左卡尼汀治疗新生儿窒息后血浆肌钙蛋白I异常的效果

目的探讨左卡尼汀对新生儿窒息后受损害心肌的保护作用。方法窒息致心肌损害新生儿44例分为治疗组21例和对照组23例,2组患儿均予常规治疗,治疗组加用左卡尼汀针0.1 g/(kg·d)静脉滴注,每日1次,治疗7 d。观察治疗前以及治疗过程中患儿症状体征的变化。治疗前和治疗7 d后,试剂盒检测患儿静脉血血浆游离左卡尼汀和血浆肌钙蛋白I(c Tn I)水平。结果治疗组临床有效率明显高于对照组(90.48%vs 60.87%,P<0.05)。治疗后,治疗组游离左卡尼汀水平高于对照组[(27.00±5.69)μmol/L vs(13.20±3.04)μmol/L,P<0.05]。治疗组治疗后血浆游离左卡尼汀高于治疗前[(14.87±3.95)μmol/L,P<0.05]。治疗后,治疗组血浆c Tn I低于对照组[(0.025±0.006)μg/L vs(0.046±0.010)μg/L,P<0.05]。治疗组c Tn I下降值与游离左卡尼汀增加值之间有明显相关性(r=0.899,P<0.05)。结论左卡尼汀能有效降低有心肌损害的窒息新生儿异常血浆c Tn I水平,起到保护心肌的作用。

熊去氧胆酸对结肠癌细胞株Caco-2增殖及凋亡的影响

目的通过观察熊去氧胆酸(UDCA)对结肠癌细胞株Caco-2增殖和凋亡的影响,以探讨其对结直肠癌化学预防的机制。方法体外培养人结肠癌细胞株Caco-2,用不同浓度UDCA进行UDCA干预,检测其对细胞增殖、凋亡的作用。结果随着UDCA浓度增高和作用时间延长,细胞增殖抑制率升高,凋亡比率增大。结论UDCA能抑制人结肠癌细胞株Caco-2增殖,促进其凋亡。

稳定干扰鸟苷酸环化酶C基因表达的人胃腺癌细胞株的筛选和建立

背景:正常胃黏膜组织不表达肠上皮细胞特异性受体鸟苷酸环化酶C(GC-C),但肠化生、异型增生和胃腺癌组织存在GC-C异位表达。目的:筛选并建立GC-C特异性短发夹RNA(shRNA)稳定转染的胃腺癌细胞株。方法:构建靶向GC-C基因的shRNA表达载体,以脂质体法转染胃腺癌细胞株SGC-7901,实时荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测GC-C mRNA和蛋白表达。G418筛选阳性克隆并建立GC-C shRNA稳定转染的SGC-7901细胞株,并行RT-PCR鉴定。结果:GC-C shRNA可抑制SGC-7901细胞株的GC-C基因表达,以GC-C sh3的抑制效果最佳,转染48 h后的GC-CmRNA和蛋白沉默率分别为77.0%和62.2%。有效筛选并建立了GC-C shRNA稳定转染的SGC-7901细胞株,GC-CmRNA沉默率为65.3%。结论:成功建立了GC-C shRNA稳定转染的SGC-7901细胞株,为下一步研究奠定了基础。

人胃癌细胞株CDX2基因表达与其启动子区甲基化的关系

目的:探讨人胃癌细胞株CDX2基因表达与其启动子区甲基化的关系。方法:不同浓度5-aza-CdR处理MKN45细胞株,甲基化特异性PCR(MSP)检测用药前后CDX2启动子甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR和WesternBlot分别检测CDX2和DNMT1 mRNA和蛋白表达。结果:MKN45细胞株CDX2基因启动子区域高甲基化,CDX2 mRNA表达极低,蛋白不表达;经3种浓度5-aza-CdR处理MKN45细胞72 h后,细胞中CDX2 mRNA和蛋白表达均出现上调,而DNMT1表达出现下调。结论:CDX2基因表达下调与其启动子CpG岛高甲基化有关,DNMT1可能参与该过程的调节。

5-氮杂-2′-脱氧胞苷诱导CDX2基因表达对人胃癌细胞株MKN45增殖和凋亡的影响

背景:DNA甲基化导致基因表达沉默是胃癌发生的重要步骤。近年发现肠表型调节因子CDX2在胃癌中具有抑癌基因的作用。目的:探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-CdR)对人胃癌细胞株MKN45中CDX2基因表达的影响及其对细胞增殖和凋亡的作用。方法:以不同浓度5-aza-CdR(2.5、5、10 Iμmol/L)处理胃癌细胞株MKN45,甲基化特异性PCR(MSP)检测CDX2启动子区甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测CDX2 mRNA和蛋白表达:CCK8法检测MKN45细胞增殖活性,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡和Hoechst 33258染色观察其凋亡形态:比色法检测caspase-3活性。结果:MKN45细胞中CDX2基因启动子区高甲基化,CDX2 mRNA表达极低且蛋白不表达:经3种浓度5-aza-CdR处理72 h后,MKN45细胞CDX2基因启动子区高甲基化发生逆转,CDX2 mRNA和蛋白表达均上调。与对照组相比,5-aza-CdR呈剂量依赖性地抑制MKN45细胞增殖和促进凋亡(P<0.05);Hoechst 33258染色示细胞核致密浓染、细胞核碎裂;caspase-3活性随着5-aza-CdR浓度的增加而升高(P<0.05)。结论:MKN45细胞中CDX2基因表达缺失可能与其启动子区CpG岛高甲基化有关;5-aza-CdR能有效逆转CDX2基因的异常甲基化,诱导其再表达.并抑制MKN45细胞增殖和促进凋亡,该作用可能与caspase-3活性有关。