南通大学病理教学的改革与创新

目的:为了培养学生的学习能力和创新精神,更好地掌握病理学知识,南通大学医学院病理学科从教学多环节、多阶段,全方位地进行教学改革的研究与实践。方法:科学制定与完善教学大纲,重视课内教学与第二课堂活动相结合,创新考核方式与评价系统。结果:教学大纲的设计既适应人才培养的需要,适应学生的实际水平,又体现传授知识、培养能力、提高素质相结合的原则,还反映病理学科自身的特色。开展病理第二课堂的活动是对教学内容的有益补充。多种形式的考核对学生学习进行综合评价,创造了公平、公正的竞争环境和比、学、超的学习氛围。结论:南通大学病理教学的改革与创新能全方位调动学生多感官参加学习,符合学生认知规律,促进了学生对病理知识(技能)的理解、掌握和应用,体现了教学中学生的主体地位,深受同学欢迎。

NET-1、Ki67和CD34在胃癌组织中的表达及其临床病理意义

目的探讨胃癌组织中NET-1、Ki67和CD34表达的临床病理学意义。方法应用免疫组化二步法检测86例胃癌组织中NET-1、Ki67和CD34的表达,对三指标均阳性病例进行免疫组化三重标记法双染方法,原位检测三指标的表达特点和毗邻关系。所有病例随访60月以上。结果胃癌组织中NET-1、Ki67和CD34高表达分别为56.98%、74.42%和62.79%,三指标阳性表达呈显著正相关(P<0.01)。三指标高表达分别与肿瘤临床分期呈正相关(均P<0.05),与患者生存率呈负相关(均P<0.05),其3、5年生存率均显著低于相应的低表达组或阴性组(P<0.05,P<0.01)。NET-1、Ki67高表达分别与肿瘤分化呈负相关(均P<0.01)。NET-1、CD34高表达分别与癌浸润深度、淋巴结转移呈正相关(均P<0.05)。结论NET-1、Ki67和CD34在胃癌组织中高表达与癌细胞增殖、癌血管形成和预后差有关。

乳腺癌患者HER-2、PCNA和E-cadherin蛋白表达及临床病理特征与预后的相关性

目的:探讨乳腺癌组织中HER-2、PCNA和E-cadherin蛋白表达,分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系,并探讨三者及临床病理特征与乳腺癌预后的关系。方法:应用SP免疫组化方法检测70例浸润性乳腺癌组织和10例乳腺纤维腺瘤病变中HER-2、PCNA和E-cadherin蛋白的表达。结果:HER-2、PCNA和E-cadherin在乳腺癌组织中的高表达率分别为58.57%、64.29%、40.00%,与乳腺纤维腺瘤组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。乳腺癌组织中三者的表达均与临床TNM分期、组织学分级、淋巴结转移数目密切相关(P<0.05),另外,HER-2的表达与雌激素受体(ER),E-cadherin的表达与肿瘤大小亦密切相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示随着HER-2、PCNA蛋白表达的增多、淋巴结转移数目的增加及临床分期级别的增高,患者的生存率均明显下降(P<0.01)。多因素Cox回归分析表明,HER-2和临床TNM分期均为乳腺癌患者独立的远期预后指标(P<0.05)。结论:乳腺癌中HER-2和PCNA的过表达,及Ecadherin表达的缺失与肿瘤的发生发展、增殖、侵袭转移及预后密切相关。联合检测HER-2、PCNA和Ecadherin有助于筛选出具有高复发及转移危险的患者,从而指导临床治疗。

胃癌中微血管密度与临床病理因素和预后的关系

目的:观察胃癌中CD34表达的微血管密度(MVD)与胃癌临床病理因素和预后的相关性。方法:应用免疫组化SP法分别检测86例胃癌组织中CD34的基因表达,结合临床病理因素和随访资料分析MVD对胃癌预后的影响。结果:胃癌中MVD值均为(27.8±10.3)/HP,正常胃黏膜中MVD值为(13.02±8.25)/HP,前者高于后者(t=4.371,P<0.01)。MVD与癌浸润程度、淋巴结转移、肿瘤临床分期呈正相关(均P<0.05),与患者生存率呈负相关(P<0.05),其中MVD>15/HP的5年生存率低于MVD≤15/HP组(P<0.05)。结论:胃癌中MVD与癌生物学行为密切相关,其增加能显著上调和促进癌进展,是判断预后的重要指标。

病理学双语教学中教材的创新与建设

目的:探讨双语教材的建设与应用。方法:采用全中文与英文对照的形式编写《病理学》、《病理学实验与考试指导》作为双语教学的课内教材,同时编写《病理学形成性练习》、《病理学听读训练》、《现代病理学临床研究的基本问题》分别作为学生实践练习与选修课教材或课外阅读材料。结果:其中4种教材已由科学出版社正式出版发行。双语教材的建设在南通大学病理学双语教学中发挥了重要的作用。结论:双语教材的建设与创新是进行双语教学的基本保证。

关于多媒体技术与病理学教学的思考

病理学是一门形态学科,是基础医学和临床医学之间的桥梁,它着重从形态学的角度阐述病变器官、组织的大体和镜下特点,从而理解疾病的发生发展规律,揭示疾病的本质,其形象直观性和真实具体性在教学中显得尤为重要。我校近年逐步完善了计算机辅助教学设施，在多数教室中配置了多媒体电脑、投影仪、扩音系统．在形态学实验室配置了互动多媒体教学系统。病理教研室使用多媒体教学已近十年，成功提高了病理教学质量，在教学中也有不少体会。

留学生病理学实验课教学的初步探索

从改革开放至今，中国经济快速发展，教育质量水平和国际地位明显提高，吸引了越来越多的国外留学生来华求学，其中包括大量的医学留学生。留学生教育作为一项全新的，富有挑战性的教育类型，已经越来越多地受到高等教育部门的重视，成为高等医学教育的重要组成部分。

肝细胞癌患者Eag1表达与临床病理特征的相关性

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者中Eag1表达与临床病理特征、外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)的相关性。方法采用免疫组织化学(IHC)法检测186例HCC组织芯片中Eag1的表达。分析Eag1的表达与患者临床病理特征、NLR、PLR及预后的相关性。结果IHC结果显示,Eag1在HCC组织中的阳性表达率为82.3%(153/186),高于其在癌旁组织中的阳性表达率56.5%(105/186),差异有统计学意义(P<0.01)。HCC中Eag1阳性表达与乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、血清甲胎蛋白(AFP)、肝硬化、肿瘤分级、脉管内癌栓、术后复发因素相关(P<0.05或P<0.01)。治疗前外周血NLR、PLR与HBsAg、AFP、肝硬化、肿瘤分级、脉管内癌栓、术后复发因素相关(P<0.05或P<0.01)。HCC组织中Eag1阳性表达与NLR、PLR呈显著正相关(P=0.001)。结论在HCC恶性进展中,Eag1高表达可能是关键的分子事件之一。Eag1作为肿瘤特异性分子标志物,其表达能反映肿瘤的恶性状态,有助于评估HCC患者的预后。HCC中Eag1高表达可影响外周血中NLR、PLR,提示其参与乙型肝炎病毒感染导致的肝炎、肝硬化、肝癌的发生过程。Eag1或是HCC靶向治疗的有效靶点。

大肠癌细胞增殖的病理意义与预后相关性研究

目的:研究大肠癌细胞增殖的病理意义与预后相关性。方法:大肠癌手术切除标本88例,均作常规病理检查及检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达,观察在不同临床病理因素中癌细胞PCNA表达的差异与意义,并作预后相关性的分析。结果:PCNA可表达于正常肠粘膜基底层细胞核中呈极性分布,在癌细胞中广泛表达,并呈异质性分布,其表达强度显著高于正常肠粘膜(P<0.05)。大肠癌中PCNA表达与肿瘤细胞分化、Duck分期及淋巴结转移情况均有显著相关(P<0.05)。癌中PCNA强阳性表达的患者其5年生存期显著低于弱表达组(P<0.05)。结论:在大肠癌常规病理诊断中联合PCNA检测,对疾病的进展与预后评估有一定的价值。

肺癌中EGFR、VEGF与NET-1的表达及与临床病理因素的关系

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮生长因子(VEGF)、NET-1在肺癌中的表达及其与临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学SP法,检测120例肺癌组织及10例正常肺组织(对照组)中EGFR、VEGF、NET-1的表达。结果 EGFR、VEGF、NET-1在肺癌中的阳性表达率(69.16%、55.83%、85.00%)明显高于正常肺组织(10.00%、0.00%、40.00%)。EGFR、VEGF、NET-1蛋白在肺癌中的表达差异与患者性别、年龄、病变部位无关(P均>0.05),但与肺癌组织的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移相关(P<0.05)。结论 EGFR、VEGF、NET-1的阳性表达与肺癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移有关,且在癌组织中表达强度显著高于正常组织,提示三者具有促进肿瘤细胞转化、增殖、迁移的作用,可作为临床判定肺癌恶性程度及评估预后的指标。

乳腺癌微环境中T细胞与临床病理因素的相关性

目的:探讨乳腺癌中间质肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)包括CD8^(+)TILs、CD4^(+)TILs、三维淋巴结构(TLS)与临床病理因素和分子亚型的相关性。方法:收集我院2015年至2017年乳腺癌标本200例,经常规石蜡包埋制片,判读HE染色切片间质TLS个数,采用免疫组织化学SP法检测200例病例中CD8^(+)TILs和CD4^(+)TILs浸润密度。结果:乳腺癌间质CD8^(+)TILs、CD4^(+)TILs、TLS与SBR分级、病理TNM分期、Ki67、p53呈正相关;CD8^(+)TILs和CD4^(+)TILs与淋巴结转移呈正相关;与患者年龄呈负相关(均P<0.05)。CD8^(+)TILs和CD4^(+)TILs呈正相关(P<0.05)。TLS以CD4^(+)TILs为主,分别与CD8^(+)TILs和CD4^(+)TILs呈正相关(均P<0.05)。在乳腺癌不同分子亚型中CD8^(+)TILs、CD4^(+)TILs和TLS存在显著差异。结论:乳腺癌中浸润的CD8^(+)TILs、CD4^(+)TILs、TLS反映局部肿瘤微环境的免疫状态,三者密切相关。乳腺癌组织中增多的CD4^(+)TILs诱导CD8^(+)TILs产生CD8^(+)Treg细胞参与乳腺癌的免疫抑制,导致乳腺癌局部免疫功能下降,促进乳腺癌进展及转移。结合乳腺癌分子亚型和局部免疫状态的分析将更有利于预测乳腺癌进展的生物学潜能和对分子靶向性疗效和预后的评估。

肝癌及相关组织中NET-1基因与蛋白的表达

背景与目的:NET-1是最近发现的肿瘤相关基因,它在肝癌中的表达目前尚未见报道。本研究在胚胎肝、成人肝、肝癌及相应的癌旁组织中筛检和比较NET-1基因和蛋白表达,以探讨NET-1基因在肝癌表达的特征。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测3例胚胎肝、4例成人肝、4例验证肝癌组织和28例肝癌与相应癌旁组织中NET-1mRNA的表达,由四星图像分析系统软件检测NET-1基因mRNA的光密度。用基因生物工程方法制备NET-1多克隆抗体,并用激光共聚焦显微镜观察免疫荧光细胞化学检测培养的人肝癌细胞系SMMC-7721中NET-1抗体的表达,免疫组化法检测28例肝癌与癌旁组织中NET-1蛋白的表达。结果:(1)正常成人和胎儿肝组织中NET-1基因mRNA不表达,4例验证肝癌组织中NET-1基因mRNA均呈阳性表达;肝癌与癌旁组织中NET-1基因mRNA高表达,阳性率均为85.71%(24/28)。肝癌组织中NET-1mRNA的平均光密度显著高于癌旁组织(0.64与0.47,P<0.05)。(2)经激光共聚焦显微镜观察SMMC-7721细胞中NET-1抗体的表达定位于胞浆。(3)免疫组化检测NET-1多克隆抗体在同组肝癌和癌旁组织中NET-1蛋白检出率分别为96.43%(27/28)和71.43%(20/28),两者差异具有显著性意义(P<0.05)。(4)RT-PCR方法和免疫组化方法检测肝癌和癌旁组织中NET-1基因mRNA表达与蛋白表达两者之间阳性率无显著性差异,并呈显著性正相关(癌中r=0.48,癌旁r=0.40,均P<0.05)。结论:NET-1基因表达可能是肝癌发生的早期分子事件,该基因在肝癌诊断中可能有一定的参考价值。

胶质瘤中hTERT、maspin和bFGF表达的相关性及意义

背景与目的:人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)是端粒酶激活的决定因子,与肿瘤的形成和恶性程度有关,其表达受多种因素的调控。本研究检测胶质瘤中hTERT、maspin和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)蛋白的表达,并分析它们的相关性及其与临床病理因素之间的关系。方法:应用原位杂交法、免疫组织化学SP法分别检测128例胶质瘤和8例正常脑组织中hTERT及maspin、bFGF蛋白的表达;检测结果的半定量评定参照Gatalica的H-score(H=I×P)系统;两组间率的比较用χ2检验;不同级别胶质瘤中hTERT、maspin和bFGF的表达采用Spearman等级相关分析;hTERT与maspin和bFGF表达之间的关系采用直线相关分析。结果:(1)胶质瘤中hTERT、maspin、bFGF阳性率分别为51.6%(66/128)、46.9%(60/128)、62.5%(80/128)。8例正常脑组织均不表达hTERT、bFGF,7例表达maspin。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中,hTERT阳性率分别为32.6%(14/43)、54.5%(30/55)、73.3%(22/30);maspin阳性率分别为58.1%(25/43)、49.1%(27/55)、26.7%(8/30);bFGF阳性率分别为39.5%(17/43)、72.7%(40/55)、76.7%(23/30)。hTERT、maspin和bFGF在正常脑组织和不同级别胶质瘤中的表达差异均有显著性(P﹤0.05),hTERT和bFGF表达与病理分级呈正相关(ρ=0.515,P﹤0.01;ρ=0.611,P﹤0.01),maspin表达与病理分级呈负相关(ρ=-0.425,P﹤0.05)。(2)hTERT表达与maspin蛋白表达呈负相关(r=-0.658,P<0.01),与bFGF蛋白表达呈正相关(r=0.627,P<0.01);maspin和bFGF蛋白表达呈负相关(r=-0.501,P<0.01)。(3)hTERT表达与年龄、性别、肿瘤直径和细胞密度无关(P>0.05),与核分裂相、血管密度、坏死显著相关(P<0.05)。结论:hTERT、maspin和bFGF三者间的表达有相关性,均与胶质瘤恶性程度有关。

1型糖尿病大鼠模型建立及稳定性研究

目的探讨链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导SD大鼠1型糖尿病模型的方法并观察模型稳定性。方法按禁食与否、不同体重、不同给药剂量及不同给药途径对SD大鼠进行分组实验,观察其成模率,并在以最佳方式制备糖尿病模型后,分别于3,7,14,21 d和28 d对成模动物的血糖、每日采食量、饮水量和排尿量进行测定,并与对照组作比较分析。结果选择体重范围为201-240 g SD大鼠,禁食后以50mg/kg STZ一次性腹腔注射为最佳诱发糖尿病模型方式,其成模率可达到83.3%,成模大鼠于注射后72 h,血糖均稳定维持在18.7-21.1 mmol/L左右,同时成模后即出现多饮、多尿和多食表现,其症状体征与临床病人比较相似。结论成功制备1型SD大鼠糖尿病模型,且具有较好的稳定性。

雷公藤内酯醇调节5-脂氧合酶对胰腺癌细胞增殖的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(Triptolide,TL)在胰腺癌细胞中5-脂氧合酶(5-LOX)蛋白的表达及对癌细胞生长的影响。方法:应用免疫细胞化学法检测胰腺癌细胞株SW1990和Capan2中5-LOX蛋白的表达,同时检测TL对胰腺癌细胞株SW19905-LOX蛋白表达的影响,采用M TT法和流式细胞术分别检测胰腺癌细胞SW1990的增殖和凋亡。结果:胰腺癌细胞株SW1990和Capan2中均表达5-LOX,并与细胞分化程度有关;TL抑制SW1990中5-LOX蛋白的表达,并抑制胰腺癌细胞SW1990增殖和促进细胞的凋亡,作用随浓度的增加而增强(P<0.01);细胞的增殖和凋亡与5-LOX蛋白的表达相关(P<0.01)。结论:TL抑制胰腺癌细胞SW1990中5-LOX的表达,并抑制胰腺癌细胞增殖和诱导凋亡,5-LOX代谢途径在胰腺癌细胞的生长中发挥重要作用。

胃癌NET-1、Ki-67表达及意义

目的研究胃癌组织中NET-1和Ki-67表达与其预后的关系。方法分别应用免疫组化EnVision两步法检测86例胃癌组织中NET-1和Ki-67的表达,对两指标均阳性病例行免疫组化双标双染方法,原位检测两指标的表达特点和比邻关系。所有病例随访60月以上。结果胃癌组织中NET-1和Ki-67高表达分别为56.98%和74.42%,两指标阳性表达呈正相关(P<0.01)。两指标高表达分别与癌分化呈负相关(均P<0.01);与癌临床分期呈正相关(均P<0.05);与患者生存率呈负相关(均P<0.05),其3年、5年生存率均低于相应的低表达组或阴性组(P<0.05,P<0.01);NET-1表达还与癌淋巴结转移呈正相关(P<0.01)。结论NET-1、Ki-67基因蛋白高表达反映胃癌细胞群体增殖活性,上调癌进展,预后较差。

肝癌动物模型建立的方法

肝细胞癌是一种常见的恶性肿瘤,尽管近年来采用分子生物学技术研究肝癌的发生,但仍缺乏对肝癌发病机制的确切认识。随着人们对肝癌动物模型研究的不断深入,逐渐建立了自发型、诱发性、移植性及转基因动物肝癌模型。因为这些模型很好地模拟了人类肝癌,可以用于肝癌的生理、细胞和分子等发病机制方面的研究,也可用于肝癌治疗药物的筛选以及基因治疗的探索。本文讨论一些有条件地、选择性诱导肝癌模型的情况,重点关注与人类肝癌关系最密切的肝癌动物模型,并对动物模型的临床应用进展进行简要介绍。

脑星形细胞肿瘤微血管密度和NET-1蛋白的表达及其相关性

目的探讨脑星形细胞肿瘤组织中微血管密度(MVD)和NET-1蛋白表达的意义。方法应用免疫组化方法,检测65例脑星形细胞肿瘤组织和5例正常脑组织中,NET-1蛋白的表达以及血管内皮细胞表面抗原CD34单抗标记测定MVD,分析NET-1蛋白表达和MVD与脑星形细胞肿瘤分级关系。结果MVD与脑星形细胞肿瘤分级相关,NET-1阳性组MVD显著高于NET-1阴性组,NET-1表达强度与MVD呈高度正相关(rs=0.6682,P<0.05)。结论MVD可以是判断星形细胞瘤恶性程度指标之一,NET-1可能通过促进星形细胞肿瘤组织微血管形成发挥作用。

CDK4和Geminin在胶质瘤中的表达及其与预后的关系

目的:探讨细胞周期依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)和Geminin在胶质瘤中的表达及其临床病理意义。方法:采用免疫组织化学方法,检测70例胶质瘤中CDK4和Geminin的表达,分析CDK4和Geminin的表达和其相关性,以及二者与胶质瘤临床病理因素及生存时间的关系。结果:CDK4、Geminin在胶质瘤中的总阳性率分别为70.0%(49/70)、75.7%(53/70);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中CDK4阳性率分别为52.8%(19/36)、84.6%(22/26)、100.0%(8/8),Geminin阳性率分别为58.3%(21/36)、92.3%(24/26)、100.0%(8/8),CDK4和Geminin在不同级别胶质瘤中的表达有显著差异(P<0.05)。且二者表达呈正相关;CDK4、Geminin阳性表达与肿瘤大小及细胞核分裂像多少有关(P<0.05),与患者年龄、性别以及肿瘤组织有无坏死无关(P>0.05);Kaplan-Meier单因素统计分析结果显示CDK4、Geminin阳性表达组的患者术后生存时间明显短于CDK4、Geminin阴性表达组(P<0.001)。结论:CDK4和Geminin表达与胶质瘤的分级、预后有关,联合检测CDK4和Geminin有助于判断胶质瘤恶性程度及评估预后。

Survivin、PTEN蛋白在脑星形细胞瘤中的表达及其相关性

目的探讨Survivin、PTEN蛋白在脑星形细胞瘤中的表达及其相关性。方法应用免疫组化SP法,检测65例脑星形细胞瘤患者的肿瘤标本中Survivin、PTEN蛋白的表达。结果不同级别间的脑星形细胞瘤Survivin蛋白的表达阳性率差异有统计学意义,Ⅱ级显著低于Ⅲ级与Ⅳ级(均P<0.05);不同级别间PTEN蛋白表达的阳性率差异有统计学意义,Ⅱ级显著高于Ⅲ级与Ⅳ级(P<0.05,P<0.001);两者在脑星形细胞瘤中的表达呈负相关(r=-0.5367,P=0.002)。结论Survivin、PTEN蛋白的表达与脑星形细胞瘤形成有关,抑癌基因PTEN的突变与Survivin基因的表达可能在星形细胞瘤的恶性进展中起协同作用。