卫生部生物制品系统医学实验动物工作经究交流会通讯

1989年度卫生部生物制品系统医学实验动物工作经验交流会,受卫生部生物制品总公司委托,由武汉生物制品研究所筹备,于1989年11月20～22日在武昌召开。参加这次会议的有卫生部属6个生物制品研究所、中国药品生物制品检定所、当地同济医科大学、湖北医学院、湖北中医学院、湖北省医学科学院、湖北省医药工业研究所、湖北省药品检验所、武汉市药品检验所等单位,广州军区南岳制药厂也列席,共有代表44名。会议特邀钟品仁、孙靖、王楠田3位研究员参加。会议由武汉生物制品研究所何德娟副厅长主持,武汉生物制品研究所所长卢其材,湖北省科委和省卫生厅领导出席了大会并讲了话,会议收到研究资料19篇,其中10篇进行了交流。这次会议是全国生物制品系统医学实验动物工作者在武汉地区集聚一堂,交流经验,相互学习,共同提高的一次盛会。会议进行了下列活动: 一、钟品仁的《中国医学实验动物现状》、孙靖的澳大利亚实验动物科学观感》

转基因动物在生物制品中的应用及前景

近十年间,转基因动物研究进展迅速,在生命科学领域中普遍得到重视.利用转基因动物作为生物工厂,可大量生产医药用天然蛋白质,如抗体、血液组分蛋白、激素和细胞因子等.作为实验动物模型,它既可作致病机理及疾病防治研究,又可作为敏感动物品系和/或感染动物模型,为疫苗生产及检定提供新的动物来源.转基因动物的器官可望成为人类器官移植的替代品.本文就上述内容进行了讨论.

当前生物制品行业中科技工作问题之浅析

当前生物制品行业中科技工作问题之浅析李向明（卫生部武汉生物制品研究所，武汉４３００６０）生物制品行业的科技工作虽然有许多种内容，但，是以科教为主线的，例如，应用基础研究、成果转化、开发新产品、培养专用人才等。科技工作的重要性可显现在多方面。当今，全国...

治疗用武汉(Wu)抗人T淋巴细胞单克隆抗体与人体组织反应性的体外研究

应用免疫组化法及免疫细胞荧光法体外检测了WuT_3(抗CD_3)、WuT_4(抗CD_4)、WuT_3(抗CD_3)、WuT_9(抗CD_(71)或TfR)及WuTac(抗CD_(25)或IL-2R)等5种小鼠抗人T淋巴细胞单克隆抗体与25种正常人体组织的反应性。结果显示,上述单抗均与淋巴组织中各自靶细胞呈特异性阳性反应。此外,睾丸中散在分布个别WuT_3阳性淋巴细胞,WuT_9与26％的骨髓细胞及小肠粘膜肠腺底部细胞是阳性反应。本文尚探讨了上述单抗在临床治疗器官移植排斥反应等中的应用价值。

一种新型破伤风类毒素的理化和生物学特性的研究

对所研制的新型破类进行SDS－PAGE和HPLC分析，其主要成分为分子量大于584KD的聚合物，HPLC显示第一峰占82．09％～97．68％。此抗原的稳定性能良好，毒性逆转试验阴性，说明此种新破类解毒彻底。动物试验表明，其免疫原性大大优于常规破类，而且达到和超过了1990年版《中国生物制品规程》规定的吸附精制破伤风类毒素的要求。

狂犬病毒分子生物学和各类疫苗的研究进展

狂犬病是由狂犬病毒引起的世界性人兽共患性疾病。我国发病率高,一旦发病,100％死亡。目前控制该病只有依赖疫苗。由于该病潜伏期长,疫苗既可用于预防,亦可用于被带狂犬病毒的动物(中国以犬为主)咬伤后的防制发病。 一、狂犬病毒的分子生物学 (一)病毒的形态、结构和基因:狂犬病毒(RabiesVirus,RV)属弹状病毒科(Rbaldo Viridae),LyssaVirus 属。病毒形态似子弹,长约 180nm,直径为75nm,其头端为半球形,末端为平行。病毒外壳为一紧密完整的脂蛋白双层包膜,表面嵌有

治疗用武汉抗CD3单克隆抗体(WuT_3)的致突变性研究

观察了武汉抗ＣＤ３单克隆抗体（简称ＷｕＴ３）对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌ＴＡ９７、ＴＡ９８、ＴＡ１００及ＴＡ１０２菌株的回复突变作用。结果显示在５～５０００μｇ／皿的剂量范围内，ＷｕＴ３所致的诱发回复突变菌落数与自发回复突变菌落数之比ＭＲ（Ｒｔ／Ｒｃ），无论加大鼠肝匀浆，辅酶Ⅱ及葡萄糖６－磷酸（Ｓ－９混合液）或不加Ｓ－９混合液，均不超过２。同时观察了ＷｕＴ３对小鼠骨髓细胞微核率及对人外周血淋巴细胞染色体畸变率的影响，结果显示小白鼠ｉｖＷｕＴ３，每日一次，连续２日，在２５～１００ｍｇ·ｋｇ－１范围内，ＷｕＴ３各剂量组的微核细胞率与溶剂对照组相比均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。而环磷酰胺（ＣＰ）阳性组与溶剂对照组相比有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。ＷｕＴ３在２５～２５０μｇ／瓶的剂量范围内，各剂量组的染色体畸变细胞率与溶剂对照组相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５），而ＣＰ组与溶剂对照组相比有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。

一株新的狂犬病重组痘苗病毒某些生物学性质的研究

对表达狂犬病毒糖蛋白的重组痘苗病毒ＶＶＭ１１ＫＲＧ株生物学性质进行了研究，该重组病毒的特点是：（１）糖蛋白基因插入到痘苗病毒天坛株基因组ＨｉｎｄⅢＭ片段中；（２）启动子为痘苗病毒天坛株Ｐ１１晚期启动子；（３）不含外源ｌａｃ基因。该重组病毒在ＣＶ－１细胞和鸡胚细胞上繁殖滴渡略高于另一株重组痘苗病毒ＶＶＴＫ１１ＫＲＧ，在鸡胚细胞中繁殖滴度第三天达到最高，在ＣＶ－１细胞中第二天达到最高。温度稳定性与天坛株相比没有明显改变。重组病毒在家兔皮内的毒力比亲本株（天坛株）低。间接免疫荧光和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ都证明了狂犬病毒糖蛋白有良好的表达。通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ证实糖蛋白基因准确地插入到ＨｉｎｄⅢＭ片段中。重组痘苗病毒启动子与部分糖蛋白基因克隆到ｐＧＥＭ３ｚｆ（－）质粒上，对该段ＤＮＡ序列分析表明不会产生移码和融合蛋白，从而为该重组病毒的使用提供了明确的基因背景资料。

武汉(Wu)系列抗人T细胞及其亚群的单克隆抗体

本文报旨了 Wu 系列抗人 T 及其亚群单抗按国际第三次人白细胞分化抗原专题讨论会要求进行检定的结果。这是国内第一套较全的 OKT 样系列单抗,即 WuT1(OKT1,CD5);WuT3(OKT3,CD3);WuT4(OKT4 CD4);WuT6(OKT6,CD1a);WuT8(OKT8,CD8);WuT9(OKT9,抗转铁蛋白受体,抗 TfR);WuT10(OKT10,CD38);WuT11(OKT11,OD2)及 WuTac(Tac,CD25)。

应用生物反应器大规模培养杂交瘤细胞生产体内治疗用WuT3单克隆抗体

用3．5L和14L生物反应器培养WUT3杂交瘤细胞，结果表明用人血清可以代替牛血清培养WuT3细胞，在1％人血清培养液中添加适当营养成分，可达到10％小牛血清浓度下的细胞浓度（1．5×106／ml）和单抗产量（大于50μg／ml）。放大到75L生物反应器中采用半连续方式培养，建立了中试培养工艺流程和质控点，收获时细胞浓度为1.0×106～1．5×106／ml，单抗产量为40～70μg／ml，平均日产单抗达1g。在3．5L、14L、75L逐级放大培养过程中，细胞支原体为阴性，收获上清中单抗免疫活性合格，热原试验合格。

应用正交试验研究麻疹疫苗保护剂和冻干条件

对冻干麻疹活疫苗保护剂、冻干条件等多因素，分三个位级，运用正交实验设计进行试验，并初步筛选出各种保护剂最优成分及冻干过程中温度控制的一般要求。以冻干麻疹活疫苗试验为实例，介绍应用正交试验法在配比配方等多因素情况下的科学性和先进性。

多聚酶链反应及其在实验动物微生物监测中的意义

多聚酶链反应(Polymerase ChainReaction,简称 PCR)是一种在体外以一对寡聚核苷酸引物(Primer)对靶基因序列直接进行特异性酶促扩增的方法,因此又称基因体外扩增技术。此项技术是美国 Cetus公司的 Kary,Mullis 于1985年首创,同年十月。

伤寒Vi多糖菌苗的安全性和免疫效果研究

对我国首次研究成功的伤寒Vi多糖菌酋进行了人体接种安全性、反应性、血清学效果和流行病学效果观察，各期观察达21万余人，结果证实伤寒Vi多糖茵茵安全世良好，反应轻微。血清学效果显示，30μg一次免疫，Vi抗体4倍增长可达91．6％。两次流行病学效果考核，按血培养伤寒杆菌阳性病例统计，保护率可达70％左右，茵茵的效果指数为3．29～3．49。该菌苗性质稳定，初免只需注射一针，替代现行菌体菌苗推广应用是完全可行的。

狂犬病毒在不同细胞培养中持续感染的特性研究

用狂犬病毒CVS株鼠脑感染BSR、BHK和MNA细胞，建立了不同的持续感染狂犬病毒的细胞株（PIRVC），实验表明，不同的PIRVC均经历了一个急性感染期和一个漫性感染期。在急性感染期，释放到上清的病毒滴度经过了一段高振幅的周期性上下波动后，大量细胞脱落，由少数贴壁细胞生长成片，从而进入一个慢性感染期。这一时期释放到上清病毒滴度的波动幅度急剧下降直至丧失。同时对PIRVC急性期病毒增殖特性进行了动态观察，以便利用此特性进行诊断试剂的制备等。

治疗用抗人T淋巴细胞McAb(WuT_3)功能试验方法的研究

为评价治疗用抗人Ｔ淋巴细胞单克隆抗体（ＭｃＡｂ）ＷｕＴ３和ＯＫＴ３的免疫抑制作用，进行了兔皮内移植物抗宿主反应（ＧＶＨＲ）的研究。对试验方法的有关因素：如胎牛血清（ＦＣＳ）和环磷酰胺对ＧＶＨＲ的影响，淋巴细胞浓度和局部反应大小的关系，以及反应出现高峰的时间等进行了观察。建立和稳定了试验方法，并用此方法对ＷｕＴ３和ＯＫＴ３的免疫抑制作用进行了对比。结果表明，两种ＭｃＡｂ均可抑制ＧＶＨＲ，并对ＷｕＴ３和ＷｕＴ４两种ＭｃＡｂ联合应用的效果进行了初步探讨。

中国8个民族HLA多态性的血清学研究

本文报告了中国大陆8个民族,汉、满、蒙、回、藏、布依、苗和维吾尔的HLA多态性的血清学研究。此课题是第11届国际组织相容性会议(11th IHWC)的人类学协作研究题。结果表明,根据HLA Ⅰ类和Ⅱ类抗原的基因频率,布依族、苗族和南方汉族聚类在中国南方群体中,他们同属蒙古人种。树系图表明本文所研究的中国8个民族间与国内外其他民族相互之间的关系。

中国布依族HLAⅢ类抗原的分型研究

我们对贵州省布依族人进行了HLA Ⅲ类抗原—Bf、C4A、C4B、C2的分型研究。试验结果表明布依族的等位基因中以BfS、C4A3、C482、C481的频率为最高,分别达95.2、40.1、41.3、35.9.在Bf、C4A、C4B的单倍型频率中以BfS-C4A3-C4B2;BfS-C4A4-C482为最高,分别达18.0、15.5。本文根据国内文献报道和第11届国际会议资料,对布依族和其他少数民族的补体分型结果作了比较。发现布依族的C2A基因频率是最高的,中国少数民族Ⅲ类抗原分布正如血清学对Ⅰ、Ⅱ类抗原分型一样,可以聚类为南北二大群体。

武汉(Wu)系列抗入T细胞及其亚群单抗

本文报告了Wu系列抗人T及其亚群单抗按国际第三次人白细胞分化抗原专题讨论会要求进行检定的结果。这是国内第一套较全的OKT样系列单抗,即WuT1(OKT1,CD5);WuT3(OKT3,CD3);WuT4(OKT4,CD4);WuT6(OKT6,CD1a):WuT8(OKT8,CD8);WuT9(OKT9,抗转铁蛋白受体,抗TfR);WuT10(OKT10,CD38);WuT11(OKT11,CD2)及Wu-Tac(Tac,CD25)。

趋化因子的研究进展

趋化因子家族分为４类（ＣＸＣ、ＣＣ、Ｃ和ＣＸ３Ｃ），估计有４０～５０种人类趋化因子．趋化因子及其受体的基因定位、结构和功能已逐渐阐明．它们在正常和非正常生理状态下起着重要的作用．