微小RNA-597靶向Rab23对肝癌细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-597靶向Rab23对肝癌细胞增殖、凋亡和周期的影响及其分子机制。方法选取南阳市中心医院2017年5月到2019年5月收集的126例肝癌和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析正常肝细胞LO2、肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721和Huh7中miR-597表达水平;采用慢病毒在肝癌细胞系HepG2构建对照miRNA和miR-597过表达细胞系, 分别为对照组和观察组, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和异体移植瘤实验分析肿瘤细胞的增殖能力;采用流式细胞术分析细胞周期和凋亡水平;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-597的靶基因;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测靶蛋白表达水平。组间计量资料比较采用t检验。结果肝细胞LO2中miR-597表达水平(1.09±0.15)明显高于肝癌细胞HepG2、SMMC-7721和Huh7 (0.37±0.14、0.45±0.16、0.58±0.14), 差异有统计学意义(t=4.011、3.714、3.281, P<0.05)。对照组细胞吸光度值(2.87±0.26)明显高于观察组(1.53±0.22), 差异有统计学意义(t=3.091, P<0.05)。对照组细胞克隆形成率[(71.23±8.29)%]明显高于观察组[(38.54±4.98)%], 差异有统计学意义(t=5.220, P<0.05)。对照组小鼠体内肿瘤体积[(1 284.59±209.32) mm^(3)]明显高于观察组[(799.58±109.43) mm^(3)], 差异有统计学意义(t=5.530, P<0.05)。对照组小鼠肿瘤重量[(3.98±0.29) g]明显高于观察组[(1.42±0.19) g], 差异有统计学意义(t=3.218, P<0.05)。对照组细胞S期比例[(34.21±4.58)%]明显高于观察组[(44.58±5.87)%], 差异有统计学意义(t=4.719, P<0.05)。对照组细胞G2期比例[(32.14±4.28)%]低于观察组[(20.37±4.29)%], 差异有统计学意义(t=3.612, P<0.05)。对照组细胞凋亡率[(3.76±1.09)%]明显低于观察组[(24.54±3.68)%], 差异有统计学意义(t=4.006, P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因结果显示, Rab23是miR-597的靶基因。对照组细胞Rab23蛋白表达水平(1.48±0.18)明显高于观察组(0.79±0.15), 差异有统计学意义(t=2.976, P<0.05)。结论 miR-597通过Rab23调控肝癌细胞的增殖、周期和凋亡。