鹰嘴豆芽素A对LPS诱导的肺泡上皮细胞氧化应激损伤的影响

目的 探讨鹰嘴豆芽素A(BCA)调节核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞氧化应激损伤的影响。方法 将肺泡上皮细胞BEAS-2B分为ctrl组(正常培养的BEAS-2B细胞)、LPS组(10μg/mL浓度的LPS)、BCA低剂量组(5μmol/L BCA)、BCA中剂量组(10μmol/L BCA)、BCA高剂量组(20μmol/L BCA)、抑制剂组(20μmol/L BCA+5μmol/L Nrf2抑制剂ML385),除ctrl组外,其余组均给予10μg/mL LPS刺激24 h。采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平,分光光度法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平,试剂盒检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6水平,免疫印迹法(Western blotting)检测细胞Nrf2、HO-1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、激活型半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)/半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达。结果 与ctrl组比较,LPS组BEAS-2B细胞的吸光度(A_(450))、SOD活性、Nrf2、HO-1、PCNA表达明显降低(P<0.05),细胞凋亡率、ROS和MDA水平、TNF-α、IL-6、Bax、cleaved caspase-3/caspase-3表达明显上升(P<0.05);与LPS组比较,BCA低、中、高剂量组BEAS-2B细胞的A_(450)、SOD活性、Nrf2、HO-1、PCNA表达显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、ROS和MDA水平、TNF-α、IL-6、Bax、cleaved caspase-3/caspase-3表达明显降低(P<0.05);BCA高剂量处理细胞并加入Nrf2抑制剂ML385后,BCA对BEAS-2B细胞增殖的促进作用减弱,细胞凋亡率、炎症反应和氧化应激损伤增强。结论 BCA可通过激活Nrf2/HO-1信号通路抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞氧化应激损伤。