FAM83A对胰腺癌细胞PANC-1干细胞样表型和放射敏感性的影响

目的 探讨FAM83A对胰腺癌细胞PANC-1干细胞样表型和放射敏感性的影响，旨在为胰腺癌靶向治疗提供新思路。方法 慢病毒感染构建稳定沉默FAM83A的PANC-1细胞株，qPCR和Western blot进行验证；流式细胞仪检测干细胞标记物CD133阳性的细胞数；肿瘤细胞成球实验检测PANC-1细胞成球能力；MTT检测吉西他滨对PANC-1稳转株细胞活力的影响；平板克隆形成实验检测X射线照射对PANC-1稳转株细胞增殖的影响；流式细胞术检测吉西他滨和X射线照射对PANC-1稳转株细胞凋亡的影响；Western blot检测PANC-1稳转株细胞中Wnt/β-catenin信号通路表达变化。结果 沉默FAM83A后PANC-1细胞中FAM83A蛋白表达（0.83±0.08）和mRNA表达（0.29±0.03）较阴性对照组FAM83A蛋白表达（1.95±0.19）和mRNA表达（0.98±0.09）显著降低（t=9.410、12.600，P〈0.05）；沉默FAM83A后CD133阳性PANC-1细胞率（8.97±0.62）%较阴性对照组（21.60±2.60）%显著降低（t=8.184，P〈0.05），且细胞成球数（8±1）较阴性对照组（25±3）亦显著降低（t=9.311，P〈0.05），PANC-1细胞干细胞样表型显著被抑制；沉默FAM83A联合50 μmol/L吉西他滨处理PANC-1细胞72 h后细胞活力（32.33±3.05）%较吉西他滨处理组（63.06±5.98）%显著降低，细胞凋亡率（76.52±8.34）%较吉西他滨处理组（40.88±4.91）%显著增加，差异有统计学意义（t=6.378、7.929，P〈0.05）；沉默FAM83A联合X射线照射后，PANC-1细胞活力（43.25±4.21）%较X射线照射组（78.13±7.98）%明显降低，细胞凋亡率（44.56±5.32）%较X射线照射组（15.15±1.95）%明显增加，差异有统计学意义（t=6.694、8.990，P〈0.05）；沉默FAM83A后细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白Active-β-catenin表达降低，p-β-catenin表达增加，且细胞核中β-catenin表达也降低，差异有统计学意义（t=10.290、8.521、8.969，P〈0.05），而Total β-catenin无明显变化，细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性明显被抑制。结论 沉默FAM83A可能通过Wnt/β-catenin信号抑制胰腺癌细胞干细胞样表型，增强细胞对化疗药物吉西他滨及放射敏感性，FAM83A将可为胰腺癌临床治疗提供新靶点。