基于核酸适配体的细胞外囊泡分离分析方法

细胞外囊泡通过参与细胞间通讯,在诸多生理病理过程中发挥着重要作用。因此,细胞外囊泡的分离分析对理解其生物学功能以及发展基于囊泡的疾病诊疗方法具有重要价值。细胞外囊泡的高效分离以及高灵敏可靠检测很大程度上取决于识别配体。核酸适配体是一类高效、特异结合其靶标分子的单链寡核苷酸。核酸适配体的易修饰和可程序化设计等特征,使其成为细胞外囊泡分离和分析的理想识别配体。为提高细胞外囊泡的分离效率,研究者们提出多种策略用于提升核酸适配体的亲和力,以及界面与细胞外囊泡的接触几率。此外,分离不同亚型的细胞外囊泡有助于理解细胞外囊泡的生物学意义。在细胞外囊泡分析方面,根据核酸适配体与细胞外囊泡识别信号的转导方式不同,分为电化学、可视化、表面增强拉曼光谱、荧光法等方法。本文综述了核酸适配体的筛选以及其在细胞外囊泡分离和分析中的最新进展、挑战及未来方向。

HDAC抑制剂丙戊酸通过减少MDSCs蓄积抑制肝癌的生长

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸(VPA)抑制肝癌发生发展的机制。方法将16只Balb/c小鼠注射小鼠肝癌细胞H22建立肝癌原位模型,随机分成2组:对照组和VPA组。术后第2天VPA组小鼠每天腹腔注射VPA(200mg/kg),对照组每天腹腔注射等量的生理盐水。10d后将小鼠处死,观察肿瘤大小及小鼠肝脏质量,利用流式分析小鼠脾脏部位CD4、CD8、NK细胞、MDSCs水平及肿瘤部位MDSCs的比例。建立小鼠肝癌原位模型,利用小动物活体成像分析MDSCs经1mmol/L VPA处理后在体内迁移情况。结果 VPA抑制肝癌原位模型中肝癌生长,上调脾脏CD4、CD8水平,抑制肿瘤和脾脏部位MDSCs蓄积。MDSCs经VPA处理后向肿瘤和脾脏迁移的能力减弱,而MDSCs向骨髓的迁移的能力没有受影响。结论在肝癌微环境中,VPA能够抑制MDSCs向肿瘤和脾脏部位迁移、改善肝癌微环境,从而抑制肝癌生长。本研究为肝癌的治疗提供了一定的实验基础。

双亚苄基哌啶与蛋白酶体抑制剂下调ADRM1表达诱导HL60细胞凋亡

目的探讨双亚苄基哌啶(RA190)与蛋白酶体抑制剂(MG132)对HL60细胞的作用及机制。方法以终浓度0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.8、1.5、1.6、3.2μmol/LRA190或MG132处理HL60细胞为实验组,不加药HL60细胞为对照组,无细胞完全培养基为空白组,各组培养24h,CCK8法检测各组细胞存活率。以1μmol/LRA190或MG132处理24hHL60细胞为实验组,双染法流式细胞术分析各组细胞凋亡率;Westernblot检测细胞内黏附调节分子1(ADRM1)表达水平。结果HL60细胞传代培养1年后,MG132实验组的细胞存活率高于1年前,也高于RA190实验组;RA190与MG132实验组的凋亡率显著高于对照组;RA190实验组的早期凋亡率显著高于MG132实验组;此时,RA190与MG132实验组内ADRM1蛋白表达灰度值比低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论传代培养时间延长可提高HL60细胞对MG132的耐药性;RA190与MG132均可下调HL60细胞内ADRM1蛋白表达,诱导其凋亡;RA190的诱凋亡效果优于MG132。

纳米氧化锌的肺毒性及机制研究进展

纳米氧化锌具有多项优异性能,已逐步进入人们的生活。在日常接触中,纳米氧化锌能通过多种途径进入人体,并残留在组织器官中。吸入是纳米氧化锌进入人体并在肺部沉积的一条重要途径,肺部暴露于纳米氧化锌后将引发一系列毒效应。纳米氧化锌导致肺毒性的机制与Zn^(2+)释放、氧化应激、DNA损伤、自噬、炎症和肺表面活性物质功能异常等有关。本文综述了纳米氧化锌的肺毒性作用及机制,并总结防治策略,可为安全使用纳米材料提供科学依据,也为防治纳米毒性提供潜在干预策略。

双亚苄基哌啶与蛋白酶体抑制剂对舌鳞癌细胞存活率和周期的影响

目的:探讨双亚苄基哌啶(Bis-Benzylidine Piperidon,RA190)与蛋白酶体抑制剂MG132对舌鳞癌细胞活率和周期的影响。方法:分别培养舌鳞癌细胞CAL27、TCA8113。设无细胞空白组、无加药对照组和不同终浓度(0. 1,0. 2,0. 4,0. 5,0. 8,1. 6,3. 2,6. 4μg/m L) RA190或MG132实验组,培养24 h后,CCK8法酶标仪检测各组细胞存活率,流式细胞仪分析各组细胞周期分布情况。结果:相同浓度下,MG132组舌鳞癌细胞存活率低于RA190组(P<0. 05);MG132与RA190组CAL27细胞存活率均低于TCA8113细胞(P<0. 05);MG132组的CAL27细胞G2/M期数量占比高于对照组,差异均有统计学意义(P<0. 05)。结论:舌鳞癌细胞对MG132作用的敏感性高于RA190;CAL27细胞对MG132、RA190的敏感性高于TCA8113;MG132阻滞CAL27细胞于G2/M期,可能提高了CAL27细胞对MG132敏感性。

线粒体相关内质网膜与病原体诱导的炎症反应研究进展

线粒体相关内质网膜(mitochondria-associated membranes,MAMs)是内质网和线粒体外膜通过蛋白质连接组成的一个高度特化亚细胞区,许多蛋白质通过定位或招募到MAMs参与钙稳态维持、细胞凋亡、脂质合成与利用、细胞自噬等重要细胞事件,并为抗病毒信号转导和NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体组装提供平台。鉴于这些功能,MAMs在抵抗病原体感染中发挥重要作用,而病原体也进化出不同策略,靶向MAMs以逃避或拮抗宿主免疫应答,或通过调控MAMs功能为感染建立提供便利。病原体感染是引起炎症反应最常见的原因,急性炎症反应失调常引起一系列慢性炎症性疾病。本文将对MAMs功能与病原体诱导的炎症反应之间联系作一综述。