病理生理学课程双语教学实践四步法初探

双语教学是培养与国际接轨的卓越医师的重要途径,也是高等医学教育发展的必然趋势。本文旨在探讨如何在"以人为本"教育理念指导下,因材施教,实施病理生理学课程双语教学。我们以本一、本二临床医学专业学生为研究对象,严格按照"调查-备课-授课-总结"这4个步骤实施双语教学:(1)调查——知己知彼:按照教学大纲结合双语教学模式,制定教与学的共同目标;(2)备课——充实资料:双语化各种教学资源,包括讲义、词汇、课件、视频、习题、病案及实验手册等;(3)授课——合作互动:利用先进的多媒体技术,采用问题、启发、讨论及竞赛等方法开展多样的教学活动;(4)总结——调整完善:通过师生调查表客观评价教学模式、环节及效果,及时改进存在的问题与不足,以不断优化下一轮双语教学。综上所述,我们与时俱进地推行医学教学改革,以"四步法"认真践行和科学定位,初步建立合理的病理生理学课程双语教学和评价体系,不仅提升了学生的专业英语水平,还培养出紧密合作的师资团队。相信经过广大同仁的不断探索,一定能开辟出适合我国医学院校发展的双语教学之路,培养出新世纪医学人才。

QQ平台辅助病理生理学理论教学的实施与评价

目的:与传统教学方法进行比较,探讨QQ平台在辅助本科生病理生理学理论教学中的作用。方法:在2011级本科生中抽取4个班,实验组和对照组各2个班,在实验组中以QQ平台辅助教学,在对照组中仍采用传统教学方法。课程结束后,在学生中进行问卷调查,同时比较实验组和对照组期末考试成绩差异。结果:采用QQ平台辅助教学能更好地加强师生之间互动交流、激发学生学习兴趣、改善教学效果、提高教学质量。

以团队为基础的学习教学模式在病理生理学教学中的应用初探

病理生理学是沟通临床医学与基础医学的一门桥梁学科,同时又与多学科密切交叉联系。将以团队为基础的学习(Team based learning,TBL)教学模式应用到病理生理学教学过程中,可提高学生学习的主动性以及独立思考、分析问题和解决问题的能力,并能培养其团队协作能力和与人交往的能力,同时提高教师的综合素质。

病例教学法在病理生理学理论教学中的实施与评价

目的与传统的灌输式理论教学方法进行比较，探讨在本科生病理生理学理论教学中开展病例教学法的必要性，探索开展病例法教学的可能方法，并评价其效果。方法在2005级本科生中抽取儿科专业两个班作为实验班，五官专业两个班作为对照班，在实验班中采用全程病例教学法，在对照班中仍采用传统的灌输式理论教学方法。课程结束之后，在学生中进行问卷调查，同时采用实验班和对照班期末考试考同一份卷的方法比较两种教学的成绩差异。结果采用病例教学法能够更好地调动学生的学习兴趣和热情，培养学生分析问题、解决问题及临床思维的能力，也可以促进教师综合教学能力的提高，并进一步提高病理生理学的理论教学质量。

导师制在本科生病理生理学教学中的探索与实践

病理生理学作为医学教学中的必修课程,学科知识面广,知识更新快,要在有限的教学时间内最大限度地提高教学效率和效果,教学改革势在必行。导师制引入医学本科生的病理生理学教学中,是病理生理学教学方法改革的一个探索。本文将对导师制在本科生病理生理学教学中的研究目标、具体实施方法及体会进行探讨。

留学生病理生理学实验教学实践及体会

本文通过留学生病理生理学实验教学的实践,对目前留学生病理生理学实验教学中存在的教材、教学准备以及教学方法等问题进行了探讨,以期进一步提高留学生教学的质量和效果。

病理生理学精品课程建设探索

精品课程建设极大地推动了高等院校的课程建设和教学改革,提高课程教学质量。根据精品课程建设的要求,我们病理生理学系从优化师资队伍、更新教学内容、改革教学方法和手段等方面进行建设。本文总结了南通大学医学院病理生理学系在创建校级精品课程的经验和体会。

非小细胞肺癌患者血浆高迁移率族蛋白B1水平与临床病理的关系

目的:明确高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及NSCLC患者血浆HMGB1水平与临床病理的关系。方法:收集在南通大学附属医院和苏州大学附属第二医院手术的NSCLC患者肺癌组织和癌旁组织,采用实时定量聚合酶链式反应及Western Blot方法检测组织中HMGB1 mRNA和蛋白表达水平;收集30例正常对照者和50例NSCLC患者血浆(其中20例NSCLC患者术前和术后的血浆),采用酶联免疫吸附试验检测血浆HMGB1水平,并进一步分析患者血浆HMGB1水平与NSCLC临床特征间的关系。结果:NSCLC组织中HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平较癌旁组织显著升高(P<0.01)。正常对照组血浆HMGB1水平为(2.27±0.63)ng/mL,NSCLC患者为(5.86±1.60)ng/mL,两者间差异有统计学意义(P<0.01);NSCLC患者血浆HMGB1水平术前为(5.67±0.67)ng/mL,术后为(3.34±0.67)ng/mL,两者间差异有统计学意义(P<0.01);随着肿瘤直径的增大(≥3 cm)、临床分期的增加(Ⅲ~Ⅳ期)及远处转移的出现,患者血浆HMGB1水平明显升高(P<0.01)。结论:HMGB1在NSCLC进展过程中起重要作用,血浆HMGB1可以作为一类新型肿瘤生物学标志物,在NSCLC的诊断、病情和疗效的评估中有应用前景。

肺癌124例临床和病理特征分析

目的:探讨肺癌患者病理类型及分级与年龄、性别、淋巴结转移及肿瘤性坏死等因素的关系。方法:回顾性统计分析124例肺癌患者的临床和病理资料。结果:男性以鳞状细胞癌为主,在各病理类型中占52.50%,差异具有统计学意义(χ2=15.902,P<0.001);女性则以腺癌为主,在各病理类型中占77.27%,差异具有统计学意义(χ2=15.841,P<0.001)。106例患者中周围型和中央型肿块分别占61.32%、38.68%,周围型和中央型中腺癌分别占72.31%、19.51%,差异具有统计学意义(χ2=28.071,P<0.001),提示腺癌以周围型肿块多见;周围型和中央型中鳞癌分别占24.62%、65.85%,差异具有统计学意义(χ2=17.734,P<0.001),提示鳞癌以中央型肿块多见。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级腺癌淋巴结转移率分别为20.00%、21.74%、53.85%,差异有统计学意义(χ2=4.691,P<0.05),提示腺癌Ⅲ级较Ⅰ级、Ⅱ级更容易发生淋巴结转移。106例患者中57例(53.77%)发生肿瘤性坏死,其中鳞癌和腺癌肿瘤性坏死发生率分别为67.44%、36.36%,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级鳞癌肿瘤性坏死发生率分别为33.33%、86.67%、68.42%,鳞癌Ⅰ级与鳞癌Ⅱ、Ⅲ级相比,差异具有统计学意义(P<0.05),提示鳞癌Ⅰ级较鳞癌Ⅱ级、Ⅲ级不易发生肿瘤性坏死。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级腺癌肿瘤性坏死率分别为0.00%、27.59%、80.00%,腺癌Ⅰ级与腺癌Ⅱ、Ⅲ级相比,差异有统计学意义(P<0.05),提示腺癌Ⅰ级很少发生肿瘤性坏死,而腺癌Ⅲ级较易发生肿瘤性坏死。结论:分析肺癌患者的临床和病理特征对肺癌的早发现、早诊断、早治疗及判断预后有重要意义。

大鼠海马神经元TLR4介导的MyD88依赖途径在神经炎症中的作用

目的:研究大鼠海马神经元是否有Toll样受体4(TLR4)介导的的髓样分化因子88(MyD88)依赖途径及该途径的激活在神经炎症中的作用。方法:采用体外培养7 d的新生大鼠海马神经元,细胞免疫荧光双标法鉴定海马神经元纯度。用TLR4配体脂多糖(LPS)或TLR4抗体预处理海马神经元,以激活或阻断TLR4的作用。实时定量PCR(RT-qPCR)方法检测海马神经元中MyD88、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)mRNA的表达;Westernblot方法测定海马神经元MyD88和TRAF6蛋白水平;细胞免疫荧光双标法观察海马神经元中核因子κB/P65(NF-κB/P65)的表达定位及TLR4激活或阻断后NF-κB/P65核易位情况;ELISA检测培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和一氧化氮(NO)的水平。结果:LPS能上调海马神经元MyD88和肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF6)mRNA水平;促使NF-κB/P65转位至核;增加MyD88和TRAF6蛋白的表达;增加海马神经元培养上清中TNF-α、IL-1β和NO含量;TLR4抗体预处理能减弱LPS对海马神经元NF-κB/P65核易位作用及降低培养上清中TNF-α、IL-1β和NO的水平。结论:大鼠海马神经元有TLR4介导的的MyD88依赖途径,该途径的激活能导致TNF-α、IL-lβ和NO含量的增加。海马神经元TLR4介导的MyD88依赖途径参与了神经炎症反应,神经元不是神经炎症反应中的被动者。

TLR_4/P38/JNK信号通路在海马神经元凋亡中的作用

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/P38/JNK信号通路在海马神经元凋亡中的作用及其机制,为神经退行性疾病(ND)的发病机制与防治研究提供新的实验依据。方法:采用体外培养7 d的新生大鼠海马神经元,免疫荧光双标法鉴定海马神经元纯度。用TLR4配体脂多糖(LPS)或TLR4抗体预处理海马神经元,以激活或阻断TLR4的作用。实验1设正常对照组、LPS组及TLR4抗体+LPS组;免疫荧光法检测P-P38,P-JNK的表达。实验2分为6组:正常对照组,LPS组,TLR4抗体+LPS组,SB202190(抑制P38)+LPS组,SP600125(抑制JNK)+LPS组,PD98059(抑制ERK)+LPS组;分别用TLR4抗体、P38、JNK及ERK的抑制剂预处理海马神经元后再给以LPS刺激24 h,Western blot法检测Bcl-2,Bax,Active-caspase-3的表达变化;流式细胞术检测海马神经元凋亡率。结果:LPS组海马神经元P-P38、P-JNK的表达明显高于正常对照组(P<0.01),TLR4抗体+LPS组P-P38,P-JNK表达显著低于LPS组(P<0.01)。与正常对照组相比,LPS组海马神经元Bcl-2/Bax表达减少、Active-caspase-3表达增加,海马神经元凋亡率增加(P<0.01)。而TLR4抗体+LPS组、SB202190+LPS组、SP600125+LPS组Bcl-2/Bax显著高于LPS组、Active caspase-3显著低于LPS组(P<0.01),海马神经元凋亡率显著低于LPS组(P<0.05,P<0.01)。PD98059+LPS组与LPS组海马神经元凋亡率无明显差异。结论:1海马神经元中有TLR4介导的P38/JNK信号通路。2海马神经元TLR4激活后,P-P38、P-JNK表达增加,使Bcl-2/Bax的比例降低和Active-caspase-3表达增加,从而促进海马神经元的凋亡。海马神经元凋亡过程中有TLR4介导的P38/JNK信号通路的参与。

脑血流动力学检测在新生儿缺氧缺血性脑病诊断治疗中的应用研究

目的:探讨脑血流动力学在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的动态变化及其在HIE诊断治疗中的临床意义。方法:采用彩色多普勒超声诊断仪对观察组HIE患儿54例和正常对照组50例于生后不同时段进行脑血流动力学指标的检测。结果:与对照组相比HIE组生后24、48、72h内各组动脉流速均降低,而阻力指数较对照组增高(P<0.05)。对比轻、中、重3组大脑动脉24、48、72、120h的血流动力学指标,发现阻力指数与病情呈正相关。结论:采用彩色多普勒超声检测HIE患儿大脑动脉的血流动力学参数能及时反映窒息新生儿脑血流的变化,有利于早期诊断HIE,及时制定干预措施,减少后遗症的发生。

奥美沙坦酯对大鼠主动脉粥样斑块和血管钙化的干预作用

目的 :探讨奥美沙坦酯对大鼠主动脉粥样硬化的干预作用及可能机制。方法 :雄性12周龄SD大鼠30只随机分为正常组(A组)、动脉粥样硬化模型组(B组)和奥美沙坦酯干预组(C组)。A组予标准饲料;B组予3 d维生素D3(vitamin D3,Vit D3)后予高脂饲料;C组予3 d Vit D3后予高脂饲料和奥美沙坦酯。记录一般情况和每周体质量。0周和10周后分别取血制备血清样本,检测血脂、血钙、血高敏C反应蛋白水平。10周后取主动脉,常规制备石蜡切片,HE染色观察主动脉壁形态学变化,Von Kossa染色观察钙盐沉积,免疫组化染色检测骨保护素的表达。结果:与模型组相比,干预组大鼠主动脉壁粥样斑块和钙盐沉积明显减少,血总胆固醇和低密度脂蛋白水平明显降低,血高敏C反应蛋白水平明显降低,血管壁骨保护素的表达明显减少。结论:血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂奥美沙坦酯可减缓大鼠的动脉粥样硬化过程,改善血管钙化程度,其机制可能与调控骨保护素的表达、抑制炎症反应和降低高脂血症有关。

全反式维甲酸对5/6肾大部切除大鼠肾间质纤维化的影响及其作用机制

目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,atRA)对5/6肾大部切除(5/6 nephrectomy,5/6Nx)大鼠肾小管间质纤维化的作用及其机制。方法成年雄性SD大鼠行5/6Nx后2周分为3组:5/6Nx组(大豆油1 mL·kg^(-1)·d^(-1),n=11)、atRA1组(atRA5 mg·kg~(^(-1))·d^(-1),n=10)、atRA2组(atRA10 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=11),另设Sham组即假手术组(大豆油1 mL·kg^(-1)·d^(-1),n=7)。经灌胃给药,每日1次,连续给药12周。测定24 h尿蛋白量和血肌酐浓度;肾脏病理切片采用VG染色,对肾小管间质纤维化进行评分;用Western blot检测肾皮质中α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和纤溶酶原激活物抑制剂1(plasminogen activator inhibitor^(-1),PAI^(-1))的蛋白表达。结果术后14周,atRA显著降低5/6Nx大鼠的24 h尿蛋白量和血肌酐浓度(P均<0.05)。atRA显著降低该模型的肾小管间质纤维化(P<0.01)。atRA显著下调该模型的肾皮质α-SMA和PAI^(-1)表达(P均<0.05),肾小管间质纤维化评分与α-SMA和PAI^(-1)表达均呈显著正相关(r分别为0.717 6和0.809 8,P均<0.01)。结论 atRA可减少5/6Nx大鼠的尿蛋白水平,抑制肾皮质α-SMA和PAI^(-1)的蛋白表达,从而减轻肾间质纤维化。

大鼠背根神经节神经元原代培养中纯化方法的改良

目的 :改进大鼠背根神经节神经元原代培养中的纯化方法以提高细胞纯度。方法 :常规取材并酶解消化大鼠背根神经节神经元,应用牛血清白蛋白溶液对细胞进行密度梯度离心初步分离细胞,再应用差速贴壁法去除非神经元细胞,最后应用阿糖胞苷进一步纯化细胞。纯化后应用显微镜观察细胞形态,采用β-tubulinⅢ免疫细胞化学染色方法进行纯度鉴定,应用CCK-8检测细胞活力。结果:未改良组获得纯化的背根神经节神经元的培养周期长达10 d,而改良组缩短为5 d。相差显微镜可见改良组神经胶质细胞明显减少。改良组的β-tubulinⅢ免疫细胞化学染色阳性细胞比例显著增加,计数结果显示改良组神经元纯度达到93%,未改良组纯度仅达到68%,差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8检测结果显示改良组的细胞活力高于未改良组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 :纯化方法改良后可以在更短的培养周期内获得纯度更高、细胞活力更好的大鼠原代背根节神经元。

HSPgp96和LPS激活小鼠腹腔巨噬细胞的比较研究

目的:比较HSPgp96与LPS对巨噬细胞免疫功能的激活作用。方法:培养小鼠腹腔巨噬细胞,分组用PBS、HSPgp96和LPS诱导后,在不同时间用酶法测定NO生成量。按效靶比10:1加入H22肝癌细胞,24h后靶细胞进行单细胞凝胶电泳,染色观察。在不同时间用激光扫描共聚焦显微镜观测巨噬细胞MHC-Ⅱ和CD86的表达。结果:LPS和HSPgp96促进巨噬细胞NO生成的作用相当,并随作用时间延长而增加。巨噬细胞攻击后的靶细胞呈现DNA损伤后的彗星现象。LPS和HSPgp96均促进巨噬细胞MHC-Ⅱ和CD86的表达,但HSPgp96诱导组表达更快更强。结论:与LPS相比,HSPgp96活化小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒活性的作用相当,而诱导抗原提呈功能的作用更强。

KCNE1胞外N段功能的研究

目的:研究电压依赖性钾离子通道-IKs通道的调节亚基KCNE1胞外肽段(氨基端肽段,简称N段)的功能,探究胞外N段在KCNE1调控IKs通道中的作用。方法:通过分子生物学技术制备KCNE1的N段缺失突变体;利用Western Blot方法了解突变体的蛋白表达情况;以细胞免疫染色方法观察突变体的亚细胞定位情况;以全细胞膜片钳记录技术检测突变体(与KCNQ1共表达)的通道电流特征。结果:成功构建KCNE1胞外N段缺失的突变体KCNE1-ΔN,突变体体外表达正常;与野生型相比:KCNE1-ΔN在细胞内的分布出现蛋白集聚现象;通道的电流密度减小,激活电压相比较出现了明显的左移,即通道的激活速率变快。结论:KCNE1的N段对其蛋白表达无明显影响,但对蛋白的转运起重要作用;N段参与了KCNE1对通道电流大小的调节,以及对通道激活特征的调控。

大鼠星形胶质细胞Toll样受体表达谱

目的探索Toll样受体4(TLR4)表达定位,揭示星形胶质细胞(AS)参与阿尔茨海默病(AD)炎症机制的可能分子机制。方法取新生1~3 d的SD大鼠皮层进行星形胶质细胞的培养,传代纯化。细胞免疫荧光双标法鉴定传代后的AS及其纯度。实时PCR检测正常AS中TLRs表达谱。细胞免疫荧光双标法鉴定TLR4在AS的表达定位。结果传代培养可以纯化AS;AS表达TLR1~11,但不同的TLRs表达量不同,其中TLR4表达水平相对较高,并且TLR4表达定位于胞膜和胞质。结论 AS参与AD炎症机制的可能分子机制。

Toll样受体4促进人非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭（英文）

目的:研究Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在人非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)细胞中的表达及对细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:采用RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学法检测NSCLC组织中TLR4的mRNA和蛋白表达。利用TLR4刺激剂脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和抑制剂TAK-242处理A549细胞和SPC-A-1细胞,应用RT-qPCR、Western blot法和流式细胞术检测TLR4的表达,Transwell法检测细胞的侵袭和迁移能力,RT-qPCR法检测基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的mRNA表达。结果:NSCLC组织中TLR4的mRNA和蛋白均高于癌旁组织(P <0. 01)。LPS刺激显著提高A549细胞和SPC-A-1细胞的TLR4 mRNA和蛋白表达(P <0. 01)及细胞膜的TLR4蛋白表达(P <0. 01)。LPS诱导的TLR4活化增强细胞的侵袭和迁移能力,增加细胞中MMP-2、MMP-9和VEGF的表达(P <0. 01)。TAK-242阻断TLR4、MMP-2、MMP-9和VEGF的表达及细胞的迁移和侵袭能力(P <0. 01)。结论:TLR4可能参与NSCLC的迁移和侵袭,抑制TLR4可作为NSCLC的治疗靶点。