视网膜Müller细胞重编程研究进展

视网膜退行性疾病导致的失明严重影响人类健康。哺乳动物视网膜损伤后无法自我修复,而斑马鱼的视网膜具有较强的再生能力,能再生所有类型的视网膜神经元并恢复视觉。斑马鱼的视网膜再生依赖于一种神经胶质细胞——Müller细胞。斑马鱼视网膜损伤后Müller细胞重编程并增殖产生祖细胞,后者进一步分化为新生的视网膜神经元。近年来,基于Müller细胞的视网膜再生研究取得了许多重要进展。我们就斑马鱼视网膜再生的机制和哺乳动物Müller细胞重编程的研究进展做一综述。

用于周围神经再生的纤维基导电型复合支架制备及性能研究

目的探讨一种"壳-芯"结构的聚吡咯/丝素蛋白(polypyrrole/silk fibroin,PPy/SF)纤维基导电型复合支架的制备方法、理化性能与生物相容性,为其用于组织工程神经研究奠定基础。方法采用3D打印结合原位聚合反应制备"壳-芯"结构导电纤维,联合静电纺形成PPy/SF纤维基导电型复合支架;另制备无SF内芯的PPy导电纤维及SF静电纺纤维。分别对各材料进行稳定性、生物力学、导电性、降解性能、生物活性检测,观察纤维基导电型复合支架的综合性能。结果与单纯无内芯的PPy导电纤维及SF静电纺纤维比较,"壳-芯"结构的纤维基导电型复合支架可以更好地保持稳定性能,增强复合支架的力学拉伸性,电导性维持长久,提升抗降解性能;同时PPy/SF纤维基导电型复合支架适合NIH3T3细胞附着,有利于细胞增殖,生物活性良好。结论PPy/SF纤维基导电型复合支架满足人工神经移植物在导电性、稳定性、生物活性等方面的要求,为研制高性能、多功能的复合材料提供了新思路。

SMA模型小鼠骨髓间充质干细胞体外培养体系的建立

目的建立脊髓型肌萎缩症(SMA)小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)体外培养体系,研究反义寡核苷酸(ASO)对其生物学特性的影响,为深入研究SMA发病机制及药物筛选提供可靠的体内模拟工具细胞。方法选取刚出生4 d的SMA小鼠,CO_(2)窒息法处死后,于75%乙醇中浸泡,分离、纯化骨髓细胞。细胞荧光检测细胞表面标志物;RT-PCR及Western Blot研究ASO对运动神经元存活基因2(SMN2)外显子(exon7)列入水平以及运动神经元存活(SMN)蛋白表达量;EDU法和TUNEL法检测细胞增殖和凋亡能力。结果体外分离培养的SMA模型小鼠BMMSC具有贴壁生长、可以传代等特点;对P3代BMMSC进行细胞免疫荧光鉴定结果显示:CD44、CD29高表达,CD34、CD45低表达;转染ASO后细胞SMN2 exon7列入率显著上升以及SMN蛋白表达量显著上调,并显著促进细胞增殖能力,同时核内Gemini bodies(gems)数量也有所增多。结论成功建立SMA小鼠BMMSC体外培养体系,通过阳性药物ASO验证可促进BMMSC SMN2 exon7列入及SMN蛋白表达,为SMN2相关调控机制及药物筛选提供一种新的工具细胞。

翻转课堂在研究生分子生物学技术课程中的设计与实践

分子生物学技术是生物医药相关专业研究生培养中的重要基础实验课程。结合近年来本课程团队的教学经验,探讨将传统的分子生物学实验课程重新设计,改革为研究生主导的研究性实验课程翻转课堂。即,依据研究生科研工作方式,促其在课前研读实验原理、试剂说明、选取和设置对照,利用在线平台充分开展讨论;在课堂上各实验小组进行操作、分析讨论实验结果,教师引导研究生的技术操作以达成实验教学目标、注重考查学生实验设计和结果分析能力;在课程结束后保留在线平台,实现长期学术交流。