的培养是研究生教育的关键和核心内容。然而,由于研究生招生规模扩大等因素,研究生培养受到很大的制约。本研究以病原生物学专业研究生为研究对象,通过从文献阅读、实践能力等方面,探索提高病原生物学专业研究生的科研能力,以培养适合社会需求和学科需求的高级专业人才。

医学院校开设PBL课程的研究与探索

本校为提高临床医学专业学生的自主学习能力、临床思维能力及团队协作能力,在临床医学专业学生中开设以问题为导向教学方法的选修课程。结合本校的教学实践,主要从引入PBL课程的形式、案例的编写、教师tutor角色及学生面临的挑战等方面来进行探讨。

翻转式课堂在病原生物学教学中的应用和效果

目的探究翻转式课堂在病原生物学教学中的教学效果。方法选取2016级临床专业学生随机分为两组,一组进行翻转式课堂教学,另一组进行传统模式教学。从理论成绩、学生课堂表现、课程满意度等3个方面评价教学效果。结果跟传统教学模式组相比较,翻转式课堂教学组的学生在理论成绩、学生课堂表现及整体满意度等方面均高于传统教学模式组。结论翻转式课堂教学能进一步优化病原生物学的教学质量,为医学院校开展翻转式课堂提供借鉴和参考。

1个新的白介素-32剪接异构体的克隆与表达

目的对白介素-32(interleukin-32,IL-32)的不同剪接异构体进行克隆及表达。方法设计保守引物,以Jurkat细胞的cDNA为模板进行PCR扩增,克隆IL-32不同剪接异构体;DNA测序扩增产物,计算机辅助分析IL-32基因序列特征;构建IL-32原核及真核表达重组质粒,并利用SDS-PAGE和Western blot检测其表达情况。结果克隆得到已知的IL-32的6个剪接异构体(α、β、γ、δ、ε、ζ),还克隆得到1个新的IL-32剪接异构体,将其命名为IL-32η,Genbank登录号JN546102。IL-32η编码区长度为336 bp,编码的蛋白含111个氨基酸残基,其理论相对分子质量为12 560。IL-32η原核表达产物主要以可溶形式位于宿主菌的周质腔。亲和纯化了重组IL-32η,利用重组IL-32η制备了兔多克隆抗体,该抗体能够识别IL-32全部的7个剪接异构体。结论克隆得到1个新的IL-32剪接异构体IL-32η,它的发现将为全面理解IL-32的功能提供新思路。

miR-221在卵巢上皮癌患者中的表达及意义

目的分析miR-221在卵巢上皮癌(epithelial ovarian cancer,EOC)患者血清中的表达水平,并探讨其在EOC诊断中的临床应用价值。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测EOC组、卵巢良性肿瘤组及健康人对照组血清miR-221的表达水平,分析其与EOC患者临床病理参数的关系,同时检测各组血清CA125的含量,ROC曲线分析血清miR-221及CA125对EOC的诊断效能。结果血清miR-221在EOC组中的表达水平明显高于卵巢良性肿瘤组(U=133.12,P<0.05)和健康人对照组(U=194.86,P<0.05),而后两组间的差异无统计学意义(U=69.45,P>0.05)。血清miR-221单独诊断EOC的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.874(95%CI:0.826~0.922),当cut off值为4.32时,其敏感性为78.2%、特异性为81.3%;血清miR-221和CA125联合诊断EOC的AUCROC为0.923(95%CI:0.887~0.958),当cut off值为0.313时,敏感性为86.2%、特异性为83.5%。血清miR-221表达水平与EOC患者年龄(U=102.68,P=0.097)、有无淋巴结转移(U=86.85,P=0.134)、病理组织分型(H=5.74,P=0.295)无关,而与临床分期有关(H=15.21,P=0.023)。结论血清miR-221在EOC患者中的表达水平升高,与CA125联合检测可以提高对EOC诊断的效能。

炎症性肠病的实验室检查及代谢组学的研究进展

目前,炎症性肠病(inflammatory bowel disease,I B D)的诊断和预后主要基于病史、临床表现、内镜、组织学、影像学和实验室检查,但是仍然面临较大的挑战.已有研究表明,将代谢组学应用于IBD的研究具有重要价值.本文就IBD的实验室检查手段和代谢组学用于IBD的研究进展进行综述.

噬菌体展示技术筛选与白介素-32相互作用的蛋白

目的利用T7噬菌体展示技术筛选与白介素-32(interleukin-32,IL-32)相互作用的蛋白。方法构建IL-32α的原核表达重组质粒,表达并纯化重组IL-32α蛋白(recombinant IL-32α,rIL-32α);以纯化后的rIL-32α作为靶蛋白,应用T7噬菌体展示技术对人肝细胞cDNA文库进行筛选;对筛选到的阳性克隆进行DNA测序及计算机辅助分析;利用哺乳动物双杂交实验和免疫共沉淀实验对筛选到的阳性克隆进行验证。结果成功表达并亲和纯化了rIL-32α蛋白;经过5轮筛选,投入和产出的噬菌体滴度比值达到稳定;同源性分析初步确定9个与IL-32α蛋白相互作用的蛋白;进一步实验证实IL-32α与这9个蛋白片段能发生相互作用。结论利用T7噬菌体展示技术成功筛选到9个与IL-32α相互作用的蛋白,我们的发现为深入揭示IL-32的生物学功能奠定了研究基础。

日本血吸虫T2核酸酶的原核表达及活性分析

目的构建日本血吸虫T2核酸酶表达载体,并进行体外表达和酶活性分析。方法从日本血吸虫基因组数据库中找到与曼氏血吸虫虫卵抗原Omega-1同源性最高的蛋白AY814845,设计引物并通过PCR技术扩增得到该基因,将其成熟编码区连入pET32a表达载体,转化大肠杆菌并用IPTG诱导其表达,最后对表达产物的核酸酶活性进行分析。结果成功的构建了日本血吸虫T2核酸酶的表达载体,其编码区能够在大肠杆菌中表达,且表达产物具有一定的核酸酶活性。结论从体外扩增了日本血吸虫T2核酸酶AY814845,明确其表达产物具有核酸酶活性,为今后深入研究该蛋白的功能打下了基础。

留学生人体寄生虫学全英文教学初探

探讨医学留学生人体寄生虫学教学中存在的教学语言、教材、教学内容及留学生等方面的问题,结合人体寄生虫学教学特点,对教学语言、教学准备和教学方法进行了改进和探索。

脂多糖对人肝星状细胞株LX-2活化和凋亡相关蛋白表达的影响

目的:探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对人肝星状细胞株LX-2增殖、活化和凋亡相关蛋白表达的影响.方法:应用Western blot技术检测脂多糖刺激的LX-2细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、结蛋白(Desmin)和活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase3)表达.结果:人肝星状细胞株LX-2经脂多糖刺激后,PCNA和Desmin表达呈现先上升后下降的趋势;活化的Caspase3在脂多糖低浓度或短时间刺激LX-2时无表达,在脂多糖高浓度或长时间刺激后呈现显著上升.结论:脂多糖在适当的条件下能够诱导LX-2细胞增殖、活化以及凋亡.

案例教学法在人体寄生虫学教学中的应用

由于学科结构的调整,传统的讲授法在人体寄生虫学实施过程中遇到诸多的问题,文章探讨了将案例教学法应用到人体寄生虫学教学中的可行性,阐述了其实施的具体过程,详细分析了实施中可能会遇到的问题并提出了解决方案,力争提高课堂教学效率和学生学习效果。

乳酸乳球菌食品级表面表达系统建立和报告基因检测

目的 :建立乳酸乳球菌食品级高效表面表达系统。方法 :克隆并表达枯草芽孢杆菌基因组中γ-多聚谷氨酸合成酶亚基跨膜蛋白Pgs A,同时将报告基因——金黄色葡萄球菌耐热核酸酶融合在Pgs A蛋白C-末端,通过甲苯胺蓝-DNA琼脂平板检测酶活性。结果:耐热核酸酶基因被成功表达并锚定在细胞表面,具有较高酶活性。结论:该系统的成功建立为未来高致病性病原微生物抗原簇重组表达,进而研制新型基因工程口服疫苗奠定基础。

白念珠菌CaPSY2基因的敲除和功能研究

目的:研究人体病原真菌白念珠菌CaPsy2蛋白的功能,探讨它在DNA损伤检查点修复过程中所起的作用。方法:采用同源重组的方法构建CaPSY2双等位基因缺失株,并利用倍比稀释法探讨CaPSY2缺失株在含有遗传毒性试剂平板上的表型。结果:PCR检测结果显示CaPSY2双等位基因缺失株构建成功,而表型结果显示CaPsy2缺失会导致缺失株对遗传毒性试剂敏感,且这种敏感性表型可以被外源的CaPSY2基因互补。结论:CaPsy2蛋白参与DNA损伤修复过程,并且可能作为CaPph3的调节亚基而发挥作用。

利用重叠延伸PCR快速构建中国株乙型肝炎病毒的感染性克隆

目的 :体外扩增中国株乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的基因组全长序列,快速构建中国株HBV感染性克隆,建立中国株HBV体外复制细胞模型。方法:设计保守引物,扩增HBV全长基因组序列。对扩增到的HBV基因组进行DNA测序及计算机辅助分析,确定病毒的基因型。通过重叠延伸PCR(splicing by overlap extension PCR,SOEPCR)技术,构建1.3倍基因组长度的HBV感染性克隆质粒pHBV1.3。将pHBV1.3质粒转染人肝癌细胞系HepG2,采用Western Blot、酶联免疫吸附试验及Real-PCR检测病毒复制及表达情况。检测该感染性克隆对临床抗病毒药物阿德福韦的敏感性。结果:成功扩增到1株C基因型HBV全长基因组,其GenBank登陆号为KF495606。构建了中国株HBV感染性克隆pHBV1.3(C)质粒,该质粒能在肝癌细胞株中进行有效的复制、转录和表达。阿德福韦能在体外抑制该HBV感染性克隆的复制,抑制程度依赖于药物浓度。结论:利用SOE-PCR可快速构建HBV感染性克隆,所构建的感染性克隆能介导高水平病毒复制,可用于HBV复制机制和抗病毒等方面的研究。

GPR37在骨髓瘤细胞黏附介导的耐药中的作用及意义

目的:研究G蛋白耦联受体37(orphan G protein-coupled receptor 37,GPR37)在细胞黏附介导的多发性骨髓瘤细胞耐药过程中的表达变化及其生物学作用。方法:采用多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226与纤黏蛋白(fibronectin,FN)或骨髓基质细胞株HS-5共培养构建细胞黏附模型。Western Blot检测GPR37分别在悬浮和黏附状态的RPMI 8226细胞中的蛋白表达水平。钙黄绿素实验检测改变GPR37的表达对RPMI 8226细胞黏附的影响,并采用化疗药物多柔比星处理细胞,CCK-8试剂盒检测上述处理对RPMI 8226细胞活力的影响。结果:Western Blot结果显示GPR37在RPMI8226细胞黏附模型中低表达。钙黄绿素实验结果显示RPMI 8226细胞过表达GPR37后其黏附能力显著降低。CCK-8实验结果表明GPR37过表达能显著增强RPMI 8226细胞对化疗药物多柔比星的敏感性。结论:GPR37可能通过影响骨髓瘤细胞与基质细胞的黏附能力从而影响其对化疗药物的敏感性。