LINC00319调控PENK调节PI3K/AKT信号通路在骨肉瘤中的机制研究

目的探讨LINC00319调控前脑啡肽(proenkephalin,PENK)调节PI3K/AKT信号通路在骨肉瘤(osteosarcoma,OS)中的机制。方法提取OS患者及非OS患者外周血RNA,qPCR法检测LINC00319及PENK表达水平,分析LINC00319与PENK相关性。在MG63细胞中敲低或过表达LINC00319,qPCR及蛋白质印迹法分别检测PENK的mRNA及蛋白表达。OS小鼠移植瘤模型分为shNC组及shLINC00319组,称量肿瘤重量,免疫组化实验检测肿瘤组织中PENK、AKT、p-AKT、PI3K的表达。MG63细胞分为shNC组、shLINC00319组、shLINC00319+shPENK组,EdU法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测AKT、p-AKT、PI3K蛋白表达水平。结果相较非OS患者,LINC00319在OS患者外周血高表达,PENK在OS患者外周血低表达,PENK与LINC00319表达呈负相关。敲低LINC00319后,PENK mRNA及蛋白水平上调,过表达LINC00319后,PENK mRNA及蛋白水平下调。相较于shNC组,shLINC00319组小鼠肿瘤重量降低,肿瘤组织中AKT蛋白表达水平不变,p-AKT蛋白表达水平降低,PI3K蛋白表达水平降低。相较于shNC组MG63细胞,shLINC00319组细胞增殖与侵袭能力降低,p-AKT、PI3K蛋白表达水平下降;相较于shLINC00319组细胞,shLINC00319+shPENK组细胞的增殖与侵袭能力以及p-AKT、PI3K蛋白的表达水平均有所升高。结论LINC00319在OS患者外周血高表达,PENK在OS患者外周血低表达,两者表达呈负相关性。LINC00319的高表达通过抑制PENK水平,进而激活PI3K/AKT信号通路促进OS细胞增殖及细胞侵袭。