南通地区2014年急性下呼吸道感染儿童常见病毒病原学分析

目的：了解2014年南通地区急性下呼吸道感染（ALRI）住院患儿常见病毒病原学特征,为临床合理用药提供依据。方法：收集752例患儿鼻咽部拭子标本,采用直接免疫荧光法检测流感病毒A（IVA）、流感病毒B（IVB）、副流感病毒Ⅰ（PIVⅠ）、副流感病毒Ⅱ（PIVⅡ）、副流感病毒Ⅲ（PIVⅢ）、呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）7种常见呼吸道病毒感染情况,并结合临床资料进行分析。结果：752例鼻咽分泌物标本中,7种呼吸道病毒抗原阳性的标本有317例,总检出率为42.1%,其中RSV检出率最高,构成比为58.7%,其次为PIVⅢ（18.9%）。不同年龄呼吸道病毒检出率不同,0∽6月、6月∽1岁患儿检出率较高,分别为53.33%和51.09%。不同月份呼吸道病毒检出率不同,2014年1月、3月、12月份检出率最高,分别为53.63%、58.75%、53.54%,6月份病毒检出率最低为32.39%,其余月份病毒的检出率接近。不同疾病呼吸道病毒检出率不同,毛细支气管炎病毒检出率最高62.50%,其次分别为喘息型支气管炎49.54%、支气管哮喘合并感染45.95%、肺炎36.12%,支气管炎无喘息的病毒检出率最低31.21%。各组疾病检出的最主要病毒均为RSV。结论：2014年南通地区儿童急性下呼吸道感染主要病毒病原体为RSV,0∽1岁婴幼儿是其主要感染人群,并因季节和疾病不同而不同。

涎腺腺样囊性癌中ADAM-17的表达及临床意义

目的探讨ADAM-17在涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)中的表达及临床意义。方法收集48例SACC石蜡组织和20例新鲜组织,分别采用免疫组化EnVision两步法和RT-PCR法检测SACC组织中ADAM-17蛋白和mRNA表达水平,并分析其与临床病理学参数之间的相关性。结果 ADAM-17蛋白在48例SACC组织中阳性率为72.9%(35/48),ADAM-17mRNA水平在20例SACC中平均相对表达量为(0.40±0.18),两者的表达均高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.001),两者的表达与肿瘤的大小、TNM分期和患者的生存时间均有相关性。结论 ADAM-17在SACC中高表达,可能介导癌组织生长、侵袭和转移,其有望成为一个新的治疗靶点。

HIF-1α、MMP-2在卵巢癌中的表达及其与血管生成拟态的关系

目的：探讨卵巢癌缺氧诱导因子HIF-1α、基质金属蛋白酶MMP-2的表达及其与血管生成拟态（VM）的关系。方法：收集本院2000年1月~2009年5月经手术切除的卵巢肿瘤组织石蜡标本81例,免疫组化检测HIF-1α、MMP-2蛋白表达,采用CD34和PAS双重染色的方法检测卵巢癌组织中存在的VM,讨论HIF-1α、MMP-2表达与VM的关系。结果：卵巢癌HIF-1α表达与临床分期（r=0.392,P=0.020）、分级（r=0.358,P=0.035）呈正相关,MMP-2表达与分级（r=0.409,P=0.015）呈正相关。卵巢癌不同分级组的VM形成率有显著差异（P=0.018）,低分化的卵巢癌VM阳性率高于高分化组。VM阳性组和阴性组的HIF-1α表达有统计学差异（P=0.003）,VM阳性组和阴性组的MMP-2表达有统计学差异（P=0.004）。结论：低分化卵巢癌组织更易形成VM,HIF-1α、MMP-2表达与卵巢癌分级及VM密切相关。

超声引导下射频消融治疗原发性肝癌46例

目的:比较分析经皮射频消融术治疗原发性肝癌的疗效.方法:本院2003-03/2008-07收治肝癌患者46例,共69个结节,均经临床证实.患者予经皮射频消融治疗并跟踪随访.患者生存率以Kaplan-Meier模型及Log-rank检验进行单因素分析,完全消融率和局部复发率的比较采用卡方检验.结果:射频术后,直径<3cm的肿瘤完全消融率93.61%,局部复发率6.82%,1、2、3年的生存率为87.10%、80.13%和61.92%;直径≥3cm的肿瘤完全消融率68.18%,局部复发率27.27%,1、2、3年的生存率为73.33%、53.33%和30.48%.单个病灶的完全消融率90.00%,局部复发率10.00%,1、2、3年的生存率为90.00%、82.80%和63.98%;多发病灶者,完全消融率82.05%,局部复发率15.38%,1、2、3年的生存率为68.75%、50.00%和28.57%.Child-pugh A级组完全消融率87.93%,局部复发率13.21%,1、2、3年的生存率为86.40%、75.25%和54.99%;B-C级组完全消融率81.82%,局部复发率22.22%,1、2和3年的生存率为66.67%、53.33%和35.56%.结论:射频消融治疗肝癌的完全消融率和局部复发率与肿瘤的大小相关;长期生存率和肿瘤的数目、大小、肝功能分级相关.

射频消融治疗对兔肝VX2肿瘤VEGF表达的影响

目的:探讨射频消融(RFA)对兔肝VX2肿瘤血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响.方法:建立日本大耳白兔肝VX2肿瘤模型,随机分为3组:对照组直接处死取肝脏标本;RFA治疗(4h和24h)组于射频消融后4h和24h处死取出肝脏组织.并以正常兔肝脏组织为正常对照,通过免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测VEGF的蛋白和基因表达.结果:VX2肿瘤浸润性生长,射频后中央消融区呈现大片坏死,周围见炎性反应带,外围癌组织残留.免疫组化和RT-PCR示对照组肿瘤组织VEGF的蛋白和基因表达均高于正常组(VEGF/GAPDH基因灰度比:1.3048±0.1936vs0.8993±0.1107,P<0.05),射频消融后4h和24h表达明显下降(VEGF/GAPDH基因灰度比:0.7388±0.1503,0.8935±0.1936,均P<0.05),但不同时间段并无明显差异.结论:RFA治疗能下调肿瘤VEGF基因和蛋白水平的表达,抑制血管生成,减少血供,进而降低了复发和转移几率.

超敏肌钙蛋白Ⅰ在心肌炎诊断中的临床意义

目的旨在通过超敏肌钙蛋白Ⅰ(TropI)和传统肌钙蛋白I(cTnI)检测方法的比较,探讨其在心肌炎诊断中的临床意义。方法收集2009～2010年30例门诊和住院患者血液标本,检测血清肌钙蛋白值,比较两种方法的精密性、相关性、阳性率以及离散率。结果 TropI的变异系数(CV)(6.948%)明显低于cTnI(18.190%),两种方法检测肌钙蛋白的均值与相应的质控靶值比较差异无统计学意义(P>0.05)。对这两种方法检测的结果进行回归分析显示相关性良好(r2=0.981 2);两种方法检测患者血清cTnI组平均CV值(7.655%)高于TropI组平均CV值(2.116%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论两种方法在检测血清肌钙蛋白的作用上基本一致,但是Tropi在重复性方面优于传统的cTnI检测,可能更有利于心肌炎的诊断。

射频消融治疗对肝VX2瘤及转移肿瘤血管生成的影响

目的:探讨射频消融(RFA)对兔肝VX2肿瘤及转移结节中肿瘤血管生成的影响。方法:建立兔VX2移植瘤模型,模型组直接处死,实验组于射频后4、24h处死取出肝、肺肿瘤组织。免疫组化法检测VEGF的蛋白表达和MVD,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测VEGF的基因表达。结果:VX2肿瘤呈浸润生长,射频后,中央消融区细胞呈现大片坏死,周边为炎性反应带,外围癌组织残留。免疫组化结果示模型组VEGF蛋白表达及MVD均高于正常组,射频处理后肝脏残癌组织中VEGF蛋白及MVD下降,而肺组织内无明显变化;RT-PCR结果示模型组肺转移结节的VEGF/GAPDH基因表达比为1.117±0.125 4,射频消融后4h和24h,基因表达比分别为1.046 5±0.136 6,1.057 4±0.145 2,与模型组比较无明显差异,P>0.05。结论:RFA能破坏局部的肿瘤微血管,下调VEGF表达,抑制肿瘤血管生成;对于远处肿瘤血管生成,RFA治疗并无明显影响。

白内障手术摘出前囊下晶状体上皮细胞中β_1整联蛋白、Fas蛋白的表达

目的了解糖尿病性白内障及并发性(高度近视)白内障晶状体上皮细胞(LECs)中β1整联蛋白与Fas蛋白的表达情况,以探讨其与LECs凋亡的关系。方法应用免疫组化、流式细胞仪和共聚焦显微镜对52例白内障手术患者术中取出的前囊下LECs分别定性、定量及定位检测β1整联蛋白和Fas蛋白的表达。结果糖尿病性及并发性(高度近视)白内障患者免疫组化结果表明在其LECs中均有β1整联蛋白、Fas蛋白表达;流式细胞定量检测其LECs中β1整联蛋白的表达量分别为68.41±16.98%、39.22±21.18%,Fas蛋白的表达量分别为63.46±13.30%、31.46±17.25%。LECs中β1整联蛋白、Fas蛋白的表达在两种白内障间存在统计学差异(P<0.05)。β1整联蛋白与Fas蛋白在LECs中的表达具有正相关性。共聚焦显微镜观察发现β1整联蛋白与Fas蛋白大部分共同定位于LECs的细胞膜上。结论Fas蛋白介导的LECs的凋亡在糖尿病性白内障的形成中起重要的作用,而在并发性(高度近视)白内障LECs凋亡中可能存在其他通路。β1整联蛋白的作用很可能是一种促进LECs凋亡的蛋白,它与Fas蛋白一起促进LECs凋亡。

游离DNA对卵巢癌辅助诊断价值的研究

目的用分支DNA（b DNA）技术定量检测卵巢癌患者血清游离DNA（cf-DNA）含量,探讨其与临床病理参数的关系及对卵巢癌辅助诊断的价值。方法收集67例卵巢癌患者、22例卵巢良性肿瘤患者和29例健康妇女静脉血标本。用b DNA技术检测各组血清cf-DNA浓度,化学发光法检测血清CA125和HE-4含量;用Krudkal-Wallis H检验比较各组间总体差异,MannWhitney U检验进行两两比较;绘制ROC曲线评价上述三项指标的诊断效能。结果卵巢癌组、卵巢良性肿瘤组和健康对照组血清cf-DNA含量分别为：865.41（497.62-1 311.56）、221.08（90.93-356.07）和199.94（78.73-396.21）μg/L,卵巢癌组显著高于良性肿瘤组和健康对照组（P均〈0.01）;按FIGO分期为Ⅲ期和Ⅳ期的卵巢癌患者显著高于Ⅰ-Ⅱ期组（P均〈0.01）,Ⅲ期和Ⅳ期组间差异也有统计学意义（P〈0.05）。卵巢癌组血清cf-DNA的ROC曲线下面积、诊断敏感性和特异性分别为：0.886、83.9%、84.2%,均高于CA125（0.774、74.2%、63.2%）和HE-4（0.706、74.2%、78.9%）,cf-DNA、CA125和HE-4联合检测的敏感性和特异性可提高到92.54%（62/67）、88.24%（45/54）。结论 b DNA技术检测血清cf-DNA对卵巢癌诊断的敏感性和特异性高于CA125和HE-4,可作为卵巢癌辅助诊断的一个重要分子生物学指标。

超声引导下射频消融治疗肝癌对免疫功能的影响

目的:探讨超声引导下射频消融治疗肝癌对患者血清免疫功能的影响。方法:超声引导下射频消融治疗肝癌患者46例,以ELISA法测定患者术前术后外周血IL-2,sIL-2R水平,并行统计学分析。结果:射频消融术前,患者血清IL-2,sIL-2R水平分别为(136.91±55.11)pg/ml、(273.18±89.45)pmol/l,术后1月(186.62±64.88)pg/ml、(171.73±38.49)pmol/L,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:超声引导下射频治疗肝癌可以有效改善患者免疫功能。

卵巢癌血管生成拟态形态学观察和基质金属蛋白酶表达

目的:在卵巢癌腹腔移植瘤模型中进行卵巢癌血管生成拟态的形态学观察并检测基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达情况。方法:卵巢癌细胞SKOV3接种裸鼠腹腔,建立卵巢癌腹腔移植瘤模型,在同一张切片上以抗鼠CD34标记鼠血管内皮细胞,PAS染色行基底膜样结构标记。并应用免疫组化和RT-PCR方法比较MMP2在卵巢癌腹腔移植瘤中央和边缘区域组织的表达差异。结果:卵巢癌腹腔移植瘤中央区域可见卵巢癌细胞围成管状结构,中间可见红细胞,未见CD34阳性细胞出现,PAS阳性物质呈颗粒状弥散分布在卵巢癌细胞浆内,有的贴附在管腔内侧。免疫组化提示MMP2蛋白阳性表达率在肿瘤中央区域组织比肿瘤边缘区域明显增高,RT-PCR分析显示肿瘤组织中央区域MMP2表达与边缘区域相比有显著性差异。结论:卵巢癌细胞分泌PAS阳性物质,可能参与构建肿瘤的血管基质重塑。卵巢癌中央区域可见血管生成拟态,肿瘤中央区域MMP2表达高于肿瘤边缘区域,MMP2表达是否与卵巢癌血管生成拟态形成有关,仍需今后进一步研究。

TVCDI与血β-hCG对输卵管妊娠超声介入治疗术后的随访价值

目的探讨经阴道彩色多普勒超声显像(TVCDI)与血促绒毛膜性腺激素(β-hCG)对输卵管妊娠(FTP)超声介入治疗术后的随访价值。方法对96例FTP超声介入治疗前后的患者应用TVCDI检测孕囊大小、滋养层周围血流丰富程度、患侧输卵管动脉血流参数阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、收缩期最大流速(PSV)、平均流速(TAMAX)及血β-hCG水平,并进行统计学处理。结果施行大剂量(MTX50mg)介入治疗的治愈率为100%(84/84),小剂量(MTX20mg)介入治疗的治愈率为75%(9/12)。治愈的93例FTP超声介入治疗后,RI、PI值明显高于介入治疗前,而PSV、EDV、TAMAX明显低于介入治疗前(P<0.01)。介入治疗前后的血β-hCG水平比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论TVCDI检测FTP超声介入治疗前后的输卵管动脉血流参数和血β-hCG水平变化对判断疗效提供了可靠的依据。

血清血小板内皮细胞黏附分子-1水平变化对糖尿病视网膜病变的影响

背景研究糖尿病视网膜病变（DR）发生发展的相关危险因素对DR的预防有重要意义，血小板内皮细胞黏附分子-1（PECAM-1）是介导糖尿病患者血管病变发生的重要介质，但其作用机制仍有待进一步研究。目的探讨2型糖尿病患者血清中PECAM-1水平变化对DR发生及发展的影响。方法收集在南通市第三人民医院内分泌科确诊的2型糖尿病患者共54例，根据检眼镜检查和荧光素眼底血管造影（FFA）结果，依据1987年中华医学会DR分期标准将患者分为无DR（NDR）组18例、非增生型糖尿病视网膜病变（NPDR）组20例和增生型糖尿病视网膜病变（PDR）组16例，并收集年龄和性别与患者相匹配的18名健康体检者作为正常对照组。收集患者外周血，用ELISA法检测患者血清中PECAM一1的质量浓度；用高效液相色谱法检测患者血清中糖化血红蛋白（HbAlC）含量；采用全自动生化分析仪检测患者的血糖水平；探讨DR患者PECAM—l质量浓度与HbAlC含量的关系，并将各组患者的检测结果进行比较。结果PDR组、NPDR组、NDR组和正常对照组患者血清中PECAM-1质量浓度分别为（10．907-4-2．792）、（7．024±2．377）、（5．231±1．816）和（3．817±1．045）μg／L，总体差异有统计学意义（F=12．630，P=0．002），PDR组患者血清PECAM—l质量浓度明显高于NPDR组、NDR组和正常对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。PDR组、NPDR组、NDR组和正常对照组患者血清HbAlC水平分别为（12．596±3．148）％、（9．118±3．356）％、（5．491±1．017）％和（4．992＋-0．725）％，总体比较差异有统计学意义（F=7．130，P=0．015），PDR组、NPDR组患者血清HbAlc水平显著高于NDR组和正常对照组，PDR组PECAM一1和HbAlc水平明显高于NPDR组和正常对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。PDR组、NPDR组、NDR组患者血清PECAM-1质量浓度与血清HbAlc水平间均呈显著正相关（r=0．799，P〈0．01；r=0．647，P〈0．01；r=0．685，P〈0．01）。病程≥10年的PDR组与NPDR组糖尿病病程比较差异有统计学意义（P=0．023）。结论PECAM一1高表达是促进DR发生和发展的重要因素，与患者的高血糖状态密切相关，预防DR应以治疗糖尿病、控制血糖为主。

冷循环射频消融离体子宫肌瘤的病理结果与其类型的关系

目的:探讨冷循环射频消融治疗子宫肌瘤的疗效与肌瘤类型的关系,明确射频消融是治疗子宫肌瘤的安全有效的新方法。方法:对36例单发或多发的离体子宫肌瘤施行射频消融固化治疗,根据瘤体的大小对射频的时间、次数、表面温度进行调控、监测及HE染色镜下观察病理变化。结果:本组19例浆膜下肌瘤和5例阔韧带肌瘤消融后瘤体均有不同程度的肿胀,表面呈脱水征象。其中8例浆膜下肌瘤直径2cm左右,针尖距瘤体表面≤1cm,浆膜面呈棕褐色或黑色,表面温度可高达80￣90℃,并可见热气蒸发。>2cm的浆膜下肌瘤和12例肌壁间肌瘤则无类似变化。结论:对较大的浆膜下肌瘤和肌壁间肌瘤进行多点、多面的射频治疗,对较小的浆膜下、深肌层或阔韧带肌瘤要严格控制时间和射频次数。

糖尿病肾病检验中尿蛋白和尿微量蛋白的应用意义评估

目的探讨糖尿病肾病检验中尿蛋白和尿微量蛋白的应用意义及为临床检验工作提供参考经验。方法选择该院2018年6月-2019年6月收治的50例糖尿病肾病患者作为该次研究入组对象,同时随机纳入体检的健康志愿者作为对照,比较分析研究组和对照组尿蛋白、尿微量白蛋白含量情况以及阳性率情况。另外,还将比较观察组不同病程糖尿病肾病患者尿微量白蛋白含量以及阳性率差异。结果研究组糖尿病肾病患者尿蛋白、尿微量白蛋白平均含量以及阳性率均明显高于对照组(P<0.05)。研究组糖尿病肾病患者,病程越长尿微量白蛋白含量越高、阳性率越高(P<0.05)。结论糖尿病肾病患者行尿微量白蛋白、尿蛋白检验,可为临床辅助诊断及治疗提供参考价值。

不同储存条件下二磷酸腺苷对血小板聚集率的影响

目的 :比较不同储存条件下二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)对血小板聚集率的影响。方法 :随机采集50例健康志愿者外周血,将每例志愿者的富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)分为4组,采用PRP透射比浊法,分别加入高浓度于-20℃保存0、6、12、18个月的ADP,观察血小板聚集率的变化;另再随机收集50例健康志愿者外周血,将每例志愿者的PRP分为四组,分别加入低浓度于4℃保存0、1、15、30 d的ADP,观察血小板聚集率的变化。结果:高浓度于-20℃保存0、6、12、18个月的ADP诱导的血小板聚集率之间差异无统计学意义(P>0.05);低浓度于4℃保存0、1、15、30 d的ADP诱导的血小板聚集率之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ADP可高浓度保存于-20℃18个月,低浓度保存于4℃30 d,而不影响血小板聚集率。

β_1整联蛋白、Fas蛋白在晶状体上皮细胞中的表达与白内障的关系

目的:了解糖尿病性白内障及并发性(高度近视)白内障患者晶状体上皮细胞(LECs)中1β整联蛋白与Fas蛋白的表达情况与LECs凋亡的关系。方法:应用流式细胞和共聚焦显微镜分别定量及定位检测1β整联蛋白、Fas蛋白两种蛋白在LECs中的表达。结果:LECs中1β整联蛋白Fas蛋白的表达在两种白内障间差异有统计学意义(P<0.05)。发现1β整联蛋白与Fas蛋白大部分共同定位于LECs的细胞膜上。结论:在糖尿病性白内障的形成中1β整联蛋白的作用很可能是一种促进LECs凋亡的蛋白,它与Fas蛋白一起促进LECs凋亡。

维生素K_2诱导白血病细胞凋亡的体外研究

目的:研究维生素K2(VK2)对白血病细胞生长及凋亡的诱导作用。方法:通过四唑盐比色法、镜下观察凋亡细胞形态及流式细胞仪检测细胞早期凋亡率研究维生素K2对急性早幼粒细胞白血病细胞株(NB4)及白血病患者骨髓单个核细胞(BMNC)的影响。结果:NB4细胞经VK2作用后增殖受到抑制。VK2作用NB4细胞72h后,部分细胞呈现凋亡细胞的特征。5、10、50μmol/L VK2作用NB4细胞72h后细胞早期凋亡率分别为8.06%、20.02%、29.60%,与对照组比较及两两比较差异均有极显著性(P<0.01)。10μmol/L VK2作用白血病细胞及正常对照BMNC48h后,正常人及淋系白血病患者BMNC细胞早期凋亡率较空白对照组无明显增高(P>0.05),慢性髓系白血病患者BMNC早期凋亡率较空白对照组增高(P<0.05),急性髓系白血病患者BMNC早期凋亡率较空白对照组明显增高(P<0.01)。结论:VK2对白血病有生长抑制作用,可选择性诱导髓系白血病细胞凋亡,且呈剂量依赖性。

MIF在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的表达及定位研究

目的:研究巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)在新生SD大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大脑皮层中的表达变化及与小胶质细胞的定位关系。方法:建立HIBD模型,采用Western Blot检测缺氧缺血再灌注0h、24h、48h、72h大脑皮层中MIF的表达变化,采用免疫荧光组织染色检测缺氧缺血再灌注48h大脑皮层中MIF表达及与小胶质细胞的定位。结果:在HIBD模型中,MIF表达明显升高,在缺氧缺血再灌注48h时表达丰度最高且与小胶质细胞存在共定位关系。结论:HIBD可诱导大脑皮层中小胶质细胞MIF的表达,MIF的上调可能参与了新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的致病过程。