热量限制对人二倍体成纤维细胞衰老相关基因表达的影响

目的观察热量限制对人二倍体成纤维细胞IMR-90衰老相关基因表达的影响。方法应用RT-PCR和Western blot的方法，对含低浓度（3．0mmol／L）、高浓度（22．5mmol／L）葡萄糖和正常对照组（含5．0mmol／L葡萄糖）培养条件下的IMR-90细胞衰老相关基因p16、p21和p53的mRNA和蛋白表达水平进行分析。结果与对照组和高糖培养条件下的早期和晚期细胞相比较，低浓度葡萄糖培养条件下的早期和晚期细胞p16和p21在mRNA水平均显著下降（P〈0．05）；低浓度葡萄糖组、对照组和高浓度葡萄糖培养组晚期细胞p16蛋白水平分别为4．2、7．4、9．7，比各自早期细胞表达（0．6、1．0、1．8）增加5～7倍；低浓度葡萄糖组，对照组和高浓度葡萄糖培养早期细胞和低糖培养晚期细胞p21蛋白水平差异无统计学意义，分别为1．1、1．0、1．3、0．9，但与对照组和高糖培养晚期细胞p21蛋白水平（3．1、4．2）相比较则降低3～4倍；各组培养条件下的早期和晚期细胞中p53表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论各组晚期细胞比各自早期细胞p16基因表达增高；对照组和高糖培养条件下的晚期细胞比各自早期细胞p21基因表达增高；低浓度葡萄糖培养延缓IMR-90细胞衰老并伴有p16和p21基因表达下调；p53基因可能不是IMR-90细胞复制衰老主要调节因子。