19项临床生化检验项目的分析前变异和个体内生物学变异

目的 调查19项临床生化项目的分析前变异和个体内生物学变异.方法 募集21名健康成年志愿者,自每名志愿者连续抽取10份血样,用于分析前变异试验,抽血和样品处理考虑左右臂、止血带使用、采血管品牌和类型、离心前后贮存等因素;再自每名志愿者抽取另外3份血样,每份间隔1周,按规定进行样品处理,用于生物学变异试验;用常规方法检测各样品的19项生化项目,利用方差分析原理计算分析前变异和个体内生物学变异.结果 由各种分析前处理造成的系统变异总体小于样品随机变异,样品随机变异是分析前变异的主要分量;Cl、Na、Ca分析前变异较小（GV值＜1%）,其他检验项目CV值为1%～7%不等;不同检验项目生物学变异不同,平均生物学变异Cl、Na、Ca较小（CV值＜2%）,TB、TG、ALT、CK较大（CV值＞20%）,其余检验项目介于两者之间,与国外数据库数据接近;个体内生物学变异存在较大个体差异.结论 本研究得出19项常见生化检验项目在我国实验室情况下的分析前变异和基于国人的个体内生物学变异,研究结果可望在检验结果临床应用和临床检验质量控制中发挥作用.

卫生行业标准 WS／T403-2012在全国常规化学室间质量评价和室内质控中的应用

目的：探讨卫生行业标准WS／T 403-2012《临床生物化学常规检验项目分析质量指标》在我国常规化学室间质评和室内质控中的适用性。方法质量管理方法研究。收集2013年常规化学室间质量评价第一次活动中23个项目测定结果。依据卫生计生委行业标准WS／T 403-2012和中华人民共和国国家标准GB／T 20470-2006，分别以两个标准来源的总误差评价收集到的数据结果，并计算不同的标准下2013年常规化学室间质评的总及格率；分别以两种不同的变异系数标准评价室内质量控制的变异系数，比较各项目的符合率。结果按照行业标准的总误差标准，各项目第1次室间质评活动中5个批号样本的全部符合的实验室比例范围为55.5％～94.7％；各项目全年及格率范围为73.9％～98.5％。按照GB／T 20470-2006的允许总误差标准，第1次室间质评活动中5个批号样本的全部符合的实验室比例范围为63.0％～99.2％；各项目全年及格率范围为90.0％～99.7％。按照行业标准的变异系数标准，各项目室内质控变异系数的符合率为55.5％～94.7％；按照1／3 TEa标准，室内质控变异系数的符合率为63.0％～99.2％。结论《临床生物化学常规检验项目分析质量指标》作为常规化学室间质量评价总误差和室内质控不精密度的评判标准，能更全面更客观的评价实验室的分析质量，有助于临床实验室发现问题，进行质量改进。

国际临床化学联合会酶学测定参考方法实验室网络的初步建立

目的总结我国实验室运行国际临床化学联合会（IFCC）酶学测定参考方法情况和参加IFCC参考实验室室间质评（RELA）结果，了解我国酶学参考测量水平。方法目前国内有8家实验室运行全部或部分IFCC酶学参考方法。各实验室按IFCC参考方法建立测量程序，评价各自程序的精密度与准确性，精密度评价按美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP-5进行，准确度评价采用国际有证参考物质。7家实验室参加2006年RELA。结果各实验室目前能达到的批内变异系数（CV）均在1．5％以内，批间精密度在2％以内。部分实验室进行了有证参考物质分析，测定结果偏倚在给定的不确定度范围内。我国酶学实验室在2006年RELA中具有与除外组相似的室间CV，只是样本A乳酸脱氢酶（LDH）及样本BALT的室间CV较大，但剔除可能离群值后室间CV与除外组相似。结论中国酶学实验室经过5年的发展，现在无论从硬件配置还是技术力量上均已接近国外同类实验室，我国临床酶学参考实验室网络已初步建立。

环孢素A滴眼液治疗干眼症的作用机制和研究进展

目的介绍环孢素A滴眼液治疗干眼症的作用机制和相关临床研究进展。方法在数据库检索"环孢素""环孢素A""作用机制""外用制剂"等关键词,查阅近10年的研究文献,并就环孢素A滴眼液的研究历史、治疗干眼症的作用机制和相关临床研究进展进行整理和总结。结果环孢素A滴眼液的上市药物为RestasisTM;其治疗干眼症的作用机制包括免疫抑制、抗细胞凋亡、增加杯状细胞密度和黏蛋白分泌水平及增加眼泪流量等;其临床长期用药安全有效,无全身性不良反应,能明显改善干眼症的不适症状。结论环孢素A滴眼液外用制剂治疗干眼症,具有多种作用机制,临床应用疗效好且不良反应小,可以长期使用。

老年2型糖尿病患者血清胆固醇酯脂肪酸检测

目的探讨老年2型糖尿病（diabetes mellitus,DM）患者血清胆固醇酯脂肪酸及相关生化指标变化情况。方法研究纳入2012年8月至12月北京医院老年体检志愿者145例（年龄≥60岁）,包括确诊为2型DM患者（DM组）73例和健康对照者（对照组）72名,抽取空腹静脉血。用液相色谱串联质谱法测定血清11种主要胆固醇酯脂肪酸,计算各脂肪酸脱氢酶及脂肪酸碳链延长酶活性;同时用自动生化分析仪测定空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、载脂蛋白AI（apolipoprotein AI,ApoAI）、载脂蛋白B（apolipoprotein B,ApoB）、超敏C反应蛋白（high sensitivity C-reactive protein,hsCRP）等生化指标,用独立样本t检验、非参数检验、Logistic回归等方法对数据进行分析。结果 DM组血清脂肪酸CE14∶0、CE16∶1和CE22∶6显著低于对照组（P〈0.05）,其他脂肪酸成分差异不具有统计学意义;与对照组相比,DM组Δ9-脂肪酸脱氢酶（Δ9-desaturase）活性显著降低（P=0.001）;Logistic回归分析显示CE22∶6和Δ9-desaturase活性对预测DM患病风险具有统计学意义（P〈0.05）;校正年龄、性别、体重指数（body mass index,BMI）、TC、TG、FPG因素影响后,与CE22∶6最低四分位数（CE22∶6≤0.47%）相比,最高四分位数（CE22∶6〉0.68%）患DM的比值比为0.27（95%CI：0.08～0.86,Wald值4.93,P〈0.05）;与Δ9-desaturase活性最低四分位数（Δ9-desaturase活性≤0.12）相比,最高四分位数（Δ9-desaturase活性〉0.17）患DM的比值比为0.06（95%CI：0.01～0.22,Wald值17.39,P〈0.01）。CE14∶0和CE20∶3与FPG呈显著负相关（r=-0.18、-0.17,P〈0.05）;CE18∶0与BMI、TG呈显著正相关（r=0.25、0.24,P〈0.01）,而与HDL-C和ApoAI呈显著负相关（r=-0.39、-0.35,P〈0.01）;CE20∶3与BMI的相关性最强（r=0.42,P〈0.01）。结论老年2型DM患者血清部分胆固醇酯脂肪酸降低,CE22∶6和Δ9-desaturase可能对2型DM具有保护作用,平衡脂肪酸摄入对防治2型DM具有重要意义。

全国肿瘤标志检测室间质量评价和方法可比性分析

目的通过开展肿瘤标志（TM）室间质量评价（EQA）计划，了解全国临床实验室TM检测能力和方法可比性。方法2008年3月，将10个批号的EQA质控物邮寄到全国586家实验室。10个质控物分2次测定，每次5个浓度。测定项目为总前列腺特异性抗原（PSA）、游离PSA、癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）、人绒毛膜促性腺激素（HCG）、β—HCG、糖抗原19-9（CA19-9）、癌抗原15—3（CA15-3）、癌抗原125（CA125）、β-2-微球蛋白和铁蛋白等。结果回报后根据方法和仪器分组，去除离群点，组内中位数作为靶值，将“靶值±2倍标准差”范围作为通过标准。计算各组及格率，变异系数（CV）和组间中位数CV等指标，分析方法与仪器组内和组间结果的可比性。结果2008年11项TMEQA结果显示，参加实验室第1次及格率范围为87．3％（CA125）～95．5％（β-2-微球蛋白），第2次及格率范围为83．5％（HCG）～94．0％（β-2-微球蛋白）。各项目全自动化分析仪器系统测定值组内CV〈15％，放射免疫分析（RIA）组和酶联免疫吸附试验（ELISA）组内CV分别〉20％和〉50％。9个项目方法和仪器组间中位数CV〉20％，HCG和铁蛋白CV较小，分别为13．4％和15．7％。部分全自动化仪器系统组间中位数CV〈5％，且差异均无统计学意义（均Z〈1．890，均P〉0．05）。结论全自动化分析仪器分析性能优于RIA和ELISA。相同全自动化仪器系统TM测定结果具有可比性；RIA和ELISA方法内测定结果无可比性；各项目大多数方法或仪器间TM测定结果无可比性。

北京地区汉族人群ALT、AST、GGT和LDH的参考区间研究

目的 建立北京地区汉族人群的ALT、AST、GGT和LDH的参考区间.方法 按照CLSI文件C28-P3《医学实验室参考区间的定义、建立和确认》中的要求,借鉴IFCC多中心酶学参考区间研究模式及参考人群筛选标准,于2009年筛选卫生部北京医院20～60岁健康体检者315名,其中男132名,女183名,用于上述各种酶参考区间的研究.使用酶学参考物质保证本次研究结果的准确性.上述4种酶的检测方法均能溯源到IFCC的参考测量程序,其中检测ALT和AST的试剂中加入磷酸吡哆醛.结果ALT、AST和GGT需要按性别划分参考区间,ALT参考区间：8.2～ 50.8 U/L（女）,12.7 ～71.8 U/L（男）；AST参考区间：15.0～36.7 U/L（女）,16.6 ～51.1 U/L（男）；GGT参考区间：9.0 ～ 37.3 U/L（女）,12.0 ～ 50.9 U/L（男）.LDH无需按性别分组,参考区间为127 ～ 224 U/L.结论 本研究建立了北京地区汉族人群4种酶的参考区间,其中ALT的参考上限高于同类研究.

超速离心HPLC测定血清脂蛋白亚类和脂蛋白(a)胆固醇方法的建立

该研究建立了一种新的血清脂蛋白亚类和脂蛋白(a)[Lp(a)]胆固醇测定方法。用巯基乙醇解离Lp(a)上的载脂蛋白(a),生成的脂蛋白[Lp(a-)]与 Lp(a)有明显的密度分界点,用超速离心分离不同脂蛋白组分,用高效液相色谱测定各组分的胆固醇,从而实现高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)亚类及Lp(a)胆固醇的精密分析。由于脂蛋白及其亚类的分离采用脂蛋白定义法,HDL 不受 Lp(a)污染;所采用的脂蛋白胆固醇分析法(HPLC 法)为中华医学会检验学会推荐的参考方法,已经过充分论证。故本研究所建方法应仅需试验其精密度。此法分析原理新颖,脂蛋白及其亚类定义可靠,所需样品量小,精密度高,在脂蛋白研究领域有较明显的方法学意义。目的建立血清高密度脂蛋白(HDL)亚类、低密度脂蛋白(LDL)亚类和脂蛋白(a)[Lp(a)]胆固醇准确测定方法。方法血清与含脯氨酸的溴化钠溶液混合,使背景密度为1.006和1.044,血清与含脯氨酸和巯基乙醇(ME)的溴化钠溶液混合,使背景密度为1.044、1.063和1.125,超速离心,用高效液相色谱测定各种超速离心底部组分胆固醇,计算 HDL 亚类(HDL_2和 HDL_3)、LDL亚类(LDL_a 和 LDL_b)及 Lp(a)胆固醇。结果 ME 使 Lp(a)解离,解离前后 Lp(a)存在明显密度分界点(1.044),使脂蛋白亚类和 Lp(a)胆固醇测定成为可能;测定 HDL_2、HDL_3、LDL_a、LDL_b 及 Lp(a)胆固醇的总变异系数分别为0.85%～2.66%、0.87%～3.21%、0.86%～1.11%、2.59%～6.35%和4.42%～12.29%。结论建立新的血清 HDL 和 LDL 亚类及 Lp(a)胆固醇测定方法,方法可靠、精密、简便,可望在脂蛋白亚类和 Lp(a)胆固醇测定标准化中发挥作用。

胱抑素 C 标准物质 ERM－DA 471／IFCC 的互通性研究

目的评价胱抑素C标准物质ERM－DA 471／IFCC在8种方法间的互通性。方法实验性能验证。收集2014年1月1日至12月31日检验科检测剩余单人份血清标本46份，将标准物质ERM－DA 471／IFCC、混合血清穿插其中，编号后分为两组，选用雅培公司、西门子公司、罗氏公司、德赛公司、Dako公司、利德曼公司、迈克公司、中生北控公司8种检测方法，在2个工作日内，校准后，分别按正序、逆序测定两次。采用单人份血清测定的均值，用Passing－Bablok 回归计算8方法两两比对的斜率和截距，并计算Pearson 相关系数。采用Deming回归分析并计算其95％置信区间，用于判断ERM－DA 471／IFCC的统计学互通性；根据有生物学变异导出的偏倚的最低要求评价制备物质的临床互通性。结果测定混合人血清的总变异系数范围为0．5％～4．0％；各方法对测定单人份血清结果Passing－Bablock回归的斜率（ Slope）范围为0．765～1．311，截距（ intercept）范围为－0．04～0．242；Pearson回归的决定系数范围为0．988～0．999。根据Deming回归直线95％CI来判断，ERM 471具有互通性的方法对为4／28（14．3％）；根据Cys C生物学变异导出的偏倚的最低要求5．12％来判断，具有互通性的方法对分别为15／28（53．6％）。结论 ERM－DA 471／IFCC在部分方法对间的互通性还不是太理想，将其用作校准品时需评价互通性。（中华检验医学杂志，2015，38：306－309）

15种血清总蛋白检测方法测定结果准确性和可比性研究

目的：依据EP9－A3评价常规检测方法测定血清总蛋白的准确性，掌握EP9－A3建议的回归分析法与Bland－Altman法对血清总蛋白可比性结果判定的差异。方法方法评价性研究。收集46人份血清，分成4套血清盘，分别用于15种常规检测方法和参考方法。按EP9－A3建议的回归分析法计算常规检测方法与参考方法间的相关系数和直线回归方程，并以直线方程计算医学决定水平下（45、60、80 g／L）的相对偏差和95％可信区间。按经典Bland－Altman法或Carstensen改良Bland－Altman法计算常规检测方法与参考方法在医学决定水平下的相对偏差、95％一致限和95％可信区间。将2种方法得到的相对偏差和95％可信区间与生物学变异总误差标准5％进行比较，若都在±5％以内则在该医学决定水平下结果可比。结果（1）按回归分析法，15种常规检测方法和参考方法间的相关都＞0．975（ P＜0．001）；在医学决定水平下，15种常规检测方法和参考方法间的相对偏差和95％可信区间都在±5％以内。（2）经典和Carstensen改良Bland－Altman法处理，1种检测方法无法处理，其余14种检测方法的相对偏差和95％可信区间都在±5％以内。结论回归分析法和Bland－Altman法得到的相对偏差大小和95％可信区间大小都较一致性，15种常规血清总蛋白检测方法与参考方法在医学决定水平下检测结果差异＜5％。（中华检验医学杂志，2015，38：292－295）

血清葡萄糖参考物质在24种常规分析系统上的互通性研究

目的：评价有证参考物质、室间质量评价计划材料、校准品等血清葡萄糖参考物质在24种常规分析系统上的互通性。方法方法学评价。用血清葡萄糖同位素稀释液相色谱串联质谱法为比对方法，血糖常规方法的24种测定系统为待评方法，测定35份单人份冰冻血清和多种参考物质，评价这些物质在各个系统上的互通性。结果5种有证参考物质、2种正确度验证计划材料、5种校准品在参加评价的24种系统上具有良好的互通性。其他参考物质显示不同程度的互通性问题。结论应充分重视互通性问题对血清葡萄糖测定量值传递的影响。（中华检验医学杂志，2015，38：296－300）

液相色谱串联质谱测定血清胆固醇酯n-3脂肪酸方法的建立

目的建立液相色谱串联质谱（liquid chromatography tandem mass spectrometry, LC-MS/MS）测定血清胆固醇酯n-3脂肪酸（CE-n-3FA）的方法，以进行营养监测和心血管疾病危险分析。方法本研究为方法学建立及评价。2012年1-8月征集111名北京地区健康志愿者（年龄19-72岁），其中男55名，女56名。建立各胆固醇酯（CEs）质谱测定条件，异丙醇提取血清CEs，稀释后用LC-MS／MS分析各种CEs，归一化法定量。评价新方法的精密度。用新建立的LC-MS／MS方法测定血清CE-n-3FA含量，同时用试剂盒测定三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和超敏c反应蛋白（hs-CRP）。用Spearman相关分析CE-n-3FA与年龄、体质指数（BMI）、TG、HDL-C、LDL-C和hs-CRP的关系。结果样本分析在5rain内完成，11种主要CEs分离良好；CE20：5和CE22：6平均批内CV分别为1．6％-2．3％和1．5％-2．3％，总CV分别为3．9％-7．6％和3．5％-7．4％，未见明显干扰因素。111名健康志愿者血清分析结果显示，CE20：5和CE22：6均呈正偏态分布（偏度分别为1．81和1．09；峰度分别为4．50和1．40），中位数分别为0．37％（0．13％-1．26％）和0．50％（0．29％-0．94％）。CE20：5与年龄、TG、TC、hs-CRP呈正相关（P〈0．05）。结论成功建立了LC-MS／MS测定血清CE-n-3FA含量的方法，有望用于营养监测，CE-n-3FA与心血管疾病的关系还有待进一步研究。