HIV-1 p24抗原检测的应用研究

目的 :用抗HIV 1p2 4单克隆抗体和多克隆抗体构建的间接ELISA试剂 ,检测HIV 1抗体阳性及其它样品 ,探讨应用的可行性。方法 :采用单克隆抗体固相、兔抗HIV 1p2 4抗体夹心 ,羊抗兔HRP结合物的间接ELISA法。结果 :显示试剂盒HIV 1p2 4抗原检出灵敏度为 5 0pg/ml(基因工程抗原 ) ;特异性 99 46 % ;HIV抗体阳性血样阳性率 3 2 % ;抗体阴性的特殊人群血样阳性率 3 9% ;抗体不确定血样阳性率为 15 4% ,明显高于抗体阳性和阴性组血样。病毒培养 1d ,抗原效价 1∶80 ,第 3天可达1∶5 12 0。结论 :该间接夹心HIV 1p2 4抗原检测试剂灵敏度高、特异性好 ,可应用于HIV感染的辅助检测及病毒的基础研究。

Ad-P53癌基因治疗制剂质量分析研究

采用酶切图谱及ＰＣＲ法分析了Ａｄ－Ｐ５３癌基因治疗制剂中Ｐ５３基因的插入顺序；用ＰＣＲ及病变法检查产品中是否污染野生型腺病毒；用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ验证Ｐ５３基因的表达。

嗜人类T淋巴细胞病毒Ⅰ型核心蛋白P24基因的克隆与表达

目的 从感染HTLV-1的中国患者外周血单核细胞（PBMCs）中扩增编码HTLV-1核心蛋白P24的cDNA,并在大肠杆菌中进行表达。方法 提取感染者PBMCs基因组DNA,应用巢式PCR方法扩增出HTLV-1核心蛋白P24的cDNA并测序,与pGEX-20T载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21中表达,采用ELISA和Westernblot分析重组蛋白活性。结果HTLV-1核心蛋白P24基因序列高度保守,构建重组载体后,在大肠杆菌中表达的重组蛋白,经检测具有较强的抗原活性。结论 成功地表达了HTLV-1型病毒的核心蛋白P24基因,为国产诊断试剂和疫苗的研发打下了基础。

抗支原体共同抗原单抗的筛选及应用

利用猪鼻 (mhy)、肺炎 (mp)支原体作为免疫原 ,采用杂交瘤技术建立 7株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞。所分泌的抗体用ELISA法检测与Mo、Ma、Mhy、Al及Mp 5种支原体的反应性 ,其中甲H5和丁D3细胞所分泌的抗体与 5种支原体均发生反应。表明这两种抗体是针对 5种支原体共同抗原的 ;以丁D3抗体作为一抗 ,采用间接荧光法分别检测 5种支原体感染的Vero细胞均为强阳性 ,其敏感性高于培养法 ,与DNA染色法相当 (2 0 0个 /ml) ;以甲H5抗体为包被抗体 ,丁D3抗体为酶标抗体 ,采用双抗体夹心法检测培养上清中支原体敏感性为 12 5ng/ml。用两种方法检测 2 0份支原体阳性细胞株 ,10份阴性细胞株标本 ,结果间接荧光法显示 2 0份阳性标本全部为阳性 ,10份阴性标本 1份为阳性 ;双抗体夹心法 2 0份阳性标本中 10份为阳性 。

腺病毒载体及其基因治疗制品的质量控制

本文介绍了腺病毒与其载体作用相关的基本知识，腺病毒载体的构建方法，从正反两个方面对腺病毒进行评价，综合了腺病毒载体在基因治疗的应用。

麻疹乙脑二联活疫苗猴体神经毒力试验

目的 观察麻疹乙脑二联活疫苗对猴体的安全性。方法 应用麻疹乙脑二联活疫苗注射恒河猴 脑内和脊髓，以麻疹和乙脑单价苗作对照，进行临床体征和组织病理学观察以及抗体测定。结果 全部试验猴临 床体征无异常反应，组织病理学检查联苗组大脑皮质和中脑黑质、颈髓仅见轻微炎症反应，病变均＜５％，未见神经 细胞坏死现象。麻疹抗体应答较好，乙脑抗体有轻微的升高。结论 麻疹乙脑二联活疫苗的神经毒力与两种单价 苗比较未见增强。