补阳还五汤通过抑制炎症反应对创伤性癫痫小鼠的预防作用

目的:探讨补阳还五汤对创伤性癫痫小鼠模型的预防作用及可能的作用机制。方法:将30只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、补阳还五汤组,每组10只。对模型组、补阳还五汤组小鼠施行皮质切割手术,假手术组只进行颅骨钻孔。术后第2天,假手术组、模型组给予10 mL/kg生理盐水(灌胃治疗),补阳还五汤组给予补阳还五汤(32 g/kg)(灌胃治疗),连续干预10 d。第21天腹腔注射戊四氮(PTZ),比较各组小鼠癫痫首次大发作PTZ剂量、首次大发作潜伏期、发作等级、小发作总次数、大发作持续时间、体质量、大脑皮质组织病理形态改变及大脑皮质组织白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组小鼠癫痫首次大发作PTZ剂量少,潜伏期短,持续时间长,发作次数多,大脑皮质神经元细胞少,尼氏小体破损严重,大脑皮质组织IL-6、IL-1β、TNF-α蛋白表达高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,补阳还五汤组小鼠癫痫首次大发作PTZ剂量多,潜伏期长,发作持续时间短,发作次数少,大脑皮质神经元细胞多,排列相对紧密,尼氏小体破损轻,大脑皮质组织IL-6、IL-1β、TNF-α蛋白表达低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组小鼠癫痫发作等级较假手术组高,但差异无统计学意义(P>0.05);补阳还五汤组小鼠癫痫发作等级较模型组低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补阳还五汤可提高创伤性癫痫小鼠癫痫诱发阈值,改善大脑皮质组织病理变化,促进大脑皮质神经元细胞修复和再生;其作用机制可能与减轻大脑皮质炎症反应有关。

微波消解ICP-MS测定粮食、蔬菜中8种元素

目的建立电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）测定粮食、蔬菜中8种元素的方法。方法样品在硝酸介质中经微波消解,消解液用ICP-MS同时测定粮食、蔬菜中Al、As、Cd、Cu、Pb、Zn、Fe和Ca等8种元素的含量。结果用ICP-MS法测定了国家标准参考物质贻贝（GBW08571）和小麦粉（GBW08503B）,其测定值在标准参考值范围内,方法的准确度在79.4%-111.5%,相对标准偏差为1.1%-6.6%。样品加标回收率为93.5%-110%。分析中采用了内标校正和稀释样品的方法,有效地校正了基体干扰。结论微波消解ICP-MS方法简便、快速、准确、可靠,适于食品中多元素同时测定。

饮水微量元素与老年人群认知能力关系研究

在中国山东与河南两省农村研究了饮水中微量元素与老年人群认知能力 (CognitiveFunction)之间的关系。采用中国国标方法分析了饮水中氟、钙、硒、铝、铁、锌、镉、铅、砷微量元素和pH值 ;用老年性痴呆症 (Dementia)调查表 ,进行了≥ 6 5岁老年暴露人群认知能力的测定。调整年龄、性别和文化水平后 ,对微量元素与老年认知能力之间的关系进行直线模型、二次方模型和联合作用模型的统计分析 ,评价饮水中每种微量元素浓度对老年认知能力的影响。结果表明 ,单因素分析时发现几种微量元素对老年认知能力有明显作用。然而 ,在调整其它元素水平后 ,其中一些元素的作用消失。饮水中钙浓度对老年认知能力呈现一作用曲线 ,即随着饮水钙水平升高而认知能力增加 ;到某一点高峰后 ,又随钙水平增加而认知能力降低。而锌与镉之间存在一种相互作用 ,即在低饮水镉水平时 ,锌浓度与认知能力呈正相关 ,但在高饮水镉水平时 。

MRP1/ABCC1基因多态性:从发现到临床应用(英文)

ABCC亚家族属于ABC转运体超家族,ABCC1是ABCC亚家族第一个被发现的成员。它分布于体内几乎所有组织,可以转运多种不同底物,包括药物、重金属离子、机体代谢毒物、谷胱甘肽、葡糖醛酸和硫结合物。随着测序技术的发展,近年来发现很多ABCC1基因多态。越来越多的证据表明一些多态与药物耐药和疾病易感性密切相关。同时,一些体外重构突变的方法也揭示了部分多态的作用机制。总结ABCC1基因多态的最新研究进展(包括ABCC1多态与药物耐药,药物毒性,疾病易感性和严重性,疾病预后的关系,它们的作用机制及如何选择和预测功能性多态)具有重要的意义。

饮水氟与人群龋齿关系的调查研究

为探讨不同饮水氟浓度、不同营养水平对人群龋齿的影响，分低水氟（＜０．３ｍｇ／Ｌ），适宜水氟（１ｍｇ／Ｌ）和高水氟（＞４．８ｍｇ／Ｌ）三个氟水平，每一氟水平又分正常低营养二组，共６个人群组，每组１２０人，平均年龄４６岁，调查计算了人群日总摄氟量，检查了冠面龋与根面龋。同时每组调查了８～１５岁学生１００人。结果经统计分析表明，低饮水氟地区人群的龋患率与龋患指数均明显高于其他两组。低水氟与适宜水氟组人群均无氟斑牙发生，高饮水氟组发生了严重的氟中毒。此结果证明，适宜水氟（１ｍｇ／Ｌ）能起到预防氟中毒与预防龋齿的双重作用。不同营养水平方面，只在低饮水氟２组之间表现出来，低营养组的龋患率明显高于正常营养组。

中国人群长期饮水氟接触与骨折关系调查研究

国外有关饮水氟浓度与骨折关系的报道结果不一致 ,为深入研究饮水中不同浓度的氟对人群骨折的影响 ,采用环境流行病学回顾性调查方法 ,按统一设计的调查方法与询问表 ,调查了 6个饮水氟浓度不同地区人群 (氟浓度分别为 0 2 5～ 0 34、0 5 8～ 0 73、1 0 0～ 1 0 6、1 45～ 2 19、2 6 2～ 3 5 8、4 32～ 7 97mg L)的骨折发生情况及其影响因素。内容包括 :氟暴露水平、骨折情况、人口构成、病史、体格检查、吸烟史、饮酒史、饮水量和膳食营养等。各组≥ 5 0岁的调查人数分别为 136 3、140 7、1370、15 74、10 5 1、15 0 1人 ,共计 82 6 6人。统计分析结果表明 ,饮水中的氟是其主要摄氟来源。 6组人群的全部骨折率分别为 7 41%、6 40 %、5 11%、6 0 4%、6 0 9%和 7 40 % ;自然骨折率分别为 3 0 1%、2 2 1%、1 31%、1 6 5 %、1 43%和 3 6 6 % ,二者均与饮水氟浓度之间呈现U型曲线相关关系。其中以饮水氟为 1 0 0～ 1 0 6mg L组人群的骨折率最低 ,与最低和最高饮水氟组的骨折率比较有显著性差别 (P <0 0 1)。 6组人群髋部骨折率依次为 0 37%、0 43%、0 37%、0 89%、0 76 %和 1 2 0 % ,虽未出现U型曲线关系 ,但仍以饮水氟为 4 32～ 7 97mg L组人群的髋部骨折率最高 ,显著高于 1 0 0～ 1 0

中国农村老年人群APOE基因型频率分布研究

目的了解中国农村地区65岁及以上老年人群 APOE 基因型频率分布,为研究 APOE 基因型频率分布与老年人群健康的关系以及开展防治老年性疾病提供科学依据。方法于2004—2008年4月,选择四川省邛崃市与剑阁县、山东省高密市与淄川区农村地区的老年人群(≥65岁)2000人为调查对象。采用 APOE 分型试剂盒对调查对象指血样品进行检测。结果我国农村地区老年人群 APOE 基因型ε2/ε2、ε2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε3、ε3/ε4、ε4/ε4的频率依次为1.10%,13.55%,2.05%,68.80%,13.35%和1.15%;ε4携带者(ε2/ε4+ε3/ε4+ε4/ε4)与非ε4携带者(ε2/ε2+ε2/ε3+ε3/ε3)分别为16.55%和83.45%。山东省与四川省农村地区老年人群各 APOE 基因型频率间比较,经 x^2检验,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论中国农村地区老年人群 APOEε4基因型频率分布较广。

燃煤污染型氟中毒对人群生化电解质水平的影响

目的 探讨燃煤污染型氟中毒人群与正常人群之间的生化电解质水平有无差异。方法 选择燃煤重度中毒病区 2个村 ,与无室内燃煤氟污染的 2个对照村。每个村检测农民 119～ 12 2人 ,即氟中毒 2 47人 ,无氟中毒农民 2 41人 ,男女各半 ,年龄 35～ 6 0岁。采样测定环境氟水平 ,计算每人每日总摄氟量 ,同时检查氟斑牙 ,右前臂拍 X片诊断氟骨症。应用自动生化分析仪分析血清中 16项生化电解质水平 ,即钾、钠、氯、钙、磷、葡萄糖、尿素氮、尿酸、肌酐、总蛋白、白蛋白、谷草转氨酶、肌酸肌酶、碱性磷酸酶、总胆红素和总胆固醇。以 ANOVA方法进行方差分析。结果 研究结果表明 ,2个氟中毒村每人日总摄氟量为 6 .5 7mg和 8.5 4m g,氟斑牙患病率为92 .86 %与 99.0 2 % ,氟骨症患病率为 14.81%和 14.13% ,2项指标均属正常范围 ,且无氟骨症发生。结论 燃煤污染氟中毒人群与正常人群生化电解质水平均属正常范围。血清碱性磷酸酶活性随氟中毒加重而升高 ,血钾水平随氟中毒加重而升高 。

姜黄素对IL-6损伤的大鼠海马神经元的功能性保护作用及机制

目的:探讨姜黄素对IL-6损伤的大鼠海马神经元的功能性保护作用及其机制。方法:应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),给予Schaffer侧支高频电刺激(HFS)诱发长时程增强(LTP),观察不同药物处理组EPSP起始斜率的变化情况。结果:与对照组相比,IL-6和N-甲基D-天冬氨酸(NM-DA)对大鼠海马脑片的LTP产生明显的抑制作用(P<0.05);而姜黄素可部分拮抗IL-6和NMDA对海马脑片LTP的抑制作用,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05);IL-6、姜黄素和NMDA对大鼠海马神经元的基础突触传递无影响。结论:姜黄素对海马神经元具有功能性保护作用,其机制可能是作用于神经元细胞膜上的NMDA受体,拮抗IL-6引起神经元功能异常。

中国农村老年人群血浆中7种微量元素水平分析

目的了解我国农村地区65岁及以上老年人群血浆中铝、钙、镉、铜、铁、铅和锌等7种微量元素水平。方法采集长年生活于我国四川、山东两省四县市农村的老年人群188人的血样,应用ICP质谱仪测定血浆中的该7种微量元素含量。结果农村≥65岁老年人群血浆中铝、钙、镉、铜、铁、铅、锌的平均含量分别为0.97mg/L、52.07mg/L、1.75μg/L,0.65mg/L、3.64mg/L、3.91μg/L和7.88mg/L。结论本调查研究显示了中国农村老年人群目前7种微量元素水平现况,可为进一步研究这些微量元素与老年人群健康的关系及开展防治老年性疾病提供科学参考。

小鼠左肺原位移植模型的建立

目的通过显微外科技术建立小鼠原位肺移植模型,为肺移植研究提供动物模型。方法采用C57BL/6小鼠作为供、受体,行同基因小鼠原位左肺移植,使用Cuff套管法进行气管及血管吻合。术后7、14、21、28 d取移植肺及原肺,行HE染色,评价肺移植后效果。结果学习曲线后,共30例小鼠移植,手术成功率89%,小鼠成活率100%。供体手术时间:(35.2±9.81)min,受体手术时间:(24.6±7.42)min,冷缺血时间是:(46.6±8.92)min,热缺血时间是:(17.2±3.08)min。同基因移植物大体及病理无明显改变,病理显示与原肺无差别。结论本技术能够方便快捷建立小鼠肺移植模型,成功率高,可重复性强,符合原位肺移植临床生理,是研究肺移植发病机制和治疗的良好动物模型。

胞内Ca^(2+) 、Na^+ 和ATP的稳定性介导NMDA诱导兴奋保护作用(英文)

目的:研究N甲基D天冬氨酸(NMDA)诱导大鼠小脑颗粒神经元兴奋毒性保护作用的机制。方法:分别用Ca2+和Na+敏感的染料Fura2/AM和SBFI/AM测定胞内Ca2+和Na+浓度[(Ca2+)i,(Na+)i]。并用反向高效液相色谱法测定胞内三磷酸腺苷(ATP)的含量。结果:①在NMDA预处理组与非处理组,谷氨酸均迅速触发胞内Ca2+反应高峰,两者无显著性差异。而后在NMDA处理组,胞内Ca2+迅速下降,并维持在高于静息Ca2+水平的平台状,撤离谷氨酸后,[Ca2+]i迅速下降并恢复至静息水平;而NMDA非处理组则相反。②谷氨酸均诱发上述两组神经元[Na+]i升高,在NMDA非处理组,[Na+]i均高于NMDA预处理组。③谷氨酸消耗胞内ATP,而NMDA预处理组则减少胞内ATP的耗竭。结论:NMDA诱导兴奋毒性保护作用是通过减少ATP的消耗而增强胞内Ca2+和Na+的自稳态。

细胞自噬研究的策略、方法及其在中医药干预非酒精性脂肪性肝病机制中的研究现状与前景

探讨细胞自噬研究的策略、误区、技术方法及优选方案,以及自噬在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的调控机制,并阐述中医药干预NAFLD的自噬机制研究现状。认为自噬在NAFLD发病(以初期为主)及治疗过程中可发挥肝细胞保护作用,并在一定程度上延缓病情的发展,自噬的这种保护效应也可能是中医“已病防变”治未病思想在中药微观效应机制中的体现。自噬目前在中医药干预疾病的机制研究领域方兴未艾,具有广阔的研究前景,但也存在有待突破的瓶颈。或可在中药标准化建设取得阶段性成果的基础上,通过开发新的中医药体外研究技术,结合高通量生物信息采集和前沿生物分析技术,取得自噬研究在中医药领域的新进展。

长期饮用不同浓度水氟人群外周血淋巴细胞SCE频率分析

报道了在正常营养与营养不足状态下,长期接触不同浓度水氟的人群外周血淋巴细胞姊妹染色单体交换(SCE)频率,以评价氟对人群的遗传毒性危险度。调查的人群组分为:0.2、1.0和4.8mg/L三个不同的饮水氟水平,每一组水氟浓度又分为正常营养与营养不足两组,共6个组。这些农民长期居住于该地区并饮用该氟浓度的水,年龄为40岁以上。结果表明,高浓度水氟未引起人群SCE频率增加,即本研究未发现氟的遗传毒性作用。

双氯芬酸对人巨噬细胞钾通道Kv1.3、Kir2.1表达的抑制作用及其对膜电位和泡沫细胞形成的影响(英文)

目的分研究双氯芬酸对人巨噬细胞电压依赖性钾通道Kv1.3、内向整流钾通道Kir2.1表达的影响及意义。方法以健康人外周血单核细胞源性巨噬细胞为对象,采用Real-time RT-PCR及Western blot技术研究双氯芬酸对Kv1.3和Kir2.1表达的影响;电压敏感染料膜电位标测技术分析膜电位的变化,并用酶荧光化学法检测摄取氧化修饰低密度脂蛋白(OxLDL)的巨噬细胞内胆固醇酯(CE)的构成比率。结果双氯芬酸(1.5和15μmol/L)抑制巨噬细胞Kv1.3和Kir2.1的表达。同对照组相比,Kv1.3mRNA下降分别超过80%和90%(P<0.05),Kir2.1 mRNA下降分别超过20%和30%(P>0.05);两种钾通道蛋白水平的下降均分别超过10%和60%,且存在明显的剂量依赖性(P<0.05)。同时,双氯芬酸可剂量依赖性减弱巨噬细胞表面的荧光强度,使膜电位分别下降约28%和54%(P<0.05)。巨噬细胞同30 mg/L OxLDL孵育60 h后,细胞体积明显增大,且有许多红色的脂质颗粒沉积于细胞质内,CE/TC的百分比超过50%。1.5和15μmol/L双氯芬酸分别使摄取OxLDL的巨噬细胞内CE的百分比显著减少到(23.624±3.34)%和(13.601±2.916)%,但缺乏明显的量效关系(P>0.05)。结论双氯芬酸显著下调人巨噬细胞Kv1.3和Kir2.1的表达,降低细胞膜电位,并抑制泡沫细胞形成。

吉非贝齐对人巨噬细胞Kv1.3和Kir2.1表达的差别调节作用及其对膜电位的影响

目的:探讨人巨噬细胞发育过程中Kv1.3、Kir2.1通道的表达和吉非贝齐的调节作用,观察其对膜电位的影响,为动脉粥样硬化(AS)相关性疾病治疗提供电生理学依据。方法:健康人外周血单核细胞源性巨噬细胞随机分为对照5d组(C 5d)、对照7.5d组(C 7.5d)和吉非贝齐组(G),吉非贝齐的终浓度为400μmol.L-1;采用Real time RT-PCR及Western blotting技术检测Kv1.3和Kir2.1通道的表达,电压敏感染料膜电位标测技术分析膜电位的变化。结果:与C 5d组比较,C 7.5d组Kv1.3mRNA/蛋白水平从(1.064±0.275)/(0.227±0.018)升高至(3.067±0.824)/(0.409±0.022)(P<0.05),但Kir2.1mRNA/蛋白水平却从(1.024±0.166)/(0.204±0.018)降低至(0.399±0.133)/(0.042±0.008)(P<0.05);与C 7.5d组比较,吉非贝齐组Kv1.3mRNA/蛋白水平下降至(1.137±0.067)/(0.143±0.023)(P<0.01),而Kir2.1 mRNA/蛋白水平却升高至(1.35±0.087)/(0.202±0.033)(P<0.01);吉非贝齐显著消弱C 5d和C 7.5d组巨噬细胞表面的荧光强度,使其膜电位从(1.000±0.026)分别下降至(0.833±0.046)和(0.481±0.053)(P<0.05)。结论:吉非贝齐差别调节人单核细胞源性巨噬细胞Kv1.3和Kir2.1通道的表达,并降低巨噬细胞膜电位。

中国农村老年人群血浆维生素E水平分析

目的了解中国农村地区65岁及以上老年人群血浆中维生素E水平。方法采集长年生活于我国四川、山东两省当地农村的老年人群共计199份血样,应用高压液相色谱法检测血浆中维生素E的含量。结果农村≥65岁老年人群血浆中的维生素E平均含量为6.90±2.40mg/L,其中男性为(6.60±2.24)mg/L、女性为7.20±2.52mg/L。结论本调查研究显示了中国农村老年人群目前维生素E营养水平现况,可为进一步研究维生素E与老年人群健康的关系及开展防治老年性疾病提供科学参考。

曲格列酮分化调节人单核细胞源性巨噬细胞Kv1.3和Kir2.1表达及其对膜电位的影响

目的研究曲格列酮对人单核细胞源性巨噬细胞电压依赖性钾通道Kv1.3、内向整流钾通道Kir2.1表达及膜电位的影响。方法以健康人外周血单核细胞源性巨噬细胞为研究对象,采用Real time RT-PCR及Western blot技术观察曲格列酮对巨噬细胞Kv1.3、Kir2.1表达的调节作用和电压敏感染料膜电位标测技术分析其对巨噬细胞膜电位的影响。结果 50μmol/L曲格列酮显著抑制巨噬细胞Kv1.3的表达,mRNA和蛋白表达下降分别超过82%和60%(P<0.05),而对Kir2.1的表达没有明显影响(P>0.05);同时,巨噬细胞膜电位下降了约23%(P<0.05)。结论曲格列酮分化调节人单核细胞源性巨噬细胞Kv1.3和Kir2.1表达,降低巨噬细胞膜电位。

Nmp4促进TNF-α诱导的成骨细胞凋亡

核基质蛋白4(nuclear matrix protein4,Nmp4)是一种具有核质穿梭功能的结构性转录因子.主要通过负调控调节成骨细胞分化和增殖,抑制骨密度及骨量增加,而Nmp4是否调节成骨细胞凋亡,还未有相关报道.本课题通过分离Nmp4基因敲除(Nmp4-KO)和野生型(WT)小鼠原代成骨细胞,以肿瘤坏死因子(TNF-α)为凋亡诱导手段,研究了Nmp4对成骨细胞凋亡的影响及其作用机制.体外细胞实验发现,Nmp4-KO显著抑制TNF-α诱导的成骨细胞内caspase-3激活.Nmp4-KO促进细胞外信号调节激酶(Erk)和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号途径的激活,抑制c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化,从而对抗成骨细胞凋亡.TNF-α诱导处理可增强成骨细胞核因子NFκB磷酸化及其核转位,但Nmp4基因缺失无进一步促进作用.未经诱导处理的Nmp4-KO细胞内NFκB磷酸化水平显著高于WT对照.此外,TNF-α诱导处理促使线粒体途径信号分子Bad磷酸化及Bcl-xl表达水平适当升高,但在两种细胞表型间无显著差异.这些结果证实,Nmp4基因敲除可促进相关抗凋亡信号分子的激活和表达,抑制促凋亡信号的激活,进而抑制成骨细胞凋亡的发生.

脐带血造血干细胞的分离、提纯与单个干细胞的培养

为了获得纯度较高的造血干细胞供临床应用,我们对人脐带血(Human Umbilical Cord Blood)简称脐血(CB)的分离、提纯和脐血单个干细胞的培养进行了研究,现摘要报导如下:取肝素抗凝的脐血用Ficoll分离获得低密度(LD)细胞,并将LD细胞采用贴壁方法获取非贴壁细胞(NAL)。周NAL细胞进一步作E—玫瑰花结形成试验,去除T淋巴细胞得到NALT^-细胞。然后用CD_(34)单抗作间接免疫荧光标记并用流式细胞仪分离提纯,最后得高标记的CD_(34)~#细胞。在含有甲基纤维素培养体系和重组的四种造血因子(rEPO、rhuMGF、rhull—3、rhuGM—CSF)的96孔板孔中,每孔加入1个CD_(34)~#细胞,在37°C5％CO_2的饱和湿度的二氧化碳培养箱培养14天观察结果。实验结果证明,序列分离提纯技术可大大浓集脐血造血干、祖细胞,集落产率达60～80％,平均为70％。与骨髓相比,脐血中含有丰富的造血干、祖细胞,主要含HPP-CFC,占集落总数的50％,其次是CFu-GM,CFu-GMM和BFU-E,因此脐血有较高的增殖活力。