静电场和芒刺静电场对野生型大肠杆菌生长的实验研究

目的:探讨静电场和芒刺静电场对野生型大肠杆菌生长的影响。方法:大肠杆菌经两种电场处理后,应用分光光度计检测其生长增殖和受抑制情况。结果:(1)在静电场电压值为12kV(板间距离3.5cm)时,刺激生长的作用最为显著,实验组与对照组相比增加了4.05%(p<0.01);而电压值为18kV时,抑制其生长(p<0.5)。(2)在芒刺静电场电压值为4kV(芒刺尖端与下极板间距离2.5cm)时,刺激生长的作用最为显著,实验组与对照组相比增加了12.75%(p<0.005),而电压值为18kV时,则杀菌效果明显[1]。讨论:低强度的静电场和芒刺静电场刺激大肠杆菌的生长,而高强度电场抑制其生长。

RNA干扰技术及其在放射医学研究中的应用

核糖核酸(RNA)干扰技术是一个经典的基因调控途径,它可使与小片段干扰性RNA序列互补的RNA发生降解。从其应用前景上说,它会成为研究特定基因功能、细胞内防御机制及维护RNA正常功能的重要工具,RNA干扰技术也会被应用于放射医学研究领域,成为辐射敏感性、辐射效应及放射治疗等研究工作的有效工具。

人脑胶质瘤克隆细胞的放射敏感性

本实验以体外集落形成单位为终点指标,观察了人脑胶质瘤细胞DEF 7A的4个克隆细胞株 K_1、K_2、K_4及K_5受小剂量 0、0.1、0.2、0.5、1.0和2.0 Gy X线照射及受大剂量0、4、8、10和12Gy照射后细胞的种植系数、存活分数及剂量存活曲线。结果表明,K_1细胞的D_0值为4.56Gy,K_2的D_0值为4.43Gy,K_4的D_0值为3.63Gy,K_5的D_0值为4.58Gy。说明DEF7A人脑胶质瘤的4个克隆细胞具有不同的放射敏感性。

碱性成纤维细胞生长因子的放射免疫分析

目的：建立及评价碱性成纤维细胞生长因子（ｂ Ｆ Ｇ Ｆ）的１２５Ⅰ标记及放射免疫分析（ Ｒ Ｉ Ａ）方法。方法：采用氯胺 Ｔ 氧化法进行 ｂ Ｆ Ｇ Ｆ １２５Ⅰ标记，并以双抗体 Ｐ Ｅ Ｇ 的 Ｒ Ｉ Ａ 测定家兔血清 ｂ Ｆ Ｇ Ｆ水平。结果：１２５Ⅰ标记ｂ Ｆ Ｇ Ｆ的碘利用率为８１９８％ ，比放射性为３０３ Ｍ Ｂｑ／μｇ，放化纯度达 ９５０％以上；ｂ Ｆ Ｇ Ｆ 放免分析灵敏度可达 ０４ ｎｇ。结论：本研究为 ｂ Ｆ Ｇ Ｆ 的１２５Ⅰ标记及定量测定提供了简便可靠的方法。

低剂量辐射抑制辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤的免疫学机制

为探讨低剂量辐射对高剂量辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤抑制作用的免疫学机制，采用４次１．７５ＧｙＸ射线全身照射Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠诱发胸腺淋巴瘤模型，检测不同辐射剂量照后１个月小鼠脾脏ＮＫ细胞毒活性及其ＩＬ－２和γ－ＩＦＮ分泌活性，腹腔巨噬细胞吞噬功能及其ＴＮＦ－α分泌活性。结果显示，每次１．７５Ｇｙ照射前１２ｈ接受７５ｍＧｙ照射小鼠，上述免疫功能均比单纯１．７５Ｇｙ照射组增强，且接近假照射组小鼠。提示低剂量辐射抑制高剂量辐射诱发胸腺淋巴瘤可能与低剂量辐射诱导的适应性反应，减轻高剂量辐射对机体免疫功能的损伤有关。

p53 和 Bcl-2/Bax 在辐射诱导胸腺细胞凋亡中的作用

采用流式细胞术对昆明小鼠接受７５ｍＧｙ和２ＧｙＸ射线全身照射后，胸腺细胞内细胞凋亡相关基因ｐ５３、Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白的表达进行了比较研究。结果表明，７５ｍＧｙＸ射线全身照射后２４ｈ，ｐ５３基因蛋白产物的表达显著降低（Ｐ＜０．００５），而２ＧｙＸ射线全身照射后２４ｈ，ｐ５３基因蛋白表达则显著增高（Ｐ＜０．００５）。７５ｍＧｙＸ射线全身照射后２４ｈ，Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ比值明显增加（Ｐ＜０．０５）。而２ＧｙＸ射线全身照射组，Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ比值无明显变化。提示：ｐ５３和Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ在辐射诱导的胸腺细胞凋亡中起着重要作用。

小剂量X射线全身照射后淋巴细胞TCR／CD3表达和［Ca^（2＋）］_i的变化

小剂量Ｘ射线全身照射后淋巴细胞ＴＣＲ／ＣＤ３表达和［Ｃａ￣（２＋）］＿ｉ的变化刘树铮，苏旭，张迎春（白求恩医科大学卫生部放射生物实验室，长春１３００２１）关键词小剂量辐射，淋巴细胞，胸腺细胞，Ｔ细胞受体，ＣＤ＿３，细胞内游离钙Ｔ淋巴细胞表面ＴＣＲ／Ｃ...

用流式细胞计数仪检测不同辐射剂量诱导的小鼠胸腺细胞程序性死亡

用流式细胞计数仪检测不同辐射剂量诱导的小鼠胸腺细胞程序性死亡苏旭，张迎春，刘树铮（白求恩医科大学卫生部放射生物实验室，长春１３００２１）关键词程序性细胞死亡，流式细胞术，胸腺细胞，Ｘ射线自Ｗｙｌｌｉｅ等’‘’对程序性细胞死亡（ＰＣＤ），又名细胞凋亡（...

X射线照射对 EL-4 淋巴瘤细胞周期进程及细胞倍增时间的影响

目的研究不同剂量Ｘ射线照射对ＥＬ４淋巴瘤细胞周期进程及细胞倍增时间的影响。方法离体培养ＥＬ４细胞，计算细胞倍增时间。ＰＩ荧光探针标记，流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞周期各时相细胞的变化。结果０．５Ｇｙ～４．０ＧｙＸ射线照射使ＥＬ４细胞倍增时间明显延长，Ｇ１及Ｇ２期细胞数明显增加。结论０．５Ｇｙ～４．０ＧｙＸ射线照射诱导ＥＬ４细胞明显的Ｇ１及Ｇ２期细胞阻滞，此变化显示出明显的剂量效应和时间效应。细胞周期进程变化与细胞倍增时间延长密切相关。

小剂量 X 射线诱导 EL-4 细胞凋亡及 G_1 期阻滞的适应性反应

采用流式细胞术（ＦＣＭ）观察了小剂量Ｘ射线预照射对其后大剂量照射所致ＥＬ－４细胞凋亡及细胞周期的影响。证实了０．０７５Ｇｙ预照射可明显降低其后２Ｇｙ所致细胞凋亡，减轻Ｇ１期阻滞，并促进细胞ＤＮＡ合成，说明小剂量辐射可诱导ＥＬ－４淋巴瘤细胞凋亡及Ｇ１期阻滞的适应性反应。

电离辐射对小鼠胸腺细胞和脾细胞p53基因mRNA和蛋白表达的影响

采用流式细胞术和 Northern blot法检测了不同剂量 X射线全身照射后 ,小鼠胸腺细胞和脾细胞中 p53基因 m RNA和蛋白表达的变化。结果表明 ,2 .0 Gy X射线全身照射后 ,小鼠胸腺细胞 p53阳性细胞百分数与对照相比 ,在照后 1h开始升高 ,8h达最高 ,以后逐渐下降。不同剂量 X射线照射后 ,小鼠胸腺细胞和脾细胞中 p53基因 m RNA水平的观测结果表明 ,75m Gy及 2 .0 Gy全身照射后 1～ 4 8h,小鼠胸腺细胞和脾细胞中 p53m RNA水平均未见明显的变化 ;0 .5～ 6.0 Gy X射线全身照射后 4 h,小鼠胸腺细胞和脾细胞中 p53m RNA水平亦未见明显的改变。结果提示 ,X射线全身照射可诱导小鼠淋巴细胞 p53蛋白表达 ,其 p53蛋白表达增加是通过转录后机制实现的。

X射线照射对EL-4细胞内NF-κB的DNA结合活性的影响

通过电泳移动变化分析 (EMSA)及免疫组织化学 (IHC)的方法分别检测了 2 Gy和 0 .0 75 GyX射线照射的 EL- 4细胞内转录因子 NF- κB的 DNA结合活性的时程变化和 p6 5亚基胞浆胞核分布情况及 NF- κB抑制因子 IκBα水平的时程变化。结果表明 ,2 Gy和 0 .0 75 Gy X射线照射均可诱导 NF- κBp5 0 / p5 0和 p5 0 / p6 5的 DNA结合活性增强 ,但两种二聚体在两种剂量照射后的结合活性比值不同。0 .0 75 Gy照射诱导 p5 0 / p6 5活性增强为主 ,2 Gy照射诱导 p5 0 / p5 0活性增强为主。2 Gy和 0 .0 75 Gy均诱导 p6 5核转位增多和 IκBα的先降解后表达增多 ,但程度不同。提示不同剂量照射引起的转录调节变化不同 ,因此引起不同的细胞效应。

非小细胞肺癌脑转移的治疗进展

非小细胞肺癌（NSCLC）约占肺癌的80%〔1,2〕,5年生存率仅为15.6%,约2/3患者就诊时已发生区域或远处转移〔3〕。其中,首诊NSCLC的患者约有10%伴有脑转移;初诊没有脑转移的NSCLC患者也有30%~50%最终发生脑转移〔4〕,其预后极差,未经治疗患者的中位生存期（MST）仅1~2个月。随着影像学技术的进步、治疗手段的发展及各种靶向药物的应用。

胸腺细胞体外培养对细胞凋亡和细胞周期进程的影响

本文采用流式的细胞仪研究了小鼠胸腺细胞体外培养对细胞内ＤＮＡ合成、细胞周期以及细胞凋亡的影响。结果表明：胸腺细胞体外培养引起ＤＮＡ合成抑制，细胞有丝分裂延迟，体外培养后４小时即表现出明显的ＤＮＡ合成抑制。８～１２ｈ抑制最深，２４ｈ蛋白质的合成开始恢复，细胞凋亡则表现时间依赖性增高。

低剂量辐射诱导胸腺细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的剂量效应

本研究采用 X射线全身照射昆明系雄性小鼠模型 ,通过流式细胞仪观察低剂量辐射诱导胸腺细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的诱导剂量 (D1 剂量 )及其后攻击剂量 (D2 剂量 )的剂量范围。动物随机分为假照组、D2 对照组和 D1 + D2 实验组。结果表明 ,D1 + D2 组胸腺细胞凋亡小体百分数不同程度地低于 D2 组 ,并且减轻 G1 和 G2 + M期阻滞 ,导致 S期 DNA合成的细胞增加 ;当 D1 达 2 0 0 m Gy时 ,不再诱导胸腺细胞凋亡及细胞周期进程的适应性反应。本实验结果说明 ,D1 在 2 5～ 1 0 0 m Gy(剂量率为 1 2 .5m Gy/min) ,D2 在 1 .0～ 2 .0 Gy(剂量率为 0 .2 87Gy/min) ,接受 D1 和 D2 照射的时间间隔为 6 h。

小剂量辐射抑制肿瘤细胞播散的机理研究

观察了静脉注入肿瘤细胞前24h，75mGyX射线全身照射对小鼠免疫功能的影响。结果表明照射组小鼠胸腺S期细胞百分数于照射后4d，胸腺CD3+细胞百分数于照射后2、8d，脾细胞IL－2和γIFN分泌于照射后4d，脾脏NK细胞活性于照射后2、4、6和8d均较假照射组明显增高（P＜0．05～0．01）。提示小剂量辐射增强机体免疫功能可能与其抑制肿瘤细胞播散有关。

高压芒刺静电场对人肝癌细胞SMMC7721生长的影响

目的:研究高压芒刺静电场对肿瘤细胞生长的影响及杀伤作用。方法:用不同强度高压芒刺静电场作用于体外培养的人肝癌细胞SMMC7721,分别用MTT比色法和流式细胞术检测电场处理后细胞的增殖能力和死亡率。结果:处理后细胞的增殖受到明显的抑制(P<0.05),且细胞的死亡率均显著高于对照组(P<0.01),其中14kV组细胞的死亡率与对照组相比增加了173.7%。结论:一定强度的高压芒刺静电场能够有效抑制肿瘤细胞的生长,并具有一定的杀伤作用。

小鼠 Egr-1启动子的克隆及其辐射诱导特性的研究

目的 :扩增 Egr- 1启动子并构建 Egr- PGL重组质粒 ,探讨不同剂量 X射线诱导被转染的NIH3T3细胞荧光素酶表达活性。方法 :利用 PCR方法扩增 Egr- 1p与 PGL3- E表达载体连接 ,用发光仪测定荧光素酶与底物反应的发光值 ,分析 X射线诱导荧光素酶表达。结果 :对 PCR产物进行测序 ,序列基本正确 ;电泳检测重组质粒 ,有正确的特异性片段 ;重组质粒转染小鼠 NIH3T3细胞鉴定 Egr- 1p的辐射调节特性 ,发现照射组发光值均高于假照组 ,75m Gy照射组的表达量约为假照组的 5倍 ,2、4、6、8和 10 Gy照射组的表达量分别约为假照组的 5～ 7.5倍。结论 :扩增得到的 Egr- 1启动子在不同剂量 X射线照射下均具有诱导下游基因表达增强作用 ;低剂量照射诱导 Egr- 1启动子下游基因表达增强作用的发现可能在肿瘤基因治疗中更具有实用价值。

X射线全身照射对小鼠胸腺细胞CyclinB_1和p34^(cdc2)蛋白表达的影响

本文采用免疫组织化学法研究了低、高剂量 X射线全身照射后不同时间小鼠胸腺细胞 CyclinB1和 p34cdc2 蛋白表达的变化。结果表明 ,与假照组相比 ,75 m Gy X射线全身照射后 8h小鼠胸腺细胞Cyclin B1蛋白表达开始升高 ,12 h达高峰 ,4 8h恢复至正常水平 ;而 2 Gy照射后 4 h小鼠胸腺细胞Cyclin B1蛋白表达开始降低 ,12 h降至最低 ,2 4 h有回升趋势 ,4 8h恢复至假照水平。p34cdc2 蛋白的表达 ,与假照组相比 ,75 m Gy照射后 4～ 4 8h未见明显变化 ;而 2 Gy照射后的时程变化与相同剂量照射后 Cyclin B1蛋白表达的变化基本一致。提示 :低剂量 X射线全身照射可诱导小鼠胸腺细胞 Cyclin B1蛋白表达增强 ,从而促进细胞周期进程 ,但对 p34cdc2 表达无影响 ;相反 ,较高剂量照射导致 Cyclin B1和p34cdc2蛋白表达均下降 ,最终发生 G2 阻滞。

低剂量 X 射线全身照射诱导脾淋巴细胞内[ Ca^(2+) ]_i 及 C D71 表达的适应性反应

为 了观察低 剂量 Ｘ 射 线全身照 射诱导脾 淋巴细 胞内［ Ｃａ２ ＋ ］ ｉ 及 Ｃ Ｄ７１ 表 达的 适应 性反应。采用 Ｆｕｒａ２ 负载，双 波长荧 光测定法 检测 细胞 内［ Ｃａ２ ＋ ］ ｉ 浓 度。 采用 单克 隆 抗体 免 疫荧 光标记，流 式细胞术 检测淋巴 细胞 Ｃ Ｄ７ １ 表达。发现 ００７５ Ｇｙ 低 剂量 预照 射 能明 显减 轻 其后 ２０ Ｇｙ 攻击剂量 照射对 细 胞 内［ Ｃａ２ ＋ ］ ｉ 及 Ｃ Ｄ７ １ 的 抑 制 作 用 。低 剂 量 辐 射 能诱 导 脾 淋 巴 细 胞［ Ｃａ２ ＋ ］ ｉ 及 Ｃ Ｄ７ １ 表达的适 应性反 应。此变 化可能是 低剂量 辐射诱导 Ｔ 淋巴细胞 免疫适 应性反 应的 重要 机制之一。