Zika病毒感染的实验室诊断

Zika病毒是一种新现虫媒黄病毒,近期在美洲暴发流行,并有向全球扩散的趋势,已成为国际关注的突发公共卫生事件。Zika病毒感染的临床诊断主要依据实验室检测结果。本文就Zika病毒的核酸检测、抗原和抗体检测、病毒分离鉴定等方面进行综述。

中东呼吸综合征冠状病毒的实验室检测技术

中东呼吸综合征(MERS)是一种由中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染所致的急性呼吸道传染病,其临床诊断需依据实验室病原学检测结果。本文就MERS-CoV的核酸检测、抗原和抗体检测、病毒分离鉴定及基因变异监测等方面的最新研究进展作一综述。

三级生物安全实验室感染性废弃物处理相关问题的探讨

在生物安全管理的各环节中,感染性废弃物的处理是控制实验室生物安全的关键环节。为此,我国制定了关于感染性废弃物处理的法律、法规,以避免污染实验室或环境。本三级生物安全实验室运行的3年中,在处理感染性废弃物时遇到了若干需要认真对待的细节,如固体感染性废弃物处理过程中的灭菌环节、消毒剂使用对压力蒸汽灭菌器的损伤、液体感染性废弃物的灭菌模式等,并提出了解决措施和建议。

结核分枝杆菌生物安全三级实验室表面去污染消毒剂杀菌效果的研究

在高致病性病原微生物实验活动过程中,选择有效的消毒剂对实验室环境去污染非常重要,这也是避免实验室获得性感染发生的有效途径。本研究针对结核分枝杆菌H37Rv,应用滤膜过滤悬液定量杀菌实验进行消毒剂验证,其中75.0%乙醇、含有效氯1 000mg/L的次氯酸钠及Safespore消毒剂可高效杀灭结核分枝杆菌,37.5%乙醇作用延长至10min也可有效杀灭结核分枝杆菌,这为选择针对结核分枝杆菌的生物安全三级实验室表面消毒剂提供了依据。

生物安全三级实验室的工作满意度现状及其与职业紧张程度的关联

因生物安全三级（BSL‐3）实验室工作人员需在特殊工作环境中对高致病性病原微生物进行操作，其心理健康状态可影响实验室生物安全。本研究以工作满意度作为早期心理健康状况的评估指标，对江苏、浙江、上海、福建、湖北5个省市6家BSL‐3实验室工作人员进行调查，分析工作满意度与职业紧张程度的关联。调查结果显示，BSL‐3实验室人员的工作满意率为32．2％。职业紧张程度与工作满意度呈负相关。工作要求‐自主（JDC）模式中“社会支持”是提高工作满意度的因素，高社会支持组比数比（ OR ）值为4．60（95％ CI为1．25～16．97）。付出‐回报失衡（ERI）模式中“内在投入”是降低工作满意度的因素，高内在投入组 OR值为0．03（95％ CI为0．00～0．28）。分析结果提示，可通过加强“社会支持”和解除过度“内在投入”等措施，降低BSL‐3实验室人员的职业紧张程度，从而提高工作满意度。

长模板聚合酶链反应技术在病毒学研究中的应用

长模板聚合酶链反应(PCR)技术是一种可扩增几个kb甚至几十个kb基因片段的PCR新技术,已被用于病毒全长基因,感染性克隆的构建,转录体的制备,病毒基因变异、分型的分析和病毒基因功能组学的研究等方面。

病毒与人类健康——2008年诺贝尔生理学或医学奖简介

2008年10月6日,诺贝尔生理学或医学奖授予了德国科学家哈拉尔德·楚尔·豪森、法国科学家弗朗索瓦丝·巴尔-西诺西和吕克·蒙塔尼,以表彰他们对揭示病毒感染在肿瘤、传染病等人类重大疾病中的致病机制所做出的突出贡献。本文将就病毒感染与人类健康的密切关系做一简要介绍。

快速检测乙型肝炎病毒前核心区基因变异株方法的建立与初步应用

用聚合酶链反应（ＰＯＲ）选择性地扩增血清标本中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因前Ｃ区（Ｐｒｅ－Ｃ）后，以三种寡核苷酸探针Ｍ０（野毒株基因序列）、Ｍ１（ｎｔ．１８９８位点突变株基因序列）、Ｍ２（ｎｔ．１９９８位及ｎｔ．１９０１位上双点突变株基因序列）在极其严谨的条件下分别杂交，检测ＥＢＶＰｒｅ－Ｃ的最常见变异，结果本法具有根高的特异性。应用上述方法检测了３１份乙肝病人的血清标本，结果７份ＨＢｅＡｇ阳性标本中，有４份ＰＣＲ阳性，均与Ｍ０探针杂交，未出现变异；２４份抗－ＨＢｅ阳性标本中，有１０份ＰＣＲ阳性，其中８份表现为Ｍ０伴Ｍ１和（或）Ｍ２阳性，一份为野毒株，另一份与三种探针均不杂交。

重组治疗性乙型肝炎疫苗(YIC)的实验研究

研制了抗原－抗体复合物型乙肝治疗性疫苗。用小鼠实验证明这一治疗性疫苗的作用机理为：通过复合物中抗体Ｆｃ段与抗原呈递细胞表面的Ｆｃ受体结合，促进了细胞摄取抗原。复合物中的抗原经呈递后可比单纯抗原更有效地激活Ｔ细胞增殖，释放更多的γ－干扰素和白细胞介素－２，属ＴＨ１类型应答。复合物可在小鼠中诱生较单纯抗原诱生的抗－ＨＢｓ高１０倍以上。复合物还可诱生更强的细胞免疫，表现为经特异的抗原刺激后，γ－干扰素的 ｍＲＮＡ量增多。还发现复合物可在对 ＨＢｓＡｇ低应答鼠系中（Ｂ １０．Ｓ）诱生与正常应答鼠相当的抗体效价。在 ＨＢｓＡｇ阳性转基因鼠中，复合物可使部分鼠的 ＨＢｓＡｇ转为阴性，并可产生抗－ ＨＢｓ，反映这一疫苗具有疗效。为制备人用乙肝治疗性疫苗建立了用重组酵母菌表达的ＨＢｓＡｇ与人高效价抗乙肝免疫球蛋白组建治疗性疫苗的工艺，以及产品标化及效力的参比实验技术。

乙型肝炎病毒表面抗原-抗体复合物对抗原的加工递呈与诱生细胞因子的作用

乙型肝炎病毒表面抗原－抗体复合物对抗原的加工递呈与诱生细胞因子的作用周生华闻玉梅（上海医科大学卫生部医学分子病毒学重点实验室，上海２０００３２）关键词抗原－抗体复合物，抗原递呈，细胞因子，乙型肝炎表面抗原前曾报道，乙型肝炎（乙肝）疫苗－人抗乙肝免疫球...

埃博拉病毒及其致病机制

自2014年2～3月，西非埃博拉病毒感染的暴发流行已呈播散趋势，受到世界卫生组织的高度重视。我国也提高了防止埃博拉病毒进入国内的警示，并采取了相应措施。现将有关埃博拉病毒的生物学特性、致病机制及相关流行病学与防治策略作简要综述，供参考。

剖析乙肝病毒的包膜——乙肝表面抗原的生物学功能及其致病机制

乙肝表面抗原作为病毒的包膜蛋白,在病人体内大量存在,甚至远远超过成熟病毒颗粒的含量。这表明表面抗原在乙肝病毒感染过程中具有特殊的作用,在乙型肝炎发病机制中扮演了重要的角色。笔者介绍了乙肝表面抗原在乙肝持续性感染致病机制方面的最新研究进展。

核酶的体外合成及其对鸭乙型肝炎病毒S基因体外转录物的定点切割

选择鸭乙型肝炎病毒作为核酶的靶病毒，设计针对病毒前基因组Ｓ基因区第１２８８位和１４６９位“锤头状”核酶序列（ＲＺ１和ＲＺ２）。经体外转录及做核酶切割，ＲＺ１和ＲＺ２均有切割作用，以ＲＺ１作用更强。鉴于核酶在相当于鸭体温（４２℃）有切割作用，因此有可能在鸭体内研究其切割作用。

乙型肝炎病毒变异株功能基因组研究及其临床意义

综述了近年对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）变异株的复制、免疫学特性、致病性、耐药性等功能基因 组研究及其临床意义的研究进展，阐述基因组水平研究ＨＢＶ变异株功能的重要性及有关结果，展望今 后ＨＢＶ变异株生物学特性研究的方向。

利用鸭乙型肝炎病毒感染模型评价血液成分中病毒的灭活效果

目的利用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染动物模型,评价亚甲蓝光化学病毒灭活方法对血液成分中DNA病毒的灭活效果。方法将超离纯化的DHBV分别加入人血浆或人红细胞,经亚甲蓝光化学灭活病毒,将含不同基因组拷贝数DHBV的血浆成分经静脉感染1 d龄雏鸭。采用放射性核素核酸杂交法对血清中DHBV DNA进行检测,计算病毒灭活处理前、后人血浆及人红细胞中DHBV的半数感染计量(ID50)。结果结果显示加入DHBV的血浆在未经灭活处理前对1 d龄雏鸭的ID50值为103.33,而经病毒灭活处理后ID50值为1010拷贝,灭活处理可使病毒感染性滴度下降达6个Log;加入DHBV的红细胞灭活前ID50值为103.35,经灭活处理后ID50值为108.35拷贝,灭活处理使病毒感染性滴度下降5个Log。结论利用DHBV感染动物模型,可以检测到少量病毒在自然感染宿主体内的感染性,可用于评判血液成分中病毒灭活方法的效果,亚甲蓝光化学处理对血浆中DNA病毒的灭活效果较好于对红细胞中DNA病毒的灭活作用。

中东呼吸综合征冠状病毒及其疫苗和特异性药物的研发

中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)是引起MERS的病原。本文就MERS-CoV的分类、特性、决定宿主特异性的分子结构及其疫苗研究状况和特异性药物研究进展等方面进行综述。

抗乙型肝炎病毒单克隆抗体药物的临床前药效学评价

由乙型肝炎病毒(HBV)感染导致的病毒性肝炎是世界范围内的一个重大公共卫生问题,抗HBV抗体药物乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)是阻断乙型肝炎母婴传播和移植性感染的主要用药。但HBIG本身存在一些问题,而重组抗HBV单克隆抗体能成为其有效替代物。在重组抗HBV抗体技术相对成熟的情况下,重组抗HBV单克隆抗体药物功能性评价体系的缺失成为阻碍抗HBV单克隆抗体药物研发的重要因素。本文就现有的抗HBV单克隆抗体药物的评价方法和体系进行综述。

酵母双杂合系统在丙型肝炎病毒NS5A研究中的应用

酵母双杂合系统是在酵母细胞中研究蛋白－ 蛋白相互作用的新技术。应用该技术，以丙型肝炎病毒（ＨＣＶ） 非结构蛋白５Ａ（ＮＳ５Ａ） 为“诱饵”，筛检了人肝癌细胞ＨｅｐＧ２ 来源的ｃＤＮＡ文库，获得了７ 个ＮＳ５Ａ 结合蛋白的基因克隆。报道了其中两个阳性克隆（ ＃ ２ 、＃ １６） 的结果，并对“人核小体组装蛋白相关蛋白”（Ｈｕｍａｎ ｎｕｃｌｅｏｓｏｍｅａｓｓｅｍｂｌｙ ｐｒｏｔｅｉｎ －ｒｅｌａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ，ｈＮＲＰ） 和“载脂蛋白Ａ－Ｉ”（Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ Ａ－ Ｉ） 与ＮＳ５Ａ结合的生物学意义进行了讨论。

鸭乙型肝炎病毒核心抗原DNA疫苗的构建及其诱导的体液免疫应答

为研究鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg)真核表达质粒的免疫原性,分析DHBcAgDNA疫苗诱导的体液免疫应答,首先借助生物信息学方法对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)Core基因编码的氨基酸序列进行亲疏水性分析,分别构建DHBcAg全基因(E-DHBc263)及去除疏水性序列的DHBcAg片段(E-DHBc180)的真核表达质粒,间接免疫荧光检测结果显示可在COS7细胞内表达。进一步构建原核表达质粒p-DHBc263和p-DHBc180,仅p-DHBc180可表达蛋白,纯化后作为酶联免疫吸附试验(ELISA)包被抗原,用于DHBcAb的检测。分别用E-DHBc263和E-DHBc180免疫小鼠,采用间接ELISA检测DHBcAb。结果显示,E-DHBc180可诱导免疫小鼠产生DHBcAb免疫应答,加强免疫后效价可达1∶100～1∶400。结果提示,E-DHBc180可作为DHBcAgDNA疫苗,在DHBV感染鸭模型中评价其效果。